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公开(公告)号：CN109825611A
公开(公告)日：2019-05-31
申请号：CN201910289642.0
申请日：2019-04-11
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12Q1/6804 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供一种食品中鹅源成分快速检测试剂盒，涉及生物物种鉴定技术领域。本发明首先筛选出一个鹅源通用内标准基因LOC106029425，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其在鹅物种中拷贝数恒定，不存在等位基因变异，可作为鉴定鹅源的靶基因。以该基因为靶序列设计了LAMP扩增引物，与LAMP反应液一起进行恒温扩增，LAMP反应产物用于胶体金核酸试纸条检测。LAMP反应结合胶体金核酸试纸条检测构成快速检测试剂盒，可快速、灵敏地检测食品中的鹅源成分，检测灵敏度可达0.16％(w/w)。本发明试剂盒使用方法简单、成本低廉，反应结果易于观察，特异性好，非常适用于现场实时检测。
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公开(公告)号：CN109825609A
公开(公告)日：2019-05-31
申请号：CN201910289640.1
申请日：2019-04-11
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供一种快速鉴定食品中牛源成分试剂盒及其应用，涉及生物物种鉴定技术领域。本发明首先筛选出一个牛源通用内标准基因ighmbp2，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其位于第29号染色体上，在牛物种中拷贝数恒定，不存在等位基因变异，可作为鉴定牛源的靶基因。以该基因为靶序列设计了非对称扩增引物，非对称PCR反应产物用于DNA银纳米簇检测。非对称PCR反应结合DNA银纳米簇检测构成快速检测试剂盒，可快速、灵敏地检测食品中的牛源成分，检测灵敏度可达4％(w/w)。本发明非对称PCR-DNA银纳米簇通用荧光试剂盒使用方法简单、成本低廉，反应结果易于观察，特异性好，非常适用于现场实时检测。
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公开(公告)号：CN109811068A
公开(公告)日：2019-05-28
申请号：CN201910289661.3
申请日：2019-04-11
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供一种快速鉴定食品中鸡源成分的试剂盒，涉及生物物种鉴定技术领域。本发明首先筛选出一个鸡源通用内标基因LOC107053213，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其位于第4号染色体上，在鸡物种中拷贝数恒定，不存在等位基因变异，可作为鉴定鸡源的靶基因。以该基因为靶序列设计了非对称扩增引物，非对称PCR反应产物用于DNA银纳米簇检测。非对称PCR反应结合DNA银纳米簇检测构成快速检测试剂盒，可快速、灵敏地检测食品中的鸡源成分，检测灵敏度可达4％(w/w)。本发明非对称PCR-DNA银纳米簇通用荧光试剂盒使用方法简单、成本低廉，反应结果易于观察，特异性好，非常适用于现场实时检测。
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公开(公告)号：CN109609607A
公开(公告)日：2019-04-12
申请号：CN201811594801.X
申请日：2018-12-25
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/6851
Abstract: 本发明提供一种用于锌离子定量检测的方法，本发明检测主要包含两个反应步骤：依赖性切割反应和RT-qPCR，在第一步中，将5μL Zn2+浓度的溶液、10μL Zn2+依赖性切割核酶溶液(17ES)和85μL切割缓冲液(300mM NaCl，40mM HEPES，pH 7.5)混合；在37℃下反应60min，之后，精准快速稀释105倍后进行RT-qPCR实验，被切割的底物链无法作为模板进行扩增反应，而未被切割的底物链则可以通过扩增反应实现信号放大，最终结果以切割前后的Cq值变化(ΔCq)来表示切割效果，实现Zn2+的定量检测。本发明采用的Zn2+依赖性切割脱氧核酶17E是已知Zn2+依赖性切割脱氧核酶中切割速率最快的核酶。该酶能够催化切割底物链，并且对Zn2+具有高度亲和力和特异性。
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公开(公告)号：CN109468363A
公开(公告)日：2019-03-15
申请号：CN201811428824.3
申请日：2018-11-27
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/6825 , C12Q1/6851 , C12Q1/689 , C12Q1/04 , C12R1/42
