一种蛋白固定化修饰的细胞培养容器

    公开(公告)号:CN108314740A

    公开(公告)日:2018-07-24

    申请号:CN201810186457.4

    申请日:2018-03-07

    摘要: 本发明公开了一种蛋白定向固定化修饰的细胞培养容器。本发明首先构建了一种GMCSF与IL4的融合蛋白,以及一种内壁包被有蛋白的细胞培养容器。该细胞培养容器的制备方法为:给蛋白加上His标签;对细胞培养容器的内壁进行硅烷化处理;对细胞培养容器的内壁进行AB-NTA孵育修饰;加入NiCl2溶液使AB-NTA与Ni偶联;加入含有His标签的蛋白,与AB-NTA中的镍离子进行亲和,使其固定在细胞培养容器的内壁。使用本发明的细胞培养容器培养细胞的过程中,包被的蛋白不会在更换培养液时损失掉,因此无需多次重新加入,也保证了所用蛋白质量的一致性,使得整个培养过程的不可控因素减小,保证细胞培养及分化的效果,同时,具有可逆性、多次利用的优点。

    一种荧光互补检测人趋化因子生物学活性的方法

    公开(公告)号:CN108191979A

    公开(公告)日:2018-06-22

    申请号:CN201711296510.8

    申请日:2017-12-08

    摘要: 本发明公开了一种利用荧光互补检测人趋化因子生物学活性的方法。一种用于检测人趋化因子的生物学活性的融合蛋白组合,包括蛋白CXCR2-VC和蛋白β-Arrestin2-VN,蛋白CXCR2-VC的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,蛋白β-Arrestin2-VN的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过优化黄色荧光蛋白Venus的拆分位点和linker序列的选择,成功的构建了用于检测人趋化因子的生物学活性的融合蛋白组合。通过两个重组载体分别转化,克服了两个重组载体共转化本底荧光较强无法达到检测目的的问题。本发明构建的融合蛋白组进行趋化因子的活性检测,简单易行,步骤简单,检测效果好,结果可靠。

    一种产烟酸的整合型重组耻垢分枝杆菌及其构建方法

    公开(公告)号:CN108384739A

    公开(公告)日:2018-08-10

    申请号:CN201810023134.3

    申请日:2018-01-10

    摘要: 本发明公开了一种产烟酸的整合型重组耻垢分枝杆菌及其构建方法。本发明要求保护一种产烟酸的重组耻垢分枝杆菌,其特征在于,所述重组耻垢分枝杆菌含有重组整合型质粒,其中重组整合型质粒含有nudC基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。通过本发明制备得到的工程菌可以一步直接获得烟酸,而不依赖于添加3-氰基吡啶,不仅避免了现有在烟酸化学合成过程中的各种缺点,而且生产条件简单,无污染,简便易行,易放大,成本低,适合于大规模工业化生产应用,有很大的推广应用的价值。

    一种蛋白固定化修饰的细胞培养容器

    公开(公告)号:CN108314740B

    公开(公告)日:2024-02-27

    申请号:CN201810186457.4

    申请日:2018-03-07

    摘要: 本发明公开了一种蛋白定向固定化修饰的细胞培养容器。本发明首先构建了一种GMCSF与IL4的融合蛋白,以及一种内壁包被有蛋白的细胞培养容器。该细胞培养容器的制备方法为:给蛋白加上His标签;对细胞培养容器的内壁进行硅烷化处理;对细胞培养容器的内壁进行AB‑NTA孵育修饰;加入NiCl2溶液使AB‑NTA与Ni偶联;加入含有His标签的蛋白,与AB‑NTA中的镍离子进行亲和,使其固定在细胞培养容器的内壁。使用本发明的细胞培养容器培养细胞的过程中,包被的蛋白不会在更换培养液时损失掉,因此无需多次重新加入,也保证了所用蛋白质量的一致性,使得整个培养过程的不可控因素减小,保证细胞培养及分化的效果,同时,具有可逆性、多次利用

    一种分枝杆菌启动子库及其应用

    公开(公告)号:CN113493788B

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202110567959.3

    申请日:2021-05-24

    摘要: 本发明公开了一种分枝杆菌启动子库及其应用,所述分枝杆菌启动子库,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其中,N代表A、T、C、G中任一种。本发明针对目前分枝杆菌启动子可选用少,以及因而以此为基础而开发的分子生物学研究工具(表达系统、诱导调控系统等)受限的问题,提供了一种新的分枝杆菌强启动子库。本发明解决了分枝杆菌启动子数目少、表达强度不理想等问题。本发明方法制备得到的分枝杆菌启动子库数目较多、表达强度较高、表达强度梯度范围较广。为开发新疫苗和新型分枝杆菌研究工具打基础。

    一种分枝杆菌启动子库及其应用
    19.
    发明公开

    公开(公告)号:CN113493788A

    公开(公告)日:2021-10-12

    申请号:CN202110567959.3

    申请日:2021-05-24

    摘要: 本发明公开了一种分枝杆菌启动子库及其应用,所述分枝杆菌启动子库,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其中,N代表A、T、C、G中任一种。本发明针对目前分枝杆菌启动子可选用少,以及因而以此为基础而开发的分子生物学研究工具(表达系统、诱导调控系统等)受限的问题,提供了一种新的分枝杆菌强启动子库。本发明解决了分枝杆菌启动子数目少、表达强度不理想等问题。本发明方法制备得到的分枝杆菌启动子库数目较多、表达强度较高、表达强度梯度范围较广。为开发新疫苗和新型分枝杆菌研究工具打基础。

    一种aTc诱导表达结核分枝杆菌基因的整合型质粒

    公开(公告)号:CN113416746A

    公开(公告)日:2021-09-21

    申请号:CN202110322375.X

    申请日:2021-03-25

    IPC分类号: C12N15/74

    摘要: 本发明公开了一种aTc诱导表达结核分枝杆菌基因的整合型质粒,建立了一种整合型基于小分子aTc诱导的分枝杆菌表达系统,本诱导表达系统调控动态范围广、适用范围广。本发明调控的基因通过qRT‑PCR检测:Rv3875基因的表达量提高了51.68倍,MSMEG0129基因的表达量降低了6.53倍。该表达系统为分枝杆菌较难表达的蛋白如膜蛋白等提供了稳定的平台,以及对分枝杆菌不能敲除的必需基因提供了敲低的方法,从而对基因功能研究提供了思路。