一种高产假尿苷的工程菌的构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN116949078A

    公开(公告)日:2023-10-27

    申请号:CN202310726503.6

    申请日:2023-06-19

    摘要: 本申请公开了一种高产假尿苷的工程菌的构建方法及其应用,首先在基因工程菌E.coli中,过表达了假尿苷5‑磷酸糖苷酶和假尿苷磷酸酶构建了假尿苷合成路径,同时过表达了大肠杆菌磷酸戊糖途径中的葡萄糖6‑磷酸脱氢酶和葡萄糖酸6‑磷酸脱氢酶增强了体内的5‑磷酸核糖的供给构建了可利用葡萄糖和尿嘧啶作为底物生产假尿苷的基因工程菌。最适发酵温度为20℃,最适发酵pH为8,IPTG浓度为0.6 mM时,发酵假尿苷最高产量可达39.6 g/L。本发明所述的方法可代替方法目前化学法和酶法,避免了生产假尿苷造成的环境污染以及酶催化法做以及使用底物成本高的问题。

    一种碱冻融体系预处理几丁质提高几丁质降解率的方法

    公开(公告)号:CN110656140A

    公开(公告)日:2020-01-07

    申请号:CN201910974341.1

    申请日:2019-10-14

    IPC分类号: C12P19/26 C12P19/14

    摘要: 本发明公开了一种碱冻融体系预处理几丁质提高几丁质降解率的方法。该方法包括如下步骤:(1)利用微生物发酵获得几丁质酶;(2)称取适量几丁质,加入碱溶液中并搅拌分散,在适宜冻融模式处理下,取出室温融化,煮沸析出几丁质后离心去上清,利用PBS(pH 7.0)缓冲液搅拌重悬,清洗pH至中性;(3)吸取预处理几丁质和几丁质酶于水浴锅中反应,反应结束后,测定还原糖含量。与现有技术相比,本发明方法通过改性处理几丁质,提高几丁质与其酶的附着力,转化效率是未处理的11.01倍,且用时间较短,操作简单,污染较小,具有广阔的应用前景。

    一种膜管布气的气升式生物反应器及其应用

    公开(公告)号:CN109735452A

    公开(公告)日:2019-05-10

    申请号:CN201910225398.1

    申请日:2019-03-25

    IPC分类号: C12M3/00 C12M1/00 C12M1/04

    摘要: 本发明属于生物反应器领域,具体涉及一种膜管布气的气升式生物反应器及其应用。该生物反应器既可以通过外循环进行发酵,也可以通过通过内循环进行发酵,结构简单,解决搅拌式生物反应器在气液传质过程中,气液传质效率低,剪切力大。特别在高耗氧培养,对剪切力敏感的体系中。本发明是将膜管更好的应用于生物反应器中,气泡可达1000μm以下,实现微小气泡产生,布气均匀,提高气液气液传质,提高体积溶氧系数,增加气含率,其体积溶氧系数比传统的环状布气气升式生物反应器提高30%,具有良好的应用前景。

    一种利用废弃小龙虾壳制备几丁质纳米纤维的方法

    公开(公告)号:CN106367847B

    公开(公告)日:2019-03-01

    申请号:CN201610780211.0

    申请日:2016-08-31

    IPC分类号: D01F9/00 C08B37/08

    摘要: 一种利用废弃小龙虾壳制备几丁质纳米纤维的方法。该方法是先对废弃小龙虾虾壳进行去杂质、脱色、脱脂预处理;然后用酶法去除小龙虾虾壳中蛋白质;再用体积分数为2%‑3%的盐酸水溶液处理虾壳去除盐;再对处理过的虾壳粉进行水洗,烘干得到几丁质半成品;最后将几丁质半成品粉碎后,搅拌溶解彻底制得几丁质溶液,在搅拌下向几丁质溶液中缓慢添加析出剂使几丁质逐渐从溶液中析出来,将析出剂除去后加入纯水重悬得到几丁质纳米纤维的悬浮液,反复纯水洗后,去除水可以获得几丁质纳米纤维。本发明的制备方法,可以提供纤维长,直径小且强度高的几丁质纳米纤维,该纤维可广泛应用于生物医药、组织工程等领域。

