一种同时检测三种鱼源链球菌的试剂盒和检测方法

    公开(公告)号:CN111394483A

    公开(公告)日:2020-07-10

    申请号:CN202010229308.9

    申请日:2020-03-27

    摘要: 同时检测三种链球菌的引物组合,组成为:SEQ ID MO:1、2的检测无乳链球菌的上下游引物,SEQ ID MO:3、4的检测停乳链球菌链球菌的上下游引物,SEQ ID MO:5、6的检测海豚链球菌的上下游引物。一种试剂盒,由DNA提取试剂和PCR反应试剂组成,DNA提取试剂由TE缓冲液、蛋白酶K、氯仿、异丙醇、乙醇、双蒸水组成;PC反应试剂含有反应缓冲液、dNTPs、DNA聚合酶、所述6种引物、去离子水。同时检测所述三种链球菌的方法,用所述提取试剂提取样品中的DNA,用所述反应试剂对所述DNA作PCR扩增,所述扩增产物作凝胶电泳。本发明能同时检测所述三种链球菌,检测简便、快速、灵敏度高、特异性强,适用于水生动物大规模分子流行病学调查分析及水产品的质量安全检测需求。

    检测沼虾杆套病毒-1的特异性引物、探针及快速检测试剂盒

    公开(公告)号:CN110872638A

    公开(公告)日:2020-03-10

    申请号:CN201911323000.4

    申请日:2019-12-20

    IPC分类号: C12Q1/70 C12Q1/6851 C12N15/11

    摘要: 检测沼虾杆套病毒-1的引物探针混合液,由引物组A和Taqman荧光探针B组成,Taqman荧光探针B的5’端标记有荧光报告基团,3’端标记有荧光淬灭基团;所述引物组A包含引物MrRoV-q119F和引物MrRoV-q119R;所述引物MrRoV-q119F的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;所述引物MrRoV-q119R的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示;所述Taqman荧光探针B的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。一种沼虾杆套病毒-1荧光定量检测试剂盒,具有所述的混合液,还具有RT-qPCR反应液、阳性质控品和阴性质控品,所述RT-qPCR反应液为探针法荧光定量一步法RT-qPCR反应液,所述阴性质控品为灭菌生理盐水,所述阳性质控品是含有沼虾杆套病毒-1复制酶基因的载体。本发明用于检测沼虾杆套病毒-1,速度快,特异性强。

    一种抗中华鳖免疫球蛋白单克隆抗体及其应用

    公开(公告)号:CN101955534A

    公开(公告)日:2011-01-26

    申请号:CN200910100742.0

    申请日:2009-07-20

    摘要: 一种抗中华鳖免疫球蛋白单克隆抗体,按以下步骤制备:(1)中华鳖特异性抗原:采中华鳖血置于玻瓶,室温凝固,35~38℃放置1.5~3h,再3~6℃放置8~12h,离心沉淀,取上清,制层析柱,经硫酸铵水溶液粗提并透析浓缩后稀释,过滤后上样,洗脱,最先洗脱的蛋白IgM即中华鳖特异性抗原;(2)多克隆抗体:以所述抗原免疫动物,取血,分离出抗血清,纯化制得所述多克隆抗体;(3)杂交瘤细胞株:以骨髓瘤细胞与产生抗中华鳖血清蛋白IgM抗体的脾细胞融合得该杂交瘤细胞株;(4)一种抗中华鳖免疫球蛋白的单克隆抗体:以所述的杂交瘤细胞株产生该单克隆抗体。以所述单克隆抗体检测中华鳖免疫血清效价。本发明适用于甲鱼类病原学、免疫学研究。