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公开(公告)号：CN106978413A
公开(公告)日：2017-07-25
申请号：CN201611216537.7
申请日：2016-12-26
申请人： 上海市农业科学院
摘要： 本发明涉及一种利用尿嘧啶营养缺陷型进行金针菇菌种保护的方法，包括：将金针菇尿嘧啶营养缺陷型单核体NG1‑92与金针菇单核体野生型菌株杂交，出菇后单孢分离获得单核体菌株；将单核体菌株接种于5‑氟乳清酸筛选培养基培养并进行鉴定，得到尿嘧啶营养缺陷型单核体菌株，然后通过单单杂交得到尿嘧啶营养缺陷型双核体菌株。本发明方法简单，成本低，使用常规的菌种分离方法得到的菌种无法正常的生长繁殖，可以有效对金针菇菌种进行保护。
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公开(公告)号：CN105624051A
公开(公告)日：2016-06-01
申请号：CN201610048099.1
申请日：2016-01-26
申请人： 四川大学
CPC分类号： Y02E50/16 , C07K14/395 , C12N13/00 , C12N15/04 , C12P7/10
摘要： 本发明公开了一种基于进化工程构建的木糖发酵酵母菌株及构建方法，该构建方法包括获得融合子，得到DNA片段PTEF1-ERG25-URA3，将DNA片段PTEF1-ERG25-URA3导入到菌株1的TRP1基因的上游片段内部，在MM(-Umix)平板上筛选得到菌株2；得到敲除了URA3标记的菌株3；再获得色氨酸缺陷型菌株4；最后质粒酶切后导入菌株5，再平板筛选转化子获得菌株6，再将菌株7进行驯化筛单菌后得到菌株SEB5。该方法获得的木糖发酵酵母菌株能够有效利用木质纤维素类生物质中的木糖进行乙醇的生产，提高木质纤维素生物质的利用率，并且能够进一步提高乙醇的产率。
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公开(公告)号：CN108330073A
公开(公告)日：2018-07-27
申请号：CN201810266898.5
申请日：2018-03-28
申请人： 河北省科学院生物研究所
摘要： 本发明涉及一种抗木霉菌白色金针菇菌株，其分类名称为金针菇(Flammulina velutipes)，并已于2017年9月20日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC NO：14560。本发明还公开了一种抗木霉菌白色金针菇菌株的筛选方法以及抗木霉菌白色金针菇子实体的栽培料配方。
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公开(公告)号：CN107058284A
公开(公告)日：2017-08-18
申请号：CN201611255850.1
申请日：2016-12-30
申请人： 武汉中科光谷绿色生物技术有限公司
摘要： 本发明提供了一种利用流式细胞术快速分选高山被孢霉原生质体融合子的方法，本发明利用原生质体融合的方法，将两种具备不同优良特性的高山被孢霉进行原生质体制备，分别采用不同荧光染料细胞膜红色荧光探针(DiL)和细胞膜绿色荧光探针(DiO)标记双亲原生质体，融合后利用流式细胞仪分选带两种荧光信号的融合子，检测速度快、分选纯度高，为融合子的筛选提供了一种有效手段。经过本发明筛选的原生质体融合子再生后，明显地提高了高山被孢霉AA产量。
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公开(公告)号：CN105802953A
公开(公告)日：2016-07-27
申请号：CN201610259227.7
申请日：2016-04-25
申请人： 四川省农业科学院土壤肥料研究所
发明人： 王波
IPC分类号： C12N15/04
CPC分类号： C12N15/04
摘要： 本发明公开了一种金针菇种内原生质体融合方法，它包括以下步骤：分离原生质体、标记原生质体、原生质体融合、再生培养融合子和菌种繁殖，标记原生质体步骤包括热灭活标记和化学灭活标记。本发明通过对金针菇分离原生质体、标记原生质体、原生质体融合、再生培养融合子和菌种繁殖，提供了一种金针菇种内原生质体融合方法，该方法解决了传统金针菇育种变异幅度大、筛选工作量大、周期长的缺点，采用本发明方法标记的原生质体稳定，获得原生质体融合子数量多，本发明方法操作简单、周期短、成本低、适用于快速选育优良品种。
