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公开(公告)号:CN104195260B
公开(公告)日:2015-12-30
申请号:CN201410485406.3
申请日:2014-09-22
申请人: 天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
摘要: 本发明通过巧妙地设计针对转基因玉米品系MIR604的带标记的特异性引物和竞争性引物,应用PCR扩增和试纸条联合检测技术,实现了MIR604的高效快速检测。该方法特异性强,灵敏度高和稳定性好,使用方便快捷,节约成本和时间,原理和操作简单,不需特殊仪器,适合检验检疫部门运用和推广。
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公开(公告)号:CN101328495B
公开(公告)日:2011-06-08
申请号:CN200810053815.0
申请日:2008-07-11
申请人: 天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
摘要: 本发明涉及运用PCR引物检测雀麦(Bromus spp.L)上雀麦腥黑粉菌(Tilletia bromi)的方法,属于禾本科草种病原真菌检测领域。本发明设计合成了4套引物,包括通用外套引物、通用内套引物、T.bromi的外套引物和特异引物。通用外套引物用于Tilletia属菌丝基因组DNA或冬孢子套式扩增,通用内套引物用于Tilletia属冬孢子的套式扩增,这两套引物用于扩增过程质量监测,避免检测过程中的假阴性。设计T.bromi区别于T.controversa、T.caries和T.fusca的特异引物,可用于菌丝基因组DNA常规PCR和冬孢子套式PCR特异扩增,外套引物与特异引物套式扩增冬孢子DNA。本发明建立了一种快速简便、特异性强、灵敏度高、准确可靠的雀麦上T.bromi的分子检测方法,一个工作日内完成整个检测。
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公开(公告)号:CN101328495A
公开(公告)日:2008-12-24
申请号:CN200810053815.0
申请日:2008-07-11
申请人: 天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
摘要: 本发明涉及运用PCR引物检测雀麦(Bromus spp.L)上雀麦腥黑粉菌(Tilletia bromi)的方法,属于禾本科草种病原真菌检测领域。本发明设计合成了4套引物,包括通用外套引物、通用内套引物、T.bromi的外套引物和特异引物。通用外套引物用于Tilletia属菌丝基因组DNA或冬孢子套式扩增,通用内套引物用于Tilletia属冬孢子的套式扩增,这两套引物用于扩增过程质量监测,避免检测过程中的假阴性。设计T.bromi区别于T.controversa、T.caries和T.fusca的特异引物,可用于菌丝基因组DNA常规PCR和冬孢子套式PCR特异扩增,外套引物与特异引物套式扩增冬孢子DNA。本发明建立了一种快速简便、特异性强、灵敏度高、准确可靠的雀麦上T.bromi的分子检测方法,一个工作日内完成整个检测。
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公开(公告)号:CN105400869B
公开(公告)日:2019-01-22
申请号:CN201510701508.9
申请日:2015-10-26
申请人: 天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
IPC分类号: C12Q1/6895 , C12N15/11
摘要: 本发明涉及使用PCR技术检测植物及植物产品中长芒苋(Amaranthus palmeri)的方法,属于有毒有害杂草检测领域。本发明设计合成了长芒苋的特异性引物,用于对长芒苋基因组DNA的特异检测。本发明建立了一种快速简便、特异性强、准确可靠的长芒苋的分子检测方法,一个工作日内完成整个检测。
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公开(公告)号:CN104195262A
公开(公告)日:2014-12-10
申请号:CN201410491821.X
申请日:2014-09-24
申请人: 天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
CPC分类号: C12Q1/6895 , C12Q1/6806
摘要: 本发明公开了拟茎点霉RNA聚合酶(RPB1)基因扩增引物及其设计方法和应用。本发明设计的是针对拟茎点霉属真菌的通用引物。其上游引物PhR1-F有43个碱基:CGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGACTGCAGCAAGGTGTTGGCTG,下游引物PhR1-R有43个碱基:AGCGGATAACAATTTCACACAGGAGCGATGTCGTTGTCCATGTA。本发明设计的拟茎点霉RNA聚合酶基因扩增引物可以快速的对拟茎点霉属真菌进行大规模的遗传背景分析,为我国拟茎点霉的种类鉴定、地理种群鉴别或检验检疫工作提供了重要的工具。
