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公开(公告)号：CN107488745A
公开(公告)日：2017-12-19
申请号：CN201710775069.5
申请日：2017-08-31
申请人： 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心 , 深圳市检验检疫科学研究院 , 清华大学深圳研究生院
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2521/507 , C12Q2522/101
摘要： 本申请公开了一种用于新城疫病毒检测的试剂、检测方法及应用。本申请的新城疫病毒检测试剂，包括引物对和探针，引物对上下游引物分别为Seq ID No.1和Seq ID No.2所示序列，探针为Seq ID No.3所示序列或者其反向互补序列；SEQ ID No.3所示的探针序列中，第30碱基修饰6-荧光基团-dT，第31碱基替换为dSpacer，第32碱基修饰荧光淬灭基团-dT，3’端修饰C3 Spacer。本申请的试剂，能通过重组酶聚合酶扩增对新城疫病毒进行灵敏、特异、高效检测。与现有检测方法相比，本申请的试剂和检测方法，时间短，易操作，可快速得出结论，适于现场检测，对新城疫病毒的快速防控具有重大意义。
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公开(公告)号：CN104311660A
公开(公告)日：2015-01-28
申请号：CN201410554643.0
申请日：2014-10-17
IPC分类号： C07K16/08 , G01N33/569
摘要： 本发明公开一种非洲猪瘟病毒VP73蛋白小鼠腹水多克隆抗体的制备方法，旨在提供一种腹水效价高，亲和力高，抗原用量少、操作简便的新型多克隆抗体的制备方法。所述的非洲猪瘟病毒多克隆抗体的制备包括：对ASFV VP73基因序列PCR扩增、抗原的制备、动物免疫、腹水多克隆抗体提取的步骤。本发明提供的非洲猪瘟病毒VP73蛋白多克隆抗体与常规兔源、鼠源抗血清的制备方式相比，该制备方式具有抗原用量少、操作简便,非洲猪瘟病毒VP73蛋白小鼠腹水多克隆抗体可以用于非洲猪瘟病毒VP73抗体的检测，为我国非洲猪瘟病的防控提供重要的技术手段。
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公开(公告)号：CN104262484A
公开(公告)日：2015-01-07
申请号：CN201410553923.X
申请日：2014-10-17
IPC分类号： C07K16/08 , C07K16/02 , G01N33/569
摘要： 本发明公开了一种抗非洲猪瘟病毒p54蛋白的特异性IgY抗体及其制备方法，及利用该方法生产的IgY抗体在特异性检测非洲猪瘟病毒抗体中的应用。该特异性IgY抗体可以通过以下方法制备：利用基因重组表达的方法制备p54蛋白抗原，免疫23周龄海兰蛋鸡，共进行4次免疫，收集鸡蛋，利用饱和硫酸铵沉淀法提取和纯化卵黄免疫球蛋白(IgY抗体)。基于该特异性IgY抗体所建立的检测非洲猪瘟血清抗体的竞争ELISA方法，效果良好，只有非洲猪瘟的阳性血清检测结果呈阳性，与商品化ASFV抗体检测ELISA试剂盒的平行检测结果一致。该竞争ELISA方法可用于非洲猪瘟的血清流行病学普查和监测，防控该病经出入境口岸传入国内。
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公开(公告)号：CN103364541A
公开(公告)日：2013-10-23
申请号：CN201310268628.5
申请日：2013-06-28
IPC分类号： G01N33/53
摘要： 本申请公开了一种样品稀释液及其在间接ELISA试验中的应用。本申请的稀释液中含有蛋白终浓度60-100μg/mL的杆状病毒感染的昆虫细胞裂解物，其中，杆状病毒感染的昆虫细胞裂解物中不含有检测靶标蛋白。本申请的样品稀释液，在其中添加杆状病毒感染的昆虫细胞裂解物，使得采用本申请的样品稀释液进行稀释后的阴性样品的OD值下降，并可缩小不同阴性样品间的标准方差，从而降低了间接ELISA方法中判定结果的临界值，减少了假阳性和假阴性的出现，提高了检测结果的准确性。
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公开(公告)号：CN104497137B
公开(公告)日：2017-10-31
申请号：CN201410736335.X
申请日：2014-12-05
IPC分类号： C07K16/08 , C12N15/70 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12N5/20 , C12R1/91
摘要： 本申请公开了一种非洲猪瘟病毒毒株通用单克隆抗体及其制备方法和应用。本申请的制备方法，包括用纯化p54免疫蛋白对小鼠免疫，取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤细胞，用三种筛选抗原进行筛选，获得可稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞，再通过体内或体外的方法制备单克隆抗体；三种筛选抗原包括，原核表达p54重组蛋白、真核表达p54重组蛋白和人工合成的Seq ID No.1所示序列多肽。本申请，用三种筛选抗原对杂交瘤细胞进行筛选，特别是人工合成所有非洲猪瘟病毒毒株共有的多肽作为筛选抗原，使制备的通用单克隆抗体能够对不同地域来源的毒株进行检测，减小了毒株间地域差异造成的漏检现象，提高了检疫工作质量和效率。
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公开(公告)号：CN106350611A
公开(公告)日：2017-01-25
申请号：CN201610964078.4
申请日：2016-10-28