Abstract: 本发明公开了一种用于沙门氏菌定量检测的可视化级联放大功能核酸传感器，该传感器的制备方法包括以下步骤：提取菌种DNA；开发与筛选RPA反应的引物；优化RPA反应的反应时间、反应温度，确定引物浓度；优化TdT反应条件。通过本发明的方法设计的无标记和可视化的用于灵敏的和选择性的检测沙门氏菌的级联放大的功能核酸传感器，可以在较短的时间内完成对沙门氏菌的特异性检测，具有可视化、高灵敏度和通用性强等优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107340390B
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201710482034.2
申请日：2017-06-22
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/558 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及一种基于核酸层析生物传感技术检测产气荚膜梭菌的方法，根据产气荚膜梭菌的毒力基因cpa，设计环介导等温扩增引物(SEQ ID NO:1‑4)，结合纳米酶核酸试纸条，建立一种基于LAMP纳米酶传感器的产气荚膜梭菌检测方法。本方法可成功地用于区分活菌细胞和死菌细胞，对产气荚膜梭菌的检测下限可达10CFU/mL。
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公开(公告)号：CN107345961B
公开(公告)日：2019-01-29
申请号：CN201710482816.6
申请日：2017-06-22
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及一种基于核酸层析生物传感技术检测阪崎肠杆菌的方法，根据阪崎肠杆菌的毒力基因ompA，设计环介导等温扩增引物(SEQ ID NO:1‑4)，结合纳米酶核酸试纸条，建立一种基于LAMP纳米酶传感器的阪崎肠杆菌检测方法。本方法可成功地用于区分活菌细胞和死菌细胞，对阪崎肠杆菌的检测下限可达10CFU/mL。
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公开(公告)号：CN109234448A
公开(公告)日：2019-01-18
申请号：CN201811427148.8
申请日：2018-11-27
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6825 , C12Q1/6844
Abstract: 本发明公开了一种用于转基因CaMV35S启动子的定量检测的可视化级联放大功能核酸传感器，该传感器的制备方法包括以下步骤：提取植物DNA；优化RPA反应的反应时间、反应温度，确定引物浓度；优化TdT反应条件。通过本发明的方法设计的无标记和可视化的用于灵敏的和选择性的检测转基因CaMV35S启动子的级联放大的功能核酸传感器，可以在较短的时间内完成对转基因CaMV35S启动子的特异性检测，具有可视化、高灵敏度和通用性强等优点。
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公开(公告)号：CN109022561A
公开(公告)日：2018-12-18
申请号：CN201810638242.1
申请日：2018-06-20
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/6876 , C12Q1/6825
CPC classification number: C12Q1/6876 , C12Q1/6825 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明属于重金属检测领域，具体公开了一种通用隔断超快扩增汞、铜错配型功能核酸比色传感器。本发明通过巧妙地设计引物与模板(SEQ ID NO.1‑4所示)，使得在汞、铜离子存在下可对模板进行超快扩增，并使扩增产物在适宜环境中形成G四链体。进一步利用G四链体的类过氧化物酶活性进行显色，解决了传统PCR产物难于可视化检测的难题，实现了对汞、铜离子的快速、可视化检测。不仅如此，本发明所提供的传感器与方法对汞、铜离子具有高特异、高灵敏的特点，检测结果更加客观、准确。
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公开(公告)号：CN108949917A
公开(公告)日：2018-12-07
申请号：CN201810636009.X
申请日：2018-06-20
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/6851
Abstract: 本发明属于重金属检测领域，具体公开了一种汞离子错配型通用隔断超快扩增比色传感器。本发明通过巧妙地设计引物与模板(SEQ ID NO.1‑3所示)，使得在汞离子存在下可对模板进行超快扩增，并使扩增产物在适宜环境中形成G四链体。进一步利用G四链体的类过氧化物酶活性进行显色，解决了传统PCR产物难于可视化检测的难题，实现了对汞离子的快速、可视化检测。不仅如此，本发明所提供的传感器与方法对汞离子具有高特异、高灵敏的特点，检测结果更加客观、准确。
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