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公开(公告)号：CN112941054A
公开(公告)日：2021-06-11
申请号：CN202110021973.3
申请日：2021-01-08
申请人： 南京工业大学
摘要： 本发明公开了一种几丁质内切酶CmChi4及其克隆表达与应用。通过基因工程手段将几丁质酶基因CmChi4构建在质粒pCOLDI上，并转入E.coli BL21(DE3)中表达，该重组酶分子量大小为72.1kDa。对CmChi4酶学性质研究表明，在温度50℃、pH为6时活力最佳；Fe2+、K+、Al3+和Zn2+对酶CmChi4具有较强的激活。此外，几丁质内切酶CmChi4水解胶体几丁质的产物为(GlcNAc)2、(GlcNAc)3和(GlcNAc)4，稳定性好，适合产业化。
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公开(公告)号：CN106755129B
公开(公告)日：2020-09-22
申请号：CN201611059146.9
申请日：2016-11-25
申请人： 南京工业大学
IPC分类号： C12P7/08 , C12N11/089 , C12N11/10 , C12N11/14 , C12R1/865
摘要： 本发明公开了一种废糖蜜原料下固定化酵母细胞发酵生产乙醇的方法，将酵母细胞培养后稀释制成菌悬液，与固定化载体均匀混合制备得到固定化酵母细胞，所述固定化载体为海藻酸钠(SA)、聚乙二醇（PEG），与活性炭的混合液；将制备得到的固定化酵母细胞进行增值培养，然后移入发酵培养基中，以废糖蜜为碳源发酵生产乙醇。本发明适合在未经任何预处理的糖蜜体系下进行发酵，提高了乙醇产量，降低了载体损失率，在发酵58h乙醇浓度最高可以达到68g/L,在分批发酵90h未出现载体破损，在连续发酵近400h时，其产乙醇能力未出现下降。操作简单，成本低廉，并为糖蜜体系下的固定化细胞发酵提供了很好的借鉴方法。
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公开(公告)号：CN109082448B
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN201810947735.3
申请日：2018-08-20
申请人： 南京工业大学
摘要： 本发明公开了一种大肠杆菌，其分类命名为大肠杆菌(Escherichia coli)，菌株号为NT1006，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏时间为2018年05月23日，保藏编号为CCTCC NO:M 2018305，还公开了大肠杆菌在发酵生产1,5‑戊二胺中的应用。本发明采用紫外诱变和ARTP诱变相结合，筛选获得一株高产1,5戊二胺的大肠杆菌NT1006：以葡萄糖作为碳源，经过48h的发酵1,5戊二胺产量达到了50g/L，而同等条件培养的出发菌株1,5戊二胺产量仅有12.27g/L。NT1006连续传代7次后发酵液中1,5戊二胺的含量仍维持在50g/L左右，遗传稳定性好。
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公开(公告)号：CN110075809A
公开(公告)日：2019-08-02
申请号：CN201910326943.6
申请日：2019-04-23
申请人： 南京工业大学
摘要： 本发明公开一种提高粉粒几丁质对酶蛋白的吸附能力的方法及其应用。将粉粒几丁质通过高压均质机处理后得到纤维直径为纳米级的几丁质纤维，用于吸附带有几丁质结合域蛋白（ChBD）的融合酶，经过一系列的条件优化后发现，预处理后的几丁质纤维对酶蛋白的吸附效果相较未处理几丁质粉末有了较大提升。本发明提供一种改进常规粉粒几丁质对酶蛋白吸附能力的方法，该方法绿色环保不涉及强酸强碱的使用，制备得到的几丁质纤维具有直径小、比较面积大、结合蛋白能力强的特点，在酶的固定化材料领域具有较好的应用与发展前景。
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公开(公告)号：CN106755129A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611059146.9
申请日：2016-11-25
申请人： 南京工业大学
摘要： 本发明公开了一种废糖蜜原料下固定化酵母细胞发酵生产乙醇的方法，将酵母细胞培养后稀释制成菌悬液，与固定化载体均匀混合制备得到固定化酵母细胞，所述固定化载体为海藻酸钠(SA)、聚乙二醇（PEG），与活性炭的混合液；将制备得到的固定化酵母细胞进行增值培养，然后移入发酵培养基中，以废糖蜜为碳源发酵生产乙醇。本发明适合在未经任何预处理的糖蜜体系下进行发酵，提高了乙醇产量，降低了载体损失率，在发酵58h乙醇浓度最高可以达到68g/L,在分批发酵90h未出现载体破损，在连续发酵近400h时，其产乙醇能力未出现下降。操作简单，成本低廉，并为糖蜜体系下的固定化细胞发酵提供了很好的借鉴方法。
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公开(公告)号：CN106367847A
