一种体外酶反应生成的类胡萝卜素的快速提取方法

    公开(公告)号:CN102250958A

    公开(公告)日:2011-11-23

    申请号:CN201110190960.5

    申请日:2011-07-08

    Applicant: 山东大学

    CPC classification number: Y02E50/343

    Abstract: 本发明涉及一种体外酶反应生成的类胡萝卜素的快速提取方法,属于生物工程技术领域。该方法步骤如下:将表达类胡萝卜素代谢相关酶的重组大肠杆菌菌体超声波破壁,然后加入相应的反应物质,超声波混匀,避光密闭振荡反应;再向混合液中加入10%SDS溶液,加入NaAc溶液,振荡离心,弃上清液,得蛋白质沉淀;向蛋白质沉淀中加入丙酮,搅拌,使沉淀均匀分散,然后经离心后,取上清液,滤膜过滤后,经检测,即得类胡萝卜素的丙酮溶液。本发明通过使类胡萝卜素与蛋白质共沉淀,将类胡萝卜素从大体积的体外反应溶液中浓缩到少量蛋白质沉淀中,从而减少了后续分离纯化过程。

    一种高效降解烟碱的曲霉菌株及其培养方法与应用

    公开(公告)号:CN101864368B

    公开(公告)日:2011-09-28

    申请号:CN201010173646.1

    申请日:2010-05-17

    Applicant: 山东大学

    Abstract: 本发明涉及一种曲霉菌株,尤其涉及一种可以高效降解烟碱的米曲霉及其培养方法与应用,属于微生物技术领域。本发明提供的米曲霉112822(Aspergillus oryzae 112822)菌株已于2010年3月25日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,菌种保藏编号为CGMCC NO.3687。该菌株培养简单,遗传性质稳定,将其应用于烟碱降解,能使烟草浸提液中的烟碱降解量达到7.8g/L,具有广阔的工业化应用前景。

    一种寡糖Globotriose的制备方法

    公开(公告)号:CN102154411A

    公开(公告)日:2011-08-17

    申请号:CN201110002979.2

    申请日:2011-01-07

    Applicant: 山东大学

    Abstract: 本发明涉及一种寡糖的制备方法,特别涉及一种利用α-半乳糖苷酶合成寡糖Globotriose的方法,属于寡糖合成技术领域。本发明利用α-半乳糖苷酶以对硝基苯-α-D-半乳糖苷为糖基供体,以乳糖为受体,一步转糖基反应合成寡糖Globotriose。该方法所需要的底物价格便宜,易于获得,且反应条件温和,操作简便,大大降低了Globotriose的生产成本,适合于Globotriose的大规模合成,具有潜在的应用前景。

    扩张青霉菌株及其培养方法与应用

    公开(公告)号:CN101250484B

    公开(公告)日:2010-06-09

    申请号:CN200810014906.3

    申请日:2008-03-31

    Applicant: 山东大学

    Abstract: 本发明公开了一株扩张青霉F3(Penicillium expansum F3)及其在制备低聚半乳糖中的应用。该菌株保藏编号为CGMCC No.2352,其菌落生长迅速,有放射沟纹,橄榄绿色,生长后期呈淡粉色;分生孢子梗光滑,帚状分枝不对称,分生孢子成链状生于小梗上,分生孢子椭球形。以该菌株的冻融全细胞作为酶源、采用海藻酸钙包埋法制得的固定化酶十分稳定,可重复用于低聚半乳糖合成,反应11批次保持产量大于20%。本发明菌株培养简单,遗传性质稳定,制备固定化酶的方法简便且酶性质稳定,应用于工业化生产低聚半乳糖的优势显著,前景乐观。

    一种α‐L‐鼠李糖苷酶在制备5-氟-2’-脱氧脲苷衍生物中的应用

    公开(公告)号:CN105315318A

    公开(公告)日:2016-02-10

    申请号:CN201510746918.5

    申请日:2015-11-06

    Applicant: 山东大学

    Abstract: 本发明涉及一种α‐L‐鼠李糖苷酶在制备5-氟-2'-脱氧脲苷衍生物中的应用。5-氟-2'-脱氧脲苷鼠李糖苷,包括3’‐O‐α-L-鼠李糖基-5-氟‐2'‐脱氧脲苷和5’‐O‐α-L-鼠李糖基-5-氟‐2'‐脱氧脲苷,分子式为C15H21FN2O9。本发明以5-氟-2'-脱氧脲苷为原料,以廉价鼠李糖为糖基供体,采用微生物来源的α-L-鼠李糖苷酶原始酶合成5-氟-2'-脱氧脲苷鼠李糖苷,该方法具有步骤简单,成本低廉,条件温和,环境友好等优点,产物与其原料5-氟-2'-脱氧脲苷相比,含有鼠李糖基,增加了稳定性和靶向性,作为肿瘤靶向药物应用前景广阔。