    一种利用N-乙酰氨基葡萄糖制备3-氨基-5-(α-氨基乙基)四氢呋喃的方法

    公开(公告)号:CN109824629B

    公开(公告)日:2022-12-09

    申请号:CN201910145307.3

    申请日:2019-02-27

    IPC分类号: C07D307/22

    摘要: 本发明公开了一种利用N‑乙酰氨基葡萄糖制备3‑氨基‑5(α‑氨基乙基)四氢呋喃的方法,该方法先利用催化剂作用将GlcNAc形成具有呋喃环结构的3‑乙酰氨基‑5‑乙酰基呋喃;在通过生物酶法转氨酶和脱乙酰酶分步催化合成3‑氨基‑5‑(α‑氨基乙基)呋喃;最后3‑氨基‑5‑(α‑氨基乙基)呋喃通过加氢反应生成3‑氨基‑5‑(α‑氨基乙基)四氢呋喃。利用自然界储量丰富的几丁质作为原料,能够有效的利用,使得其具有更广阔的应用前景,能够代替石油基来源的二元胺合成聚酰胺材料。该方法使得其有着巨大的经济意义。

    一种提高粉粒几丁质对酶蛋白的吸附能力的方法及其应用

    公开(公告)号:CN110075809B

    公开(公告)日:2021-10-22

    申请号:CN201910326943.6

    申请日:2019-04-23

    IPC分类号: B01J20/24 B01J20/28 C12N11/10

    摘要: 本发明公开一种提高粉粒几丁质对酶蛋白的吸附能力的方法及其应用。将粉粒几丁质通过高压均质机处理后得到纤维直径为纳米级的几丁质纤维,用于吸附带有几丁质结合域蛋白(ChBD)的融合酶,经过一系列的条件优化后发现,预处理后的几丁质纤维对酶蛋白的吸附效果相较未处理几丁质粉末有了较大提升。本发明提供一种改进常规粉粒几丁质对酶蛋白吸附能力的方法,该方法绿色环保不涉及强酸强碱的使用,制备得到的几丁质纤维具有直径小、比较面积大、结合蛋白能力强的特点,在酶的固定化材料领域具有较好的应用与发展前景。

    一种利用基因工程菌共发酵制备生物基尼龙-54前体的方法

    公开(公告)号:CN108531494B

    公开(公告)日:2020-11-10

    申请号:CN201810195975.2

    申请日:2018-03-09

    摘要: 本发明公开了一种利用基因工程菌共发酵制备生物基尼龙‑54前体——戊二胺丁二酸盐的方法,它通过在丁二酸生产菌株内过表达赖氨酸脱羧酶,在丁二酸发酵过程中添加赖氨酸进行脱羧反应,两个脱羧产物,戊二胺及CO2分别用于体系pH的调控剂及丁二酸的合成,实现了共发酵生产丁二酸与戊二胺及CO2的固定,且发酵液中的戊二胺丁二酸盐可作为前体进一步用于聚合制备生物基尼龙‑54。与现有的尼龙‑54制备方法相比,本发明工艺简单,成本低,过程安全可控,绿色环保,具有重要的应用价值和良好的经济性。

    一种利用豆渣水解液发酵生产1,5-戊二胺的方法

    公开(公告)号:CN109055449A

    公开(公告)日:2018-12-21

    申请号:CN201810954086.X

    申请日:2018-08-21

    IPC分类号: C12P13/00 C12R1/19

    CPC分类号: C12P13/001

    摘要: 本发明公开了一种利用豆渣水解液发酵生产1,5‑戊二胺的方法,包括以下步骤(1)将豆渣采用复合酶酶解制备豆渣水解液,所述复合酶包括蛋白酶、纤维素酶、果胶酶和淀粉酶;使用所述豆渣水解液、无机氮、无机盐配制发酵培养基;(2)将大肠杆菌活化后接种于步骤(1)配制的发酵培养基中发酵生产1,5‑戊二胺。本专利申请通过酶法处理廉价且产量丰富的豆渣,从而得到含有氨基酸、肽类和葡萄糖等成分的水解液为原料发酵生产1,5‑戊二胺,不仅解决了大豆加工工业废料处理的问题,而且降低了1,5‑戊二胺的生产成本,具有很好的发展前景。

    一种连续精制戊二胺的装置和方法

    公开(公告)号:CN107879940A

    公开(公告)日:2018-04-06

    申请号:CN201711153335.7

    申请日:2017-11-17

    摘要: 本发明公开了一种连续精制戊二胺的装置和方法,该装置包括原料池、气化釜、精馏塔、冷却釜、连续固液分离器;所述的原料池的出料口与气化釜的进料口相连,气化釜的气体出口与精馏塔的进料口相连,所述的气化釜的出料口与冷却釜的进料口相连、冷却釜的出料口与连续固液分离器的进料口相连。该方法包括将戊二胺原料液气化产生戊二胺与水的共沸气体,将所述共沸气体精馏,得到戊二胺;将气化残余的料液冷却,析出无机盐固体,然后对冷却后的料液连续固液分离,得到无机盐固体和戊二胺水溶液。本发明能够消除溶剂损失,节省能耗,解决传统过程中高盐废水难以处理的难题,并且可实现戊二胺的连续精制,显著提高戊二胺的收率与产品纯度,降低生产成本。