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公开(公告)号：CN102321522A
公开(公告)日：2012-01-18
申请号：CN201110286475.8
申请日：2011-09-23
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12M1/00
Abstract: 本发明公开了一种细胞刮刀，包括中空的管状体，管状体由细径管、锥形管和粗径管组成；管状体的前部为细径管，后部为粗径管，且细径管的管径小于粗径管，细径管与粗径管通过锥形管连接；细径管轴线与锥形管轴线构成钝角；锥形管与粗径管同轴；细径管、锥形管和粗径管的内腔连通为一体；管状体的两端设有开口，一端开口位于细径管的前端，另一端开口位于粗径管的末端。本发明采用曲面结构细胞刮刀，刮擦时对细胞集落分割容易且损伤小，装上吸头又可用作转移细胞的吸管，是一件适于在细胞传代过程中使用的方便高效的操作工具。
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公开(公告)号：CN102277402A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201110204137.5
申请日：2011-07-20
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12P21/02 , C07K14/435 , C07K1/14
Abstract: 本发明公开了一种动物细胞内核蛋白提取方法。该方法通过利用细胞穿透肽、外源核蛋白和绿色荧光蛋白共同构建重组核蛋白表达载体，介导重组核蛋白在细胞核内表达，待重组核蛋白在细胞内表达稳定后，使用操作液处理细胞，收集细胞，超声波破碎，离心去沉淀后收集细胞上清液，上清液过滤除菌后添加到细胞培养液中，4h后提取的荧光标记外源重组核蛋白通过细胞质进入细胞核并定位于细胞核内。利用该方法提取的核蛋白能够发挥蛋白功能使细胞发生形态特征的改变，结果证实本发明能够简单、快速、高效地提取具有生物活性的细胞内核蛋白。
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公开(公告)号：CN102174466A
公开(公告)日：2011-09-07
申请号：CN201110008808.0
申请日：2011-01-14
Applicant: 安徽农业大学
Inventor： 曹鸿国 , 章孝荣 , 刘亚 , 张运海 , 陶勇 , 方富贵 , 殷慧群 , 孙雪萍 , 薛奕杰 , 张卫琴 , 黄伟玲 , 陈涛 , 李运生 , 任春环 , 张子军 , 丁建平 , 刘洪瑜 , 刘旭光 , 王力生
IPC: C12N5/071 , C12N5/10 , C12N7/01 , C12N15/867
Abstract: 本发明公开了一种猪体细胞诱变方法，利用携带增强型绿色荧光蛋白标记的慢病毒多次感染作用胎猪成纤维细胞，在干细胞培养液的生长环境条件下胎猪成纤维细胞逐步改变原有的纤维状生长形态，形成鸟巢状细胞集落，分离培养传代的细胞集落边缘界限清晰，生长状态稳定，核型正常，碱性磷酸酶表达为阳性，免疫细胞化学检测显示Oct4、Nanog、SSEA-1蛋白表达为阳性，体内分化形成含有三个胚层的畸胎瘤，结果证实慢病毒作用下发生诱变的猪体细胞具有干细胞特征。
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公开(公告)号：CN102071238A
公开(公告)日：2011-05-25
申请号：CN201010560587.3
申请日：2010-11-26
Applicant: 安徽农业大学 , 合肥博大牧业科技开发有限责任公司
IPC: C12P21/02
Abstract: 本发明涉及麦芽糖结合蛋白-促性腺激素释放激素六聚体的发酵工艺，该工艺包括以下步骤：发酵培养基的筛选和发酵条件的优化。发酵培养基包括酵母浸出物、蛋白胨、NaCl等组成，发酵工艺的优化包括培养温度、诱导时机、诱导剂浓度、诱导后培养时间、发酵液酸碱度的调节方式、搅拌速率、通气量等。本发明的发酵工艺生产成本低廉，生产周期短，只需要9-11小时，同时，还提高了单位菌体的目的蛋白表达量，实现了目的蛋白的高效表达。本发明制得的麦芽糖结合蛋白-促性腺激素释放激素六聚体（MBP-GnRH6）可用于各种哺乳动物的免疫去势。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103923832B
公开(公告)日：2015-09-09
申请号：CN201410119555.8
申请日：2014-03-27