    一种区域选择性专一的转糖基α-半乳糖苷酶的应用

    公开(公告)号:CN105177085A

    公开(公告)日:2015-12-23

    申请号:CN201510497366.9

    申请日:2015-08-13

    Applicant: 山东大学

    Abstract: 本发明涉及一种区域选择性专一的转糖基α-半乳糖苷酶的应用,步骤如下:将转糖基α-半乳糖苷酶与对硝基苯-α-D-半乳糖苷和乳糖溶液混合,配制成反应体系,反应后,终止反应,纯化,制得Globotriose。所述转糖基α-半乳糖苷酶的表达基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用区域选择性专一的转糖基α-半乳糖苷酶,以对硝基苯-α-D-半乳糖苷为糖基供体,以乳糖为受体,一步合成寡糖Globotriose单一寡糖产物,避免了异构产物的生成。该方法底物价格便宜,反应步骤简单,产物纯化简便,真正适合于Globotriose的规模化合成及分离制备纯品,具有潜在的应用前景。

    一种转苷底物特异性拓宽的β-半乳糖苷酶

    公开(公告)号:CN103275953A

    公开(公告)日:2013-09-04

    申请号:CN201310257432.6

    申请日:2013-06-25

    Applicant: 山东大学

    Abstract: 本发明涉及一种转苷底物特异性拓宽的β-半乳糖苷酶。本发明提供一种转苷底物特异性拓宽的β-半乳糖苷酶,氨基酸序列如SEQ ID No.1所示;本发明还提供了编码该转苷底物特异性拓宽的β-半乳糖苷酶的基因。本发明所述的转苷底物特异性拓宽的β-半乳糖苷酶出现了新的受体选择性,能对天然β-半乳糖苷酶难以糖基化或无法糖基化的酚类化合物进行转糖反应,可作为酚类化合物及相关药物分子修饰和改性的有力工具,应用前景广阔。

    含Levan果聚糖的酸奶的制备方法

    公开(公告)号:CN103190478A

    公开(公告)日:2013-07-10

    申请号:CN201310121813.1

    申请日:2013-04-09

    Applicant: 山东大学

    Inventor: 肖敏 付峰 卢丽丽

    Abstract: 本发明涉及含Levan果聚糖的酸奶的制备方法,包括如下步骤:(1)将产Levan蔗糖酶的菌株经活化培养和产酶发酵培养制得发酵培养液;(2)离心收集发酵液上清或者菌体;(3)向发酵液上清中添加硫酸铵粉末,离心,收集蛋白沉淀;或者,将菌体经超声波破碎离心后,上清液中添加硫酸铵粉末,离心,收集蛋白沉淀;纯化后制得纯酶蛋白Levansucrase;(4)向原料奶中添加蔗糖和纯酶蛋白Levansucrase,然后接种乳酸杆菌,经发酵,制得含Levan果聚糖的酸奶。本发明利用微生物Levan蔗糖酶在酸奶发酵的同时生成Levan果聚糖,从而直接获得含有功能性多糖的酸奶新品种,避免了复杂的多糖纯化工艺,应用前景广阔。

    一种提高八氢番茄红素脱氢酶体外反应速率的方法

    公开(公告)号:CN102286593B

    公开(公告)日:2013-03-13

    申请号:CN201110190940.8

    申请日:2011-07-08

    Applicant: 山东大学

    Abstract: 本发明涉及一种提高水-有机两相酶促反应速率的方法,尤其涉及一种提高八氢番茄红素脱氢酶体外反应速率的方法,属于生物工程技术领域。它包括如下步骤:(1)取破碎粗酶液,加入八氢番茄红素丙酮溶液、葡萄糖、葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶,超声波混匀,28℃~30℃避光密闭振荡反应,然后加甲醇,55℃~60℃温浴15~20分钟,加入沸程30℃~60℃的石油醚振荡萃取反应产物,收集上层石油醚层,经真空旋转蒸发,得产物。本发明利用超声波的均质、分散和乳化等力学效应,对八氢番茄红素脱氢酶体外反应体系进行优化,增大了底物和酶接触的机会,显著提高了酶促反应速率,缩短了反应时间,减少产物的氧化损失,提高了数据的准确度。

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