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公开(公告)号:CN103645317B
公开(公告)日:2015-06-17
申请号:CN201310636515.6
申请日:2013-12-03
IPC分类号: G01N33/569 , C12N15/70
摘要: 本发明公开了一种鹿流行性出血病病毒(EHDV)抗体快速检测试纸条及其制备方法。其主要应用截短的EHDV VP7表达抗原作为检测线试剂。利用抗原表位分析软件对EHDV VP7进行分析,选取含有主要抗原表位的片段,对其对应的密码子进行优化,根据优化后的核苷酸序列,人工合成DNA片段,构建重组表达载体,转化大肠杆菌进行蛋白质表达,获得了截短EHDV VP7重组抗原,纯化后可用于EHDV抗体检测。基于该截短的EHDV VP7抗原建立的快速检测试纸条具有操作方便、检测快速、不需专门实验室和设备等优点,克服了现有检测方法的局限,可用于EHDV抗体的快速检测和血清流行病学调查。
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公开(公告)号:CN104497136A
公开(公告)日:2015-04-08
申请号:CN201410736095.3
申请日:2014-12-05
IPC分类号: C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12N5/20
摘要: 本申请公开了一种非洲猪瘟病毒基因II型毒株单克隆抗体及其制备方法和应用。本申请的制备方法,包括用纯化p54免疫蛋白对小鼠免疫,取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤细胞,用三种筛选抗原进行筛选,获得可稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞,再通过体内或体外的方法制备单克隆抗体;三种筛选抗原包括,原核表达p54重组蛋白、真核表达p54重组蛋白和人工合成的Seq ID No.1所示多肽。本申请,用三种筛选抗原对杂交瘤细胞进行筛选,特别是人工合成特别针对基因II型毒株的多肽作为筛选抗原,使制备的单克隆抗体能够保障基因II型毒株的检测率,减小了漏检概率,提高了检疫工作质量和效率。
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公开(公告)号:CN104341490A
公开(公告)日:2015-02-11
申请号:CN201410529599.8
申请日:2014-10-10
IPC分类号: C07K14/08 , C12N15/40 , C12N15/11 , G01N33/569
CPC分类号: C07K14/005 , C12N2760/18422 , G01N33/56983 , G01N33/6893 , G01N2333/115
摘要: 本发明公开了一种小反刍兽疫病毒重组蛋白抗原,及利用该重组蛋白抗原作为检测线试剂、用于检测小反刍兽疫病毒抗体的快速检测试纸条。通过分析小反刍兽疫病毒N蛋白抗原表位,选取含有主要抗原表位的氨基酸片段SEQIDNo.1,并对其密码子进行优化,人工合成密码子优化的基因序列SEQIDNo.2,构建重组表达载体,转化大肠杆菌进行蛋白质表达,获得了小反刍兽疫病毒的重组蛋白抗原,纯化后可用于小反刍兽疫病毒抗体检测。基于该小反刍兽疫病毒的重组蛋白抗原建立的快速检测试纸条具有操作方便、检测快速、不需专门实验室和设备等优点,克服了现有检测方法的局限,可用于小反刍兽疫病毒抗体的快速检测和血清流行病学调查。
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公开(公告)号:CN104267181A
公开(公告)日:2015-01-07
申请号:CN201410554936.9
申请日:2014-10-17
IPC分类号: G01N33/569 , G01N33/533
CPC分类号: G01N33/56983
摘要: 本发明公开了一种非洲猪瘟重组抗原及利用其制备的非洲猪瘟抗体检测荧光纳米晶试纸条。本发明利用基因工程的方法,获得非洲猪瘟病毒的特异性结构蛋白VP73蛋白作为重组抗原,其基因序列如序列表所示。将纯化后的VP73蛋白划线包被在硝酸纤维素膜上作为检测线,同样将兔抗金黄色葡萄球菌A多抗划线包被作为质控线,与用荧光纳米晶标记SPA制备试纸条的标记物释放垫装配成,获得本发明的荧光纳米晶试纸条。本发明可用于检测猪血清中的非洲猪瘟抗体,具有特异性强、灵敏度高、重复性好、简便快捷的特点,便于现场使用,对我国应对非洲猪瘟的威胁有实际应用价值。
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公开(公告)号:CN102311999B
公开(公告)日:2013-07-24
申请号:CN201110255683.1
申请日:2011-08-31
摘要: 本发明涉及动物物种和动物源性成分鉴定技术领域,具体涉及一种驴或驴源性成分的检测方法;尤其涉及一种驴或驴源性成分的实时荧光PCR检测方法。本发明旨在鉴别如阿胶等保健品和食品中是否含有驴源性成分。通过设计特异性扩增引物和探针,检测遗传上相对独立,没有重复序列,生物个体内无组织特异性的线粒体DNA,建立了驴或驴源性成分实时荧光PCR检测方法,以达到快速准确检测鉴定驴或驴源性成分的目的。
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公开(公告)号:CN103197082A
公开(公告)日:2013-07-10
申请号:CN201310136066.9
申请日:2013-04-16
IPC分类号: G01N33/68