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公开(公告)号:CN104195259A
公开(公告)日:2014-12-10
申请号:CN201410472466.1
申请日:2014-09-17
申请人: 天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
CPC分类号: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12Q2537/143
摘要: 本发明公开了一种同步检测莓类植物上两种检疫性疫霉的三重PCR引物及其扩增方法与用途,涉及3套引物,即疫霉属通用引物、草莓疫霉特异引物和树莓疫霉特异引物,其中通用引物用于菌丝基因组DNA的质量控制,建立三重PCR分子检测,经琼脂糖凝胶电泳观察,疫霉属菌株均应出现884bp的扩增片段,草莓疫霉还应出现615bp特异片段,树莓疫霉还应出现559bp特异片段,三套引物可有效用于两种疫霉的菌丝基因组DNA三重PCR特异扩增。
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公开(公告)号:CN104032002A
公开(公告)日:2014-09-10
申请号:CN201410257542.7
申请日:2014-06-11
申请人: 天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
CPC分类号: C12Q1/6888 , C12Q2600/156
摘要: 本发明提供了2对植物寄生线虫核糖体ITS区通用扩增引物新组合及其用于PCR扩增的使用方法,所述方法的关键创新点为新的引物组合用于植物寄生线虫ITS区PCR扩增后,新建立的PCR扩增体系能够扩增的植物线虫种类更加广谱,扩增效率和成功率显著提高,有效地解决了以前植物线虫鉴定中ITS区扩增存在的诸多问题。利用本发明中的方法扩增获得的PCR扩增产物满足线虫DNA条码鉴定、RFLP酶切鉴定等分子检测技术的需求,可在我国口岸及农林部门检疫鉴定中推广应用。
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公开(公告)号:CN101392300B
公开(公告)日:2011-02-02
申请号:CN200810152502.0
申请日:2008-10-28
申请人: 天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
摘要: 本发明涉及使用一步法实时荧光RT-PCR技术检测菜豆荚斑驳病毒(Bean pod mottlevirus,简称BPMV)的检测方法,属于豆科作物病毒检测领域。本发明针对GenBank中BPMVcp基因序列设计并合成1套Taqman探针及其引物,建立了用一步法实时荧光RT-PCR技术检测菜豆荚斑驳病毒的方法,该方法具有简便快捷、特异性强和灵敏度高的特点,检测下限是20fg/μL,检测时间为3-4小时。
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公开(公告)号:CN101230343A
公开(公告)日:2008-07-30
申请号:CN200810052041.X
申请日:2008-01-10
申请人: 天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
摘要: 本发明涉及套式PCR技术扩增单条植物寄生线虫核糖体rDNA转录间隔区(Internal Transcribed Spacer,ITS)的核酸序列,属于植物寄生线虫检测领域。本发明筛选了3条引物,建立了套式PCR扩增技术,包括2套不同的PCR扩增体系和2套不同的PCR扩增程序,免去了引物大量合成的成本和管理保存的麻烦。本发明的有益效果是:所涉及的技术成熟、操作简单,所用引物少,目前只有3条就基本解决问题,与实时荧光PCR技术相比,该技术成本低,操作简单,可重复性强,假阳性结果出现概率低,可用于单条植物寄生线虫幼虫或通过常规PCR无法扩增的单条植物寄生线虫ITS核酸序列的扩增。非常适合于口岸日常检疫鉴定使用。
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公开(公告)号:CN105567680A
公开(公告)日:2016-05-11
申请号:CN201510872765.9
申请日:2015-12-02
申请人: 天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
摘要: 本发明公开了拟茎点霉RPB2基因扩增引物及其设计方法和应用。本发明设计的是针对拟茎点霉属真菌的通用引物。其上游引物PR2-F有44个碱基:CGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGACATGGCCTACATGAAGCGATG,下游引物PR2-R有46个碱基:AGCGGATAACAATTTCACACAGGAATCTCACAATGCGTGTACATGT。本发明设计的RPB2引物对拟茎点霉属通用性强,扩增测序成功率高,具有合适的片段长度,便于高通量测序与分析,为拟茎点霉分子生态学研究以及检疫鉴定工作提供了重要工具。
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