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公开(公告)号：CN103397073A
公开(公告)日：2013-11-20
申请号：CN201310344527.1
申请日：2013-08-09
申请人： 广西大学
IPC分类号： C12Q1/06
摘要： 本发明一种利用Hoechst33342对猪囊胚进行简易荧光计数的方法，包括以下步骤：(1)、先将猪囊胚于DPBS液中洗涤干净，后放于DT液中透化；(2)、透化完成后放于EH液中脱水、固定、染色；(3)、最后置于甘油，石蜡-凡士林封片，荧光观察并计数。本发明方法具有染色压片后可以很好保持囊胚细胞原始形态，细胞与细胞间界限清晰，可以准确对猪囊胚进行计数；操作简单，基本每一枚囊胚都能很好进行染色，降低宝贵囊胚消耗；所需试剂及器材简单，适用于大部分胚胎生物学实验室，若做成试剂盒使用，可明显提高实验室囊胚质量评定效率的优点。
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公开(公告)号：CN102533856A
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201210007408.2
申请日：2012-01-11
申请人： 广西大学
IPC分类号： C12N15/85 , A61D19/04 , A01K67/027
摘要： 一种受精卵胞质内注射DNA生产转基因水牛的方法。体外成熟的水牛卵母细胞经体外受精IVF后，将携带有增强绿色荧光蛋白EGFP基因的转基因载体pEGFP-N1质粒DNA直接显微注射到水牛受精卵胞质中，制作水牛转基因胚胎，然后在倒置荧光显微镜下挑选表达EGFP的水牛转基因囊胚，移植到受体水牛子宫角中，获得转基因水牛。采用本发明的方法，成功生产了表达EGFP的水牛转基因囊胚，囊胚阳性率达到63％，胚胎移植后成功获得2头表达EGFP基因的转基因水牛。应用本发明培育转基因水牛，操作简单，成本较低，使转基因动物的培育过程大大简化，这为转基因动物的生产提供了一个重要的技术基础，具有重要的理论意义和实际意义。
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公开(公告)号：CN102517287A
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN201210006526.1
申请日：2012-01-10
申请人： 广西大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/867 , C12N15/66 , A61K48/00 , A61P31/04
摘要： 本发明公开了一种抑制水牛TREM1基因表达的shRNA，该shRNA为shRNA-TREM194、或shRNA-TREM294，它们都包含19nt的siRNA正义链，9nt的loop环，19nt的siRNA反义链和终止信号。该shRNA能高效抑制水牛TREM1基因的表达。本发明还公开了上述shRNA的慢病毒表达载体及其构建方法。实验证实，应用本发明的shRNA可有效稳定地抑制水牛TREM1基因表达，展示了在布氏杆菌病防治中的一定的应用前景，也为进一步了解TREM1在LPS诱导的革兰氏阴性菌跨膜机制和信号转导中的作用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN102433308A
公开(公告)日：2012-05-02
申请号：CN201110359694.4
申请日：2011-11-14
申请人： 广西大学
IPC分类号： C12N5/10 , C12N15/12 , C12N15/867
摘要： 本发明公开了一种生产水牛诱导多能干细胞的方法，采用逆转录病毒载体携带特异性转录因子Oct4，Sox2，Klf4，c-Myc，Nanog，Lin28和细胞永生化基因SV40large T(LT)，将水牛体细胞，如胎儿成纤维细胞，直接重编程为具有类似于胚胎干细胞特性的诱导多能干细胞。水牛诱导多能干细胞的产生，可以提供一种获得水牛干细胞的新途径，可以在一定程度上弥补水牛胚胎干细胞难分离、难培养、难建系的问题，水牛诱导多能干细胞的产生，更是为水牛干细胞信号通路及建系的研究提供干细胞来源，同时也为水牛定向遗传改良提供一条新的途径。
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公开(公告)号：CN102174577A
公开(公告)日：2011-09-07
申请号：CN201110025337.4
申请日：2011-01-24
申请人： 广西大学
IPC分类号： C12N15/867 , C12N15/873 , A61D19/04 , A01K67/027
