pAPN突变体和用于pAPN基因定点修饰的系统及应用

    公开(公告)号:CN116948979A

    公开(公告)日:2023-10-27

    申请号:CN202311010685.3

    申请日:2023-08-11

    发明人: 李奎 牟玉莲 黄雷

    摘要: 本发明公开了pAPN突变体和用于pAPN基因定点修饰的系统及应用。本发明提供了使pAPN蛋白第727位氨基酸残基发生突变的物质在如下任一中的应用:1)构建非疾病和诊断治疗目的的pAPN基因定点修饰的细胞系;2)制备抗猪传染性胃肠炎病毒的细胞等;本发明提供的用于pAPN基因定点修饰的系统能够对pAPN基因的两个靶位点进行有效酶切,实现pAPN第727位氨基酸的精准突变。在精确修饰pAPN基因的同时,能够避免破坏或改变pAPN的其余氨基酸的正常表达,因此在抵抗TGEV感染的基础上,最大程度上保留pAPN蛋白生理活性功能,并且具有适用范围广、基因编辑效率高等优点。

    体细胞克隆北极狼的方法
    6.
    发明公开

    公开(公告)号:CN116904522A

    公开(公告)日:2023-10-20

    申请号:CN202311028511.X

    申请日:2023-08-15

    IPC分类号: C12N15/877 A01K67/027

    摘要: 本发明涉及体细胞克隆北极狼的方法。本发明以北极狼的体细胞作为核供体、以犬的卵母细胞作为供体卵母细胞构建克隆胚胎,并将克隆胚胎移植至受体母犬,成功获得了健康存活的克隆北极狼。本发明通过动物克隆技术保存了北极狼的遗传基因,实现了北极狼群体的快速扩大,提供了保护北极狼的有效途径。

    一种注射精子蛋白体细胞核移植的方法

    公开(公告)号:CN116640805A

    公开(公告)日:2023-08-25

    申请号:CN202310657320.3

    申请日:2023-06-05

    IPC分类号: C12N15/877 C12N15/89

    摘要: 本发明公开了一种注射精子蛋白体细胞核移植的方法,属于细胞体外培养技术领域。将清洗过的精子反复冻融,然后将体积比为1:5的精子和氯化钠溶液混匀,取上清,离心,得到精子蛋白,再将提取到的精子蛋白注入融合后的供核细胞和去核的卵母细胞内,然后进行胚胎激活和胚胎移植。该方法采用将精子蛋白注射到克隆胚胎的方法,能够弥补传统克隆胚胎缺失精子源调控因子的缺陷。获得精子蛋白的克隆胚胎具有较低的异常胚胎分裂比率,以及较高的发育能力。

    一种基于体细胞核移植技术构建三倍体猪的方法

    公开(公告)号:CN116640804A

    公开(公告)日:2023-08-25

    申请号:CN202310428547.0

    申请日:2023-04-20

    IPC分类号: C12N15/877 A01K67/027

    摘要: 本发明涉及一种基于体细胞核移植技术构建三倍体猪的方法。本发明在体外建立二倍体猪细胞系,以此为核供体进行体细胞核移植,经电融合、电激活后构建克隆胚,检测其克隆胚的体外发育潜力,进一步移植至代孕母猪中继续发育,适时根据B超监测结果获取胎儿,建立胎儿成纤维细胞系进行倍性鉴定及核型分析。以三倍体猪胎儿成纤维细胞为核供体再次体细胞核移植,经电融合、电激活后构建克隆胚,检测其克隆胚的体外发育能力,并进一步移植至代孕母猪体内,生产三倍体猪。本发明克服了猪三倍体胚胎发育效率低、成功率低的问题,对三倍体猪的生产及应用具有重要的意义。

    一种通过秋水仙素诱导多倍体猪的方法

    公开(公告)号:CN116640803A

    公开(公告)日:2023-08-25

    申请号:CN202310428544.7

    申请日:2023-04-20

    摘要: 本发明涉及一种通过秋水仙素诱导多倍体猪的方法。本发明针对二倍体猪成纤维细胞系,利用不同浓度的秋水仙素诱导,通过检测不同浓度诱导后的细胞倍性变化,筛选最佳的秋水仙素浓度,进一步诱导生产多倍体猪细胞系,以此为体细胞核移植的核供体构建猪多倍体克隆胚,再进行胚胎移植生产四倍体猪。本发明首次将秋水仙素成功应用于猪多倍体的诱导中,对促进多倍体猪的生产及育种应用研究具有重要的意义。