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种细胞拆分装置和细胞拆分方法。细胞拆分装置包括带内芯的离心管和细胞培养板；离心管内腔设有内芯，内芯设有带凸起的沿口部和封闭的尖形底部；培养板为与离心管内径相适配的圆形平板，圆形平板的正面边缘处设有撑脚，培养板正面朝下倒扣在内芯上方且撑脚抵在内芯的沿口部。细胞拆分方法包括细胞培养、细胞拆分、细胞核收集、细胞质收集。本发明通过设计适于拆分贴壁生长的细胞的细胞离心拆分装置，在常规离心速度11000～12000r/min的情况下，离心拆分细胞的效率达到90～95%。该细胞离心拆分装置的结构简单，离心拆分细胞方法方便高效且容易实现。
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公开(公告)号：CN104073466A
公开(公告)日：2014-10-01
申请号：CN201410000495.8
申请日：2014-01-02
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/0775 , C12Q1/68 , C12Q1/04 , G01N15/14
Abstract: 本发明公开了小鼠脂肪干细胞自发转化的鉴定方法，将小鼠脂肪干细胞在体外连续传代，然后包括形态学的变化、增殖速度的激增、异常染色体的出现和比例的增加、DNA含量的降低以及表面分子的变化五个步骤。其中形态学和增殖速度的观察与检测可用于初步的判断小鼠脂肪干细胞是否发生了转化；染色体的核型分析从局部水平上来分析小鼠脂肪干细胞染色体是否异常，而DNA含量的分析则从整体水平上来检测核物质的量变，此二法最能说明小鼠脂肪干细胞的转化与否；小鼠脂肪转化后，同时也引起小鼠脂肪干细胞典型分子的表达异常，包括CD44，CD105和Sca-1的变化，反而言之，后期研究中，也可以通过监测这些表面分子的变化来判断小鼠脂肪干细胞的转化，此法则更为简单、直接与有效。
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公开(公告)号：CN103898048A
公开(公告)日：2014-07-02
申请号：CN201410120868.5
申请日：2014-03-27
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/075
Abstract: 本发明公开了小鼠裸卵的体外成熟培养方法，包括以下步骤：（1）裸卵的体外成熟培养；（2）成熟裸卵的孤雌激活；（3）成熟裸卵的体外受精。本发明能够创造一个人工模拟卵母细胞自然发生成熟的环境，使裸卵在体外能够高效成熟发育，并且裸卵体外培养成熟后具备同正常发育的卵母细胞一样能够体外受精和胚胎发育。实践证实，该体系裸卵体外成熟发育效率高，体系成熟稳定，裸卵体外自然受精后胚胎发育质量高，因此，本发明能够极大地促进裸卵在人类生殖健康和现代家畜遗传育种中的应用和推广。简化了通过裸卵获得囊胚的操作，为裸卵作为卵源投入到实际生产提供了便利。
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公开(公告)号：CN103074294A
公开(公告)日：2013-05-01
申请号：CN201310022684.0
申请日：2013-01-22
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了一种可提高猪胚胎体外发育效率的猪胚胎培养液，其以PZM-3培养液为基础培养液，并在PZM-3培养液中添加有肌醇。其中，猪胚胎培养液中肌醇的浓度为0.005g/L～0.020g/L；猪胚胎培养液中肌醇的优选浓度为0.010g/L。本发明通过在PZM-3培养液中添加合适浓度的肌醇，能够使孤雌胚或者核移植胚胎激活的过程中，帮助内源性钙离子反复振荡，模拟了自然受精胚胎时的激活状态。PZM-3培养液中添加了肌醇后的胚胎发育状况优于没有添加前的胚胎，这对于猪胚胎的体外生产和培养，建立良好的动物模型等有重要的意义。
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公开(公告)号：CN103060381A
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN201310022662.4
申请日：2013-01-22
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N15/877
Abstract: 本发明公开了一种生产转基因克隆猪的激活方法，采用电激活与化学激活的联合激活，在采用电激活前，先用放线菌酮激活处理3min～25min。作为优选，放线菌酮激活的处理时间为10～20min；进一步优选，放线菌酮激活的处理时间为10min；放线菌酮激活处理的浓度为5～10μg/mL。本发明通过改变通常联合激活方式的顺序，采用先化学激活后电激活的方案，并缩短激活方案中化学辅助激活的时间，可以得到与原来先电激活后化学激活并较长时间的组合激活方案相似的胚胎发育能力，以及较低的囊胚凋亡率和囊胚阶段的DNA甲基化水平，将该方案生产的胚胎移植后成功生产转基因克隆猪。
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