申请人： 深圳市检验检疫科学研究院 , 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心 , 清华大学深圳研究生院
发明人： 秦智锋 , 刘建利 , 唐金明 , 曾少灵 , 卢奕良 , 蔡良语 , 廖立珊 , 陈兵 , 马岚 , 孙洁 , 卢体康 , 陶虹 , 郑晓聪 , 林庆燕 , 陈书琨 , 詹爱军 , 兰文升 , 曹琛福 , 王津津
摘要： 本申请公开了用于H5N8禽流感病毒检测的试剂、检测方法及应用。本申请用于H5N8禽流感病毒检测的试剂，包括引物对和探针，探针在引物对扩增靶标区域内，引物对上游引物为Seq ID No.1所示序列，下游引物为Seq ID No.2所示序列，探针为Seq ID No.3所示序列或Seq ID No.3所示序列的反向互补序列。本申请的H5N8禽流感病毒检测试剂，对禽流感亚种H5N8具有很强特异性，能够准确灵敏的从众多禽流感病毒中特异性检出H5N8。基于本申请试剂的H5N8禽流感病毒检测方法，耗时短，可很快作出判定结果，对于控制流感流行，减少经济损失，最大限度保护社会人群健康和生命具有很大意义。
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公开(公告)号：CN106282414A
公开(公告)日：2017-01-04
申请号：CN201610882400.9
申请日：2016-10-08
申请人： 深圳市检验检疫科学研究院 , 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心 , 清华大学深圳研究生院
发明人： 秦智锋 , 廖立珊 , 陈兵 , 卢奕良 , 曾少灵 , 马岚 , 孙洁 , 卢体康 , 刘建利 , 陶虹 , 郑晓聪 , 唐金明 , 林庆燕 , 陈书琨 , 詹爱军 , 兰文升 , 曹琛福 , 王津津
摘要： 本申请公开了用于H5N6禽流感病毒检测的试剂、检测方法及应用。本申请用于H5N6禽流感病毒检测的试剂，包括引物对和探针，探针在引物对的扩增靶标区域内，引物对上游引物为Seq ID No.1所示序列，引物对下游引物为Seq ID No.2所示序列，探针为Seq ID No.3所示序列或Seq ID No.3所示序列的反向互补序列。本申请用于H5N6禽流感病毒检测的试剂，对禽流感亚种H5N6具有很强特异性，能够准确灵敏的从众多禽流感病毒中特异性的检测出H5N6，为紧急疫情快速诊断和大规模样品的快速检测奠定了基础，特别适合于检验检疫等部门使用，为保障社会安全、避免疫情传播扩散提供了有力的科学工具。
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公开(公告)号：CN103197082B
公开(公告)日：2015-07-15
申请号：CN201310136066.9
申请日：2013-04-16
IPC分类号： G01N33/68
摘要： 本发明公开了一种用于牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗体检测的重组抗原及其快速检测试纸条。其主要针对于BVDV抗体检测的截短的BVDV NS表达抗原和用于检测BVDV抗体的快速检测试纸条。利用抗原表位分析软件，对BVDV NS蛋白氨基酸序列分析，取含有主要抗原表位的片段，根据其对应核苷酸序列设计引物，通过PCR扩增、重组表达载体构建和原核表达，获得了截短BVDV NS重组抗原，纯化后可用于BVDV抗体检测。基于截短的BVDVNS抗原建立的快速检测试纸条，该试纸条具有操作方便、检测快速，且不需专门实验室和设备等优点，克服了现有检测方法的局限，可用于BVDV抗体的快速检测和血清流行病学调查。
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公开(公告)号：CN103364541B
公开(公告)日：2014-12-10
申请号：CN201310268628.5
申请日：2013-06-28
IPC分类号： G01N33/53
摘要： 本申请公开了一种样品稀释液及其在间接ELISA试验中的应用。本申请的稀释液中含有蛋白终浓度60-100μg/mL的杆状病毒感染的昆虫细胞裂解物，其中，杆状病毒感染的昆虫细胞裂解物中不含有检测靶标蛋白。本申请的样品稀释液，在其中添加杆状病毒感染的昆虫细胞裂解物，使得采用本申请的样品稀释液进行稀释后的阴性样品的OD值下降，并可缩小不同阴性样品间的标准方差，从而降低了间接ELISA方法中判定结果的临界值，减少了假阳性和假阴性的出现，提高了检测结果的准确性。
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公开(公告)号：CN104497136B
公开(公告)日：2017-10-31
申请号：CN201410736095.3
申请日：2014-12-05
IPC分类号： C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12N5/20
摘要： 本申请公开了一种非洲猪瘟病毒基因II型毒株单克隆抗体及其制备方法和应用。本申请的制备方法，包括用纯化p54免疫蛋白对小鼠免疫，取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤细胞，用三种筛选抗原进行筛选，获得可稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞，再通过体内或体外的方法制备单克隆抗体；三种筛选抗原包括，原核表达p54重组蛋白、真核表达p54重组蛋白和人工合成的Seq ID No.1所示多肽。本申请，用三种筛选抗原对杂交瘤细胞进行筛选，特别是人工合成特别针对基因II型毒株的多肽作为筛选抗原，使制备的单克隆抗体能够保障基因II型毒株的检测率，减小了漏检概率，提高了检疫工作质量和效率。
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