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公开(公告)号：CN105802952A
公开(公告)日：2016-07-27
申请号：CN201610188005.0
申请日：2016-03-29
申请人： 上海市农业科学院
摘要： 本发明涉及一种利用尿嘧啶营养缺陷型进行香菇菌种保护的方法，包括：将香菇尿嘧啶营养缺陷型单核体423?9与香菇单核体野生型菌株杂交，出菇后单孢分离获得单核体菌株；将单核体菌株接种于5?氟乳清酸筛选培养基培养并进行鉴定，得到尿嘧啶营养缺陷型单核体菌株，然后通过单单杂交得到尿嘧啶营养缺陷型双核体菌株。本发明方法简单，成本低，使用常规的菌种分离方法得到的菌种无法正常的生长繁殖，可以有效对香菇菌种进行保护。
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公开(公告)号：CN104531535A
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201410555356.1
申请日：2014-10-17
申请人： 南京天凯生物技术股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种生产纽莫康定B0的基因重组菌株及选育方法和应用，所述的基因重组菌株菌株分类命名为Glarea lozoyensis Q45，保藏登记号为CCTCC NO：M2014416，保藏日期为2014年9月14日；选育该菌株的方法是将出发菌株制成原生质体，利用离子注入和氯化锂处理获得由多株突变菌株组成的突变库，突变库再次制成原生质体，将离子注入灭活和热灭活的原生质体进行随机融合，发酵筛选产量高的基因重组菌，然后将筛选得到基因重组菌再次经过原生质体制备、融合与融合子的筛选，得到本发明所述的基因重组菌。本发明提供的菌株性能优良，生产能力稳定，发酵得到纽莫康定B0产量达6g/L，且副产物少，降低了纽莫康定B0后提取难度，有利于其在制备高品质的卡泊芬净中的应用，具有重要的工业价值。
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18.发明授权公开(公告)号：CN102239246B
公开(公告)日：2014-07-23
申请号：CN200880132218.5
申请日：2008-12-31
申请人： 得瑞制药有限公司
发明人： 孙昌旭
摘要： 生物纯的酿酒酵母GP-01培养物，及用于生产酿酒酵母GP-01的方法，所述的酿酒酵母GP-01有乙醇抗性，并且通过酿酒酵母(Saccharomyces cervisiae)(KCTC7904)和乙醇假丝酵母(Candida ethanolica)(KCTC7181)的原生质体融合得到此外，本发明提供了包含高含量有机生物锗的酵母(酵母Ge-32K)和用于生产酵母Ge-32K的方法，该方法包括：将酵母GP-01以1∶0.5-2的体积比加入到偏锗酸钠(Na2GeO3)中；加入0.1-0.4wt％的表面活性剂，代替现有技术中使用的二氧化锗；和培养所得到的肉汤。与通过利用二氧化锗生产的常规酵母相比，获得的酵母Ge-32K包含较高含量的生物有机锗。
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19.发明公开
公开(公告)号：CN102239246A
公开(公告)日：2011-11-09
申请号：CN200880132218.5
申请日：2008-12-31
申请人： 得瑞制药有限公司
发明人： 孙昌旭
摘要： 本发明涉及一种通过使用乙醇抗性酵母和偏锗酸钠(Na2GeO3)，通过原生质体融合，生产包含高含量有机生物锗的酵母的方法。为了增强对抑制酵母生长的乙醇的抗性，本发明提供了用于生产突变的酿酒酵母(ye，d&tGP-01，KCTC 11399BP)的方法，该酵母GP-01具有乙醇抗性并通过将酿酒酵母(Saccharomyces cervisiae)(KCTC7904)和乙醇假丝酵母(Candidaethanolica)(KCTC7181)的原生质体融合得到。此外，本发明提供了包含高含量有机生物锗的酵母(酵母Ge-32K)和用于生产酵母Ge-32K的方法，该方法包括以下步骤：将酵母GP-01以1∶0.5-2的体积比加入到偏锗酸钠(Na2GeO3)中；加入0.1-0.4wt％的表面活性剂，代替现有技术中使用的二氧化锗；和培养所得到的肉汤。与通过利用二氧化锗生产的常规酵母相比，获得的酵母Ge-32K包含较高含量的生物有机锗。
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