摘要: 本发明公开了一种用于牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗体检测的重组抗原及其快速检测试纸条。其主要针对于BVDV抗体检测的截短的BVDV NS表达抗原和用于检测BVDV抗体的快速检测试纸条。利用抗原表位分析软件,对BVDV NS蛋白氨基酸序列分析,取含有主要抗原表位的片段,根据其对应核苷酸序列设计引物,通过PCR扩增、重组表达载体构建和原核表达,获得了截短BVDV NS重组抗原,纯化后可用于BVDV抗体检测。基于截短的BVDVNS抗原建立的快速检测试纸条,该试纸条具有操作方便、检测快速,且不需专门实验室和设备等优点,克服了现有检测方法的局限,可用于BVDV抗体的快速检测和血清流行病学调查。
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公开(公告)号:CN102311999A
公开(公告)日:2012-01-11
申请号:CN201110255683.1
申请日:2011-08-31
摘要: 驴或驴源性成分实时荧光PCR检测方法及检测用引物和探针。技术领域:本发明涉及动物物种和动物源性成分鉴定技术领域,具体涉及一种驴或驴源性成分的检测方法;尤其涉及一种驴或驴源性成分的实时荧光PCR检测方法。本发明旨在鉴别如阿胶等保健品和食品中是否含有驴源性成分。通过设计特异性扩增引物和探针,检测遗传上相对独立,没有重复序列,生物个体内无组织特异性的线粒体DNA,建立了驴或驴源性成分实时荧光PCR检测方法,以达到快速准确检测鉴定驴或驴源性成分的目的。
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公开(公告)号:CN109735657A
公开(公告)日:2019-05-10
申请号:CN201910107712.6
申请日:2019-02-02
IPC分类号: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12R1/93
摘要: 本申请公开了一种用于非洲猪瘟病毒检测的试剂、检测方法及应用。本申请的非洲猪瘟病毒检测试剂,包括特异性引物对和探针,引物对的上下游引物分别为Seq ID No.1和2所示序列,探针为Seq ID No.3所示序列或其反向互补序列;SEQ ID No.3所示探针序列中,第28碱基修饰荧光淬灭基团-dT,第31碱基替换为碱基类似物,第33碱基修饰荧光基团-dT,3’末端修饰C3 Spacer。本申请的试剂,通过重组酶聚合酶扩增对非洲猪瘟病毒进行敏感、特异、高效检测;与现有常规或实时荧光PCR相比,本申请试剂和检测方法,检测时间短,操作简便,特别适于现场检测,对非洲猪瘟病毒快速防控,保障生产安全具有重大意义。
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公开(公告)号:CN108504778A
公开(公告)日:2018-09-07
申请号:CN201810357649.7
申请日:2018-04-20
IPC分类号: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
CPC分类号: C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q1/705 , C12Q2600/16 , C12Q2537/143 , C12Q2563/107 , C12Q2521/507 , C12Q2522/101 , C12Q2531/119
摘要: 本发明公开了一种可同时快速检测猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病毒的实时荧光RPA引物和探针、包括所述引物和探针的试剂盒及其用途。本发明公开了一种可同时快速检测猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病毒的方法所述方法使用所述实时荧光RPA引物和探针和试剂盒。本发明的方法的敏感性为102拷贝/反应,即每个反应可同时最低检测出102拷贝的猪圆环病毒2型和102拷贝的猪伪狂犬病毒。本发明的方法能快捷、高效、灵敏的同时检测猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病毒,为两者的混合感染的快速检测提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN107488744A
公开(公告)日:2017-12-19
申请号:CN201710774966.4
申请日:2017-08-31
申请人: 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心 , 深圳市检验检疫科学研究院 , 清华大学深圳研究生院
CPC分类号: C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2521/507 , C12Q2521/101 , C12Q2563/107
摘要: 本申请公开了一种用于N9亚型禽流感病毒检测的试剂、检测方法及应用。本申请的N9亚型禽流感病毒检测试剂,包括引物对和探针,引物对上下游引物分别为Seq ID No.1和Seq ID No.2所示序列,探针为Seq ID No.3所示序列或者其反向互补序列;SEQ ID No.3所示的探针序列中,第34碱基修饰6-荧光基团-dT,第38碱基替换为dSpacer,第39碱基修饰荧光淬灭基团-dT,3’端修饰C3 Spacer。本申请的试剂,能通过重组酶聚合酶扩增对N9亚型禽流感病毒进行灵敏、特异、高效检测。与现有检测方法相比,本申请的试剂和检测方法,时间短,易操作,可快速得出结论,适于现场检测,对N9亚型禽流感病毒的快速防控具有重大意义。
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