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公开(公告)号:CN108314740A
公开(公告)日:2018-07-24
申请号:CN201810186457.4
申请日:2018-03-07
申请人: 上海晶诺生物科技有限公司
摘要: 本发明公开了一种蛋白定向固定化修饰的细胞培养容器。本发明首先构建了一种GMCSF与IL4的融合蛋白,以及一种内壁包被有蛋白的细胞培养容器。该细胞培养容器的制备方法为:给蛋白加上His标签;对细胞培养容器的内壁进行硅烷化处理;对细胞培养容器的内壁进行AB-NTA孵育修饰;加入NiCl2溶液使AB-NTA与Ni偶联;加入含有His标签的蛋白,与AB-NTA中的镍离子进行亲和,使其固定在细胞培养容器的内壁。使用本发明的细胞培养容器培养细胞的过程中,包被的蛋白不会在更换培养液时损失掉,因此无需多次重新加入,也保证了所用蛋白质量的一致性,使得整个培养过程的不可控因素减小,保证细胞培养及分化的效果,同时,具有可逆性、多次利用的优点。
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公开(公告)号:CN108191979A
公开(公告)日:2018-06-22
申请号:CN201711296510.8
申请日:2017-12-08
申请人: 上海晶诺生物科技有限公司
摘要: 本发明公开了一种利用荧光互补检测人趋化因子生物学活性的方法。一种用于检测人趋化因子的生物学活性的融合蛋白组合,包括蛋白CXCR2-VC和蛋白β-Arrestin2-VN,蛋白CXCR2-VC的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,蛋白β-Arrestin2-VN的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过优化黄色荧光蛋白Venus的拆分位点和linker序列的选择,成功的构建了用于检测人趋化因子的生物学活性的融合蛋白组合。通过两个重组载体分别转化,克服了两个重组载体共转化本底荧光较强无法达到检测目的的问题。本发明构建的融合蛋白组进行趋化因子的活性检测,简单易行,步骤简单,检测效果好,结果可靠。
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公开(公告)号:CN108359666B
公开(公告)日:2021-04-20
申请号:CN201810023635.1
申请日:2018-01-10
申请人: 上海晶诺生物科技有限公司
摘要: 本发明公开了一种nudC基因及其在制备烟酸方面的应用。所述nudC基因的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示,其编码蛋白nudC蛋白的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.2所示。利用本发明发现的nudC基因构建的工程菌可以一步直接获得烟酸,不仅避免了现有烟酸化学合成过程中的各种缺点,而且生产条件简单,无污染,简便易行,易放大,成本低,适合于大规模工业化生产应用,有很大的推广价值。
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公开(公告)号:CN108504677A
公开(公告)日:2018-09-07
申请号:CN201810183494.X
申请日:2018-03-06
申请人: 上海晶诺生物科技有限公司
摘要: 本发明公开了一个用于构建谷氨酸基因家族缺失结核分枝杆菌的重组TM4噬菌体文库及其应用。本发明首先提供了一个构建所述重组TM4噬菌体文库所需的重组穿梭载体文库,所述重组穿梭载体文库包括19个重组穿梭载体,分别插入了结核分枝杆菌谷氨酸家族19个成员基因两侧的同源臂序列。本发明构建的重组TM4噬菌体文库可以用于这些基因的敲除,验证这些基因是否是结核分枝杆菌的必需基因,用于构建基因突变替换菌株,用于构建基因敲除突变菌株,临床分离这些基因突变后对突变基因酶活性功能的研究,为结核分枝杆菌氨基酸代谢药物开发提供潜在靶点。
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公开(公告)号:CN108384739A
公开(公告)日:2018-08-10
申请号:CN201810023134.3
申请日:2018-01-10
申请人: 上海晶诺生物科技有限公司
摘要: 本发明公开了一种产烟酸的整合型重组耻垢分枝杆菌及其构建方法。本发明要求保护一种产烟酸的重组耻垢分枝杆菌,其特征在于,所述重组耻垢分枝杆菌含有重组整合型质粒,其中重组整合型质粒含有nudC基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。通过本发明制备得到的工程菌可以一步直接获得烟酸,而不依赖于添加3-氰基吡啶,不仅避免了现有在烟酸化学合成过程中的各种缺点,而且生产条件简单,无污染,简便易行,易放大,成本低,适合于大规模工业化生产应用,有很大的推广应用的价值。