公开(公告)日：2017-02-01
申请号：CN201610780211.0
申请日：2016-08-31
申请人： 南京工业大学
CPC分类号： D01F9/00 , C08B37/0003 , C08B37/003
摘要： 一种利用废弃小龙虾壳制备几丁质纳米纤维的方法。该方法是先对废弃小龙虾虾壳进行去杂质、脱色、脱脂预处理；然后用酶法去除小龙虾虾壳中蛋白质；再用体积分数为2%-3%的盐酸水溶液处理虾壳去除盐；再对处理过的虾壳粉进行水洗，烘干得到几丁质半成品；最后将几丁质半成品粉碎后，搅拌溶解彻底制得几丁质溶液，在搅拌下向几丁质溶液中缓慢添加析出剂使几丁质逐渐从溶液中析出来，将析出剂除去后加入纯水重悬得到几丁质纳米纤维的悬浮液，反复纯水洗后，去除水可以获得几丁质纳米纤维。本发明的制备方法，可以提供纤维长，直径小且强度高的几丁质纳米纤维，该纤维可广泛应用于生物医药、组织工程等领域。
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公开(公告)号：CN113621603A
公开(公告)日：2021-11-09
申请号：CN202110948167.0
申请日：2021-08-18
申请人： 南京工业大学
IPC分类号： C12N11/10
摘要： 本发明公开了一种辅因子与辅因子依赖性酶的共固定化连续催化的方法，研究是通过几丁质部分脱乙酰的通过电荷作用对辅因子进行固定，几丁质结合结构域与将辅因子依赖性酶融合表达实现部分脱乙酰几丁质对酶进行固定化，形成共固定化催化剂。在不额外添加辅因子的情况下，能够实现良好的重复利用效果，在连续利用五次，最优条件下转化率能保持60%‑90%，这种辅因子固定化循环利用方法能够大大降低体外酶催化过程的成本，具有非常好的经济利用价值。
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公开(公告)号：CN113444713A
公开(公告)日：2021-09-28
申请号：CN202110722212.0
申请日：2021-06-28
申请人： 南京工业大学
摘要： 本发明公开了一种L‑赖氨酸脱羧酶SpLDC及其在产1，5‑戊二胺上的应用。L‑赖氨酸脱羧酶SpLDC的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，且该L‑赖氨酸脱羧酶能够在宿主中能够良好的表达，具有高催化L‑赖氨酸合成戊二胺的活性，且pH稳定性和温度稳定性良好，经测试可知，在pH5‑8时催化能力强，其中pH6.5时催化能力最优，且在pH8条件下放置12h，酶的合成戊二胺的能力依然能保持80%以上，具有良好的pH稳定性；在30‑52℃之间具有较高的催化活性，52℃下酶的最适催化能力最优；在52℃孵育12h酶催化活性依然保持在80%以上，具有良好的温度稳定性。
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公开(公告)号：CN112795556A
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN202110028065.7
申请日：2021-01-11
申请人： 南京工业大学
摘要： 本发明公开了一种β‑N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶159及其克隆表达与应用。通过基因工程手段将β‑N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶159的基因构建在质粒pET‑28a(+)上，并转入E.coli BL21(DE3)中表达，该重组酶分子量大小为92kDa，通过对比分析，β‑N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶159属于糖苷水解酶GH20家族。对该重组酶进行酶学性质研究表明，纯酶的比活力为16.67 U/mg，其最适温度为40℃，最适pH为9.0，在pH高于7的条件下能保持高于80%的酶活，与其他几丁质酶协同作用时，β‑N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶159表现出较高的pH稳定性和协同效应,为高效制备N‑乙酰氨基葡萄糖提供了理论基础。
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公开(公告)号：CN110305808B
公开(公告)日：2021-02-26
申请号：CN201810947913.2
申请日：2018-08-20
申请人： 南京工业大学
摘要： 本发明公开了一种高耐受1,5‑戊二胺的大肠杆菌，其分类命名为大肠杆菌(Escherichia coli)，菌株号为NT1005，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏时间为2018年05月23日，保藏编号为CCTCC NO:M 2018304，还公开了菌株NT1005在发酵生产L‑赖氨酸中的应用。菌株NT1005在含40g/L的1,5‑戊二胺培养基中能正常生长，而同等条件培养的出发菌株基本不生长。
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