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公开(公告)号:CN115353567A
公开(公告)日:2022-11-18
申请号:CN202211015327.7
申请日:2022-08-23
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N5/078 , C12N5/09 , C12N5/20 , C12N15/02 , C12N13/00 , G01N33/577 , G01N33/53 , G01N33/558 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供一种基于细胞分选与微流控电融合技术的单克隆抗体制备方法,包括:1)针对特定化合物,设计人工抗原;2)用人工抗原免疫实验动物,分离淋巴细胞;3)用免疫磁珠法对淋巴细胞进行分选,获得稀有浆细胞;4)将分选的稀有浆细胞与骨髓瘤细胞混合,采用微流控电融合芯片进行细胞融合,从融合细胞中筛选出分泌抗该化合物的单克隆抗体的杂交瘤细胞。本方法操作简单,为高性能单克隆抗体的精准制备奠定基础,在科研与实际生产中具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN115327105A
公开(公告)日:2022-11-11
申请号:CN202210980177.7
申请日:2022-08-16
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/543 , G01N33/58 , G01N33/53 , G01N33/535 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种基于Pd@Pt纳米酶直接标记一抗的一步法ELISA检测小分子化学污染物的方法。它包括如下步骤:将靶标小分子物质全抗原包被到酶标板上;包被后加入封闭液;向封闭后的酶标板中分别加入待检样品溶液和靶标小分子物质标准品溶液,然后均加入Pd@Pt纳米酶免疫探针,发生竞争性免疫反应;然后加入底物显色,显色完毕后终止免疫反应;测定显色后溶液的吸光度值,以靶标小分子物质标准品溶液浓度的对数形式为横坐标、以吸光度值为纵坐标绘制标准曲线,根据待检样品溶液经显色后溶液的吸光度值和标准曲线计算,即可得到待检样品溶液中靶标小分子物质的含量。本发明能实现对靶标小分子污染物高灵敏、高特异、高通量的一步法快速检测。
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公开(公告)号:CN115078515A
公开(公告)日:2022-09-20
申请号:CN202210758753.3
申请日:2022-06-30
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于高分辨质谱成像技术原位可视化分析药用植物化学成分及空间分布的方法。它包括如下步骤:将药用植物制备得到干燥的待测样本切片,于光学显微镜下观察,得到待测样本切片的形态光学图像;采用质谱成像检测方法将待测样本切片在质谱仪中进行电离扫描,通过数据处理软件对得到的质谱扫描数据进行处理获得待测样本切片中的全息化学成分的质谱成像图;对质谱成像图中信息,与标准品的质谱成像图或文献高分辨质谱数据进行比对,鉴定得到待测样本中的化学成分;通过对待测样本切片的形态光学图像与质谱成像图进行比对,得到待测样本中的化学成分的空间分布规律。本发明具有快速、简便、无需任何样品前处理技术的优势。
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公开(公告)号:CN114487404A
公开(公告)日:2022-05-13
申请号:CN202111630811.6
申请日:2021-12-28
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/573 , G01N33/569 , G01N33/558
Abstract: 本发明公开了用于检测细菌内碳青霉烯酶的免疫层析试纸条及检测方法。用于检测细菌内碳青霉烯酶的免疫层析试纸条,包括依次粘贴在底板上的样品垫、NC膜、吸水垫和底板,其中NC膜上设有检测线和质控线,检测线包被有青霉素‑BSA,质控线包被有His融合标签抗体。本发明还提供用于检测细菌内碳青霉烯酶的试剂盒,包括细菌裂解液、反应孔I、II和所述试纸条;反应孔I包被有美罗培南,反应孔II包被有胶体金标记的PBP 4’受体蛋白复合物。本发明选用性质稳定的美罗培南作为底物,以金标青霉素结合蛋白PBP 4’作为受体,通过检测底物消耗情况间接检测样品中碳青霉烯酶的有无。为细菌内碳青霉烯酶的快速检测提供有力技术手段。
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公开(公告)号:CN114134163A
公开(公告)日:2022-03-04
申请号:CN202111306352.6
申请日:2021-11-05
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了单个抗原特异性转基因杂交瘤细胞筛选方法,通过制备表达EGF‑R‑AVI‑tag融合蛋白的转基因Sp2/0骨髓瘤细胞,结合传统杂交瘤技术的脾细胞融合技术,获得可在细胞膜展示分泌型特异性抗体的转基因杂交瘤细胞,并利用单细胞分选系统实现对单个特异性转基因杂交瘤细胞的筛选。本发明基于转基因技术,提供一种精准、高通量的转基因杂交瘤单克隆抗体生产平台。与传统杂交瘤技术相比,显著缩短了单个抗原特异性杂交瘤细胞的制备时间和成本,提高了单细胞率和阳性率,且制备的单克隆抗体的效价和亲和力也显著提高。本发明提供的转基因杂交瘤抗体制备技术可用于制备高特异性、高灵敏度和高稳定性稀有单克隆抗体,应用前景广阔。