摘要： 一种利用慢病毒载体生产转基因水牛的方法，其步骤为：首先进行高滴度慢病毒的包装及浓缩，对水牛胎儿成纤维细胞进行感染与筛选，采用显微注射法制作水牛转基因嵌合胚胎，将阳性胚胎移植到受体水牛。采用本发明的方法，成功获得了转外源基因的水牛成纤维细胞和转基因水牛嵌合囊胚，30％以上的体细胞表达外源基因，40％以上的囊胚表达外源基因，并成功获得一头转绿色荧光蛋白GFP基因的转基因水牛。
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公开(公告)号：CN101974565A
公开(公告)日：2011-02-16
申请号：CN201010266475.7
申请日：2010-08-30
申请人： 广西大学
IPC分类号： C12N15/877 , C12N15/89
摘要： 一种应用ICSI介导生产转基因水牛胚胎的方法，其特征是步骤为：1.水牛精子与转基因DNA的共孵育；2.水牛精子胞质内显微注射；3.转基因水牛胚胎的培养与鉴定。用本发明的方法，成功获得了转基因水牛胚胎。其中一批102个注射卵中，有61.8％分裂，在卵裂球EGFP表达的胚胎中获得了17个囊胚，其中11个囊胚表达了EGFP，囊胚的转基因阳性率高达64.7％，对其中一个转基因胚胎进行长时间体外培养后，在27天时仍然可看到EGFP的表达，为下一步生产转基因水牛迈出了重要的一步。
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公开(公告)号：CN117919277A
公开(公告)日：2024-04-26
申请号：CN202311708918.7
申请日：2023-12-12
申请人： 广西大学
摘要： 本发明公开了水牛肉在制备治疗和/或预防肠道菌群失调及相关疾病的产品中的应用。本发明通过在高脂饮食小鼠的饲料中添加水牛肉发现，增加水牛肉的摄入可以调节高脂饮食导致的肠道菌群失调，在降低肠道中有害菌门及潜在致病菌丰度的同时提升有益菌丰度，调节肠道菌群结构。此外，增加水牛肉的摄入还可以降低血清中N‑苯乙酰基‑L‑谷氨酰胺、次黄嘌呤等有害代谢物的含量。所述有害血清代谢物与肠道菌群的相关性分析结果也表明，水牛肉能通过改善高脂饮食引起的肠道菌群失调改变血清中的代谢物含量，改善机体代谢，可将水牛肉用于制备治疗和/或预防肠道菌群失调及相关疾病的产品。
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公开(公告)号：CN116478915A
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202310213920.0
申请日：2023-03-07
申请人： 广西大学
IPC分类号： C12N5/075
摘要： 本发明公开了一种用于猪卵母细胞体外成熟三维培养的试剂组合物和方法，所述试剂组合物包括海藻酸盐溶液、钙离子交联液、卵母细胞体外成熟基础液、卵母细胞体外成熟液、海藻酸盐裂解酶、透明质酸酶；所述海藻酸盐溶液的配置介质为PBS缓冲液。本发明通过海藻酸盐水凝胶包埋猪卵母细胞，建立了猪卵母细胞体外成熟三维培养体系，适当浓度的Ca2+与海藻酸盐形成理化性质稳定的凝胶，可改善猪卵母细胞体外成熟的生物物理环境，减少氧化应激水平，不仅可提高卵母细胞体外成熟率与后续胚胎的发育潜能，提高体外生产优质胚胎的效率，加快畜牧生产中猪的品种改良，还可以为探索体外因素对卵母细胞发育的影响及机制奠定基础。
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公开(公告)号：CN115851715A
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202211049529.3
申请日：2022-08-30
申请人： 广西大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/53 , C12N15/11 , C12Q1/6888 , C12Q1/66
摘要： 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种水牛骨骼肌特异高效启动子及其筛选方法和应用。本发明通过高通量测序分析及qRT‑PCR方法获得水牛骨骼肌特异表达基因，根据NCBI数据库中水牛基因组序列获得基因上游拟启动子区并设计引物获得不同的截短片段，利用双荧光素酶报告基因系统鉴定其水牛骨骼肌特异高效启动子区域。所述水牛骨骼肌特异高效启动子如SEQ ID NO:1所示。该水牛骨骼肌特异高效启动子可应用于水牛骨骼肌特异表达基因高效启动。
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