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公开(公告)号:CN118360226A
公开(公告)日:2024-07-19
申请号:CN202410552660.4
申请日:2024-05-07
申请人: 上海晶诺生物科技有限公司
摘要: 本发明公开了一种用于表达结核分枝杆菌蛋白的耻垢分枝杆菌表达菌株,所述耻垢分枝杆菌表达菌株为敲除和/或沉默msmeg1583蛋白和/或msmeg1583基因的耻垢分枝杆菌,所述msmeg1583蛋白在NCBI数据库中的登录号为ABK71399.1,所述msmeg1583基因为编码所述msmeg1583蛋白的基因。利用上述耻垢分枝杆菌表达菌株结合分枝杆菌整合型质粒和/或游离型质粒,均能够产生结核分枝杆菌蛋白,并且能够得到表达量相对更高且纯化的蛋白纯度更高的结核分枝杆菌蛋白。
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公开(公告)号:CN108314740B
公开(公告)日:2024-02-27
申请号:CN201810186457.4
申请日:2018-03-07
申请人: 上海晶诺生物科技有限公司
摘要: 本发明公开了一种蛋白定向固定化修饰的细胞培养容器。本发明首先构建了一种GMCSF与IL4的融合蛋白,以及一种内壁包被有蛋白的细胞培养容器。该细胞培养容器的制备方法为:给蛋白加上His标签;对细胞培养容器的内壁进行硅烷化处理;对细胞培养容器的内壁进行AB‑NTA孵育修饰;加入NiCl2溶液使AB‑NTA与Ni偶联;加入含有His标签的蛋白,与AB‑NTA中的镍离子进行亲和,使其固定在细胞培养容器的内壁。使用本发明的细胞培养容器培养细胞的过程中,包被的蛋白不会在更换培养液时损失掉,因此无需多次重新加入,也保证了所用蛋白质量的一致性,使得整个培养过程的不可控因素减小,保证细胞培养及分化的效果,同时,具有可逆性、多次利用
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公开(公告)号:CN113493788B
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN202110567959.3
申请日:2021-05-24
申请人: 上海晶诺生物科技有限公司
摘要: 本发明公开了一种分枝杆菌启动子库及其应用,所述分枝杆菌启动子库,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其中,N代表A、T、C、G中任一种。本发明针对目前分枝杆菌启动子可选用少,以及因而以此为基础而开发的分子生物学研究工具(表达系统、诱导调控系统等)受限的问题,提供了一种新的分枝杆菌强启动子库。本发明解决了分枝杆菌启动子数目少、表达强度不理想等问题。本发明方法制备得到的分枝杆菌启动子库数目较多、表达强度较高、表达强度梯度范围较广。为开发新疫苗和新型分枝杆菌研究工具打基础。
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公开(公告)号:CN113493788A
公开(公告)日:2021-10-12
申请号:CN202110567959.3
申请日:2021-05-24
申请人: 上海晶诺生物科技有限公司
摘要: 本发明公开了一种分枝杆菌启动子库及其应用,所述分枝杆菌启动子库,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其中,N代表A、T、C、G中任一种。本发明针对目前分枝杆菌启动子可选用少,以及因而以此为基础而开发的分子生物学研究工具(表达系统、诱导调控系统等)受限的问题,提供了一种新的分枝杆菌强启动子库。本发明解决了分枝杆菌启动子数目少、表达强度不理想等问题。本发明方法制备得到的分枝杆菌启动子库数目较多、表达强度较高、表达强度梯度范围较广。为开发新疫苗和新型分枝杆菌研究工具打基础。
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公开(公告)号:CN113416746A
公开(公告)日:2021-09-21
申请号:CN202110322375.X
申请日:2021-03-25
申请人: 上海晶诺生物科技有限公司
IPC分类号: C12N15/74
摘要: 本发明公开了一种aTc诱导表达结核分枝杆菌基因的整合型质粒,建立了一种整合型基于小分子aTc诱导的分枝杆菌表达系统,本诱导表达系统调控动态范围广、适用范围广。本发明调控的基因通过qRT‑PCR检测:Rv3875基因的表达量提高了51.68倍,MSMEG0129基因的表达量降低了6.53倍。该表达系统为分枝杆菌较难表达的蛋白如膜蛋白等提供了稳定的平台,以及对分枝杆菌不能敲除的必需基因提供了敲低的方法,从而对基因功能研究提供了思路。
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