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公开(公告)号:CN114014935A
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN202111416006.3
申请日:2021-11-25
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07K16/44 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/866 , C12N5/10 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了抗磺胺类药物纳米抗体与大豆过氧化物酶的融合蛋白及应用。本发明将通过噬菌体展示技术获得的抗磺胺类药物纳米抗体基因与大豆过氧化物酶基因优化后连接,并利用昆虫细胞杆状病毒表达系统对其进行融合表达。产生的融合蛋白具有与磺胺类药物的结合活性和过氧化氢酶的催化活性,该融合蛋白用于以免疫标记技术为基础的酶联免疫分析检测,其IC50值为1.21ng/mL,线性检测范围为0.27‑5.34ng/mL。该融合蛋白具有耐高温、耐有机溶剂、易生产等特性,基于该融合蛋白的检测方法具有快速、灵敏、稳定的优势。本发明对于磺胺类药物的低成本、大批量样品的残留现场检测具有重要意义。
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公开(公告)号:CN113968865A
公开(公告)日:2022-01-25
申请号:CN202010714570.2
申请日:2020-07-22
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07D491/18 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K14/795 , C07K1/107 , C07K16/44 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种倒千里光碱的半抗原、人工抗原及其制备方法与应用。所述倒千里光碱的半抗原的结构式如式I所示,可按照下述方法制备得到:在4‑二甲氨基吡啶的催化下,倒千里光碱与琥珀酸酐进行反应即得。采用活泼酯法将载体蛋白偶联于半抗原的羧基碳上得到所述倒千里光碱人工抗原。本发明还提供了一种倒千里光碱的单克隆抗体,通过所述倒千里光碱人工抗原免疫实验动物,经过细胞融合、筛选和体外诱生得到。所述倒千里光碱的单克隆抗体可用于制备倒千里光碱检测试剂或试剂盒。本发明在食品安全检测中具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN113398128A
公开(公告)日:2021-09-17
申请号:CN202110676916.9
申请日:2021-06-18
Applicant: 中国农业大学
IPC: A61K31/439 , A61K31/4196 , A61K31/22 , A61P31/04 , A61P29/00 , A61P13/02 , A61P17/00 , C07D471/08 , C07D249/14 , C07C323/61 , C07C323/52
Abstract: 本发明公开了截短侧耳素类化合物的新用途。该用途是截短侧耳素类化合物在抑制万古霉素耐药屎肠球菌感染中的应用。截短侧耳素类化合物对102株万古霉素耐药屎肠球菌临床分离菌株具有极强的抑菌活性,且能有效减少万古霉素耐药屎肠球菌在小鼠肠道内的定殖,从而减少其造成的全身感染的风险,恢复肠道菌群多样性和稳定性。因此截短侧耳素类化合物可用于治疗由万古霉素耐药屎肠球菌感染引起的疾病。
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公开(公告)号:CN112941214A
公开(公告)日:2021-06-11
申请号:CN202110332663.3
申请日:2021-03-29
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6869 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于革兰氏阴性菌耐药基因高通量扩增子测序的引物组及应用。本发明提供了一种用于革兰氏阴性菌耐药基因高通量扩增子测序的成套引物,由序列1‑序列84所示的引物组成。本发明建立的一种针对42中临床常见耐药基因的扩增子测序检测分析方法。该方法具有快速、高效、高靶向、特异性强等技术优点,适用于临床和畜牧养殖业中多种耐药基因的流行和差异分析。
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公开(公告)号:CN112852938A
公开(公告)日:2021-05-28
申请号:CN202110333426.9
申请日:2021-03-29
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/6869 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于革兰氏阳性菌耐药基因高通量扩增子测序的引物组及应用。本发明提供了一种用于革兰氏阳性菌耐药基因高通量扩增子测序的成套引物。本发明提供的成套引物,由序列1‑序列78所示的引物组成。本发明建立的一种针对39种临床常见耐药基因的扩增子测序检测分析方法。该方法具有快速、高效、高靶向、特异性强等技术优点,适用于临床和畜牧养殖业中多种耐药基因的流行和差异分析。
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