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公开(公告)号：CN118599690A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410884232.1
申请日：2024-07-03
申请人： 华南理工大学
摘要： 本发明公开一种耐受甲醇的高产α‑亚麻酸的毕赤酵母工程菌及其构建方法和应用，属于生物技术领域。本发明在毕赤酵母中筛选了膜磷脂相关基因，利用代谢工程和组学分析技术，构建并优化磷脂酰胆碱合成的途径，并过表达三酰甘油脂肪酶TAG基因，得到耐受甲醇的高产α‑亚麻酸的毕赤酵母工程菌株。在发酵罐水平添加5％的初始甲醇浓度，对高产α‑亚麻酸的毕赤酵母工程菌进行非灭菌发酵；其中，工程菌34在58h的OD600达到最高108.28，最高α‑亚麻酸的含量可以达到72.72g/L。本发明得到的高产α‑亚麻酸的毕赤酵母工程菌株具有重要的理论和实际意义，具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN117025493A
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202310800350.5
申请日：2023-07-03
申请人： 华南理工大学
摘要： 本发明公开了一种重组发光大肠杆菌以及联合微流控技术筛查污染物毒性的方法及其应用。所述重组发光细菌LUMY022为大肠杆菌MG1655在基因组lacZ位置插入青海弧菌Q67发光基因操纵子luxCDABE、大肠杆菌内源基因mgtA、ompC。将该发光菌株制备冻干粉，‑80℃储存备用。复苏后的发光大肠杆菌通过微流控系统生成50个液滴，通过全自动添加梯度浓度的单一或混合污染。孵育12小时以后，观察对照和污染物添加组的发光值变化情况。选取合适的暴露时间，绘制浓度‑抑制率曲线，计算污染物半数抑制发光浓度EC50值。
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公开(公告)号：CN116426397A
公开(公告)日：2023-07-14
申请号：CN202310305819.8
申请日：2023-03-27
申请人： 华南理工大学
摘要： 本发明公开一种表面展示龙葵金属硫蛋白的重组毕赤酵母及其构建方法和应用，涉及分子生物学和基因工程领域。本发明采用毕赤酵母表面展示技术，利用锚定蛋白Gcw61通过连接子Linker将龙葵金属硫蛋白SMT2a展示表达在毕赤酵母GS115菌株表面，再过表达翻译起始因子eIF4A进一步提高蛋白表达量，得到表面展示龙葵金属硫蛋白SMT2a的重组菌株GS115/pPIC9K‑3FSMT‑LGcw61‑4A。该重组菌株可作为一种生物吸附剂，在10～40℃、pH3～7、镉离子浓度50～1500μM中较对照菌株均有更高的镉吸附能力。
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公开(公告)号：CN114703159A
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202210252128.1
申请日：2022-03-15
申请人： 华南理工大学
摘要： 本发明公开一种葡糖基转移酶突变体及其应用，属于蛋白质工程技术领域。本发明使用生物信息学手段，通过蛋白建模、结构分析等方法确定若干个位于非保守区域的蛋白表面氨基酸，并进行单个或组合突变，得到的突变体在SEQID NO.1所示氨基酸序列的野生型UDP‑葡糖基转移酶中突变A11L、F39Y、S58G、S55P、N109K、A250E、I279L、V304L和T329I中的至少一个位点。得到的突变体较野生型UDP‑葡糖基转移酶热稳定性和酶活均显著提高，在甜味剂甜菊糖苷(莱鲍迪苷D和/或莱鲍迪苷E)的工业化生产中应用，可提高生产效率，降低生产成本，市场前景广阔。
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公开(公告)号：CN114019169A
公开(公告)日：2022-02-08
申请号：CN202111174703.2
申请日：2021-10-09
申请人： 华南理工大学
摘要： 本发明公开了一种定量检测无细胞蛋白质合成系统目的蛋白产量及筛选高催化活性酶蛋白的方法。该定量检测CFPS系统目的蛋白产量的方法使用分割荧光蛋白自发结合发出的荧光强度值，可快速地分析CFPS系统中目的蛋白的表达量，有利于CFPS系统中目的蛋白表达量的快速检测；同时，基于该方法，通过计算各个酶蛋白催化得到的产物量与分割荧光蛋白自发结合后的荧光强度值的比值，可快速筛选高催化活性的酶同系物，无需进行常规的大肠转化‑表达‑纯化流程，大大节省了时间与材料成本，提高了筛选速度，且避免了由于蛋白表达量过低而引起的高催化活性蛋白的漏筛风险，有利于实现高催化活性酶蛋白快速准确的筛选。
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公开(公告)号：CN113862319A
公开(公告)日：2021-12-31
申请号：CN202111102846.2
申请日：2021-09-16
申请人： 华南理工大学
摘要： 本发明公开了人参糖基转移酶在合成甜菊糖中的应用，所述糖基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。上述人参来源的糖基转移酶PgUGT具有催化合成莱鲍迪苷E与莱鲍迪苷D的新功能，通过酶法可催化合成获得大量的莱鲍迪苷E与莱鲍迪苷D，产率达到97.2％以上，转化率高，进一步降低成本，操作简便，适合大规模推广和工业化实施。而且本发明利用基因工程获得可以高产表达人参来源糖基转移酶，得到适合产业化的廉价易得的高活性生物酶。
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公开(公告)号：CN113604378A
公开(公告)日：2021-11-05
申请号：CN202110758825.X
申请日：2021-07-05
申请人： 华南理工大学
摘要： 本发明公开了一种制备罗汉果甜苷代谢产物的复合菌剂及其应用，所述复合菌剂包含：普雷沃菌、纺锤链杆、巨单胞菌、拟杆菌、大肠埃氏菌‑志贺氏菌、长栖粪杆菌、林斯氏菌、布劳特氏菌、巨球型菌、考拉杆菌、阿利斯佩斯菌、双歧杆菌、狄氏副拟杆菌、粪厌氧棒杆菌、粪球菌、链球菌、颤螺旋菌、瘤胃球菌、多尔氏菌、丁蓖麻球菌、梭状芽胞杆菌XlVa。所述复合菌剂可以高效制备罗汉果甜苷代谢产物，将罗汉果甜苷完全转化，并且复合菌剂来源于健康人群肠道，安全高效，而且来源广泛且成本低廉。并且与罗汉果甜苷相比，罗汉果甜苷代谢产物具有更强的抗氧化活性，具有一定的药用价值。
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公开(公告)号：CN113502297A
公开(公告)日：2021-10-15
申请号：CN202110654277.6
申请日：2021-06-11
申请人： 华南理工大学
摘要： 本发明公开了一种合成鸟苷二磷酸岩藻糖的重组毕赤酵母及其构建方法与应用，所述重组毕赤酵母是通过在毕赤酵母GS115的基因组表达岩藻糖‑1‑磷酸鸟苷转移酶和岩藻糖激酶得到的。通过改造获得了可合成鸟苷二磷酸岩藻糖的菌株，可以高效合成鸟苷二磷酸岩藻糖。本发明重组毕赤酵母的构建方法简单，便于使用，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN109706090B
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN201811510659.6
申请日：2018-12-11
申请人： 华南理工大学
摘要： 本发明公开一种基于Sec63的不同重组蛋白表达水平的毕赤酵母菌株的分选方法，涉及基因工程技术领域。本发明将毕赤酵母内质网膜蛋白(Sec63)融合表达荧光蛋白，通过分选出荧光值高低不同的菌株而分选出重组蛋白表达水平不同的菌株。本发明使用荧光蛋白(EGFP)荧光值可以快速地分选出不同重组蛋白表达水平的毕赤酵母菌株，简便快速，无需繁琐的操作，有利于不同重组蛋白表达水平的毕赤酵母重组菌株的快速分选。
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公开(公告)号：CN110484519B
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201910640530.5
申请日：2019-07-16
申请人： 华南理工大学
摘要： 本发明公开了一种毕赤酵母翻译相关因子Bcy1在外源蛋白表达中的应用。本发明中发现毕赤酵母翻译相关因子Bcy1(注释为蛋白激酶A调节亚基)，可以显著提高细胞发酵过程中的生物量，提高增强型绿色荧光蛋白eGFP的表达量，提高植酸酶Phy的表达量，以及可促进毕赤酵母发酵稳定期的细胞生长，增加细胞生物量积累，说明毕赤酵母翻译相关因子Bcy1具有很强的通用性，其在增加发酵过程中生物量积累和提高外源蛋白的产量方面具有良好的应用前景。
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