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公开(公告)号：CN114015748A
公开(公告)日：2022-02-08
申请号：CN202210010868.4
申请日：2022-01-06
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12Q1/6804 , C12Q1/10
摘要： 本发明构建了一种基于级联放大快速定量检测阪崎肠杆菌的生物传感器。该传感器通过磁富集、抗体‑核酸适体识别、EXPAR和DNAzyme信号积累实现阪崎肠杆菌的四重级联放大。首先，制备免疫磁珠用于磁富集；其次，磁分离从复杂基质中直接捕获靶标，随后添加核酸适体形成了抗体‑靶标‑融合核酸适体的免疫三明治夹心结构，保证传感器的高特异性；再次，通过EXPAR实现信号的指数放大；最后，通过产物中的富G序列形成类酶活性的四链体，催化显色信号输出。本方法具有高灵敏度、高特异性，快速简便，在2 h内即可实现对阪崎肠杆菌的定量检测，整个过程免提取，结果可视化，有效解决了传感器制备复杂、测定时间长的难题。
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公开(公告)号：CN110283919B
公开(公告)日：2021-01-01
申请号：CN201910387932.9
申请日：2019-05-10
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12Q1/10 , C12R1/42
摘要： 本发明涉及分子生物学技术领域，特别涉及一种用于沙门氏菌定量检测的生物传感器及方法。该生物传感器包括RPA反应试剂、SDA反应试剂和显色试剂。本发明基于重组链替代反应对沙门氏菌的双链核酸进行扩增，得到带有富G序列和切刻酶识别位点的dsDNA。Nt.Bst NBI切刻酶特异性识别酶切位点并进行切割，在Bst DNA聚合酶的作用下，形成切口的DNA链将会延伸，将DNA链上的G‑四联体替换下来。释放出的G‑四联体与Hemin结合，形成G4 DNAzyme，可催化H2O2将无色的TMB氧化为肉眼可见的蓝色oxTMB，进而通过颜色变化和吸光值的改变对沙门氏菌进行检测。
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公开(公告)号：CN115261284B
公开(公告)日：2023-05-26
申请号：CN202211048160.4
申请日：2022-08-30
摘要： 本发明公开了属于生物技术领域的一种克劳氏碱性卤杆菌PA21菌剂，包括保藏编号为CGMCC NO.25432的克劳氏碱性卤杆菌PA21菌株、高岭土及羧甲基纤维素钠。克劳氏碱性卤杆菌PA21菌剂具有高效降解龙葵素的作用，通过载体和稳定剂的筛选和比例优化，高岭土的添加比例为菌体匀浆的3％(m/v)，羧甲基纤维素钠的添加比例为菌体匀浆的0.5％(m/v)制备的克劳氏碱性卤杆菌PA21菌剂活性高，能够广泛应用的降解菌剂，为今后改降解菌的产业化生产和应用提供重要基础。
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公开(公告)号：CN110283919A
公开(公告)日：2019-09-27
申请号：CN201910387932.9
申请日：2019-05-10
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12Q1/10 , C12R1/42
摘要： 本发明涉及分子生物学技术领域，特别涉及一种用于沙门氏菌定量检测的生物传感器及方法。该生物传感器包括RPA反应试剂、SDA反应试剂和显色试剂。本发明基于重组链替代反应对沙门氏菌的双链核酸进行扩增，得到带有富G序列和切刻酶识别位点的dsDNA。Nt.Bst NBI切刻酶特异性识别酶切位点并进行切割，在Bst DNA聚合酶的作用下，形成切口的DNA链将会延伸，将DNA链上的G-四联体替换下来。释放出的G-四联体与Hemin结合，形成G4 DNAzyme，可催化H2O2将无色的TMB氧化为肉眼可见的蓝色oxTMB，进而通过颜色变化和吸光值的改变对沙门氏菌进行检测。
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公开(公告)号：CN115404184B
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202211049458.7
申请日：2022-08-30
摘要： 本发明公开了属于生物技术领域的一株克劳氏碱性卤杆菌(Alkalihalobacillusclausii)PA21，保藏日期为2022年7月29日，保藏编号为CGMCC NO.25432。本发明的克劳氏碱性卤杆菌PA21菌株耐药，不存在质粒，无溶血活性，不产生有害代谢产物，具有良好的环境适应性和较高的龙葵素耐受性。该菌株的最适降解温度为37℃，最适降解pH为7.5，对α‑茄碱和α‑卡茄碱的降解率均在90％以上。
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公开(公告)号：CN115404184A
公开(公告)日：2022-11-29
申请号：CN202211049458.7
申请日：2022-08-30
摘要： 本发明公开了属于生物技术领域的一株克劳氏碱性卤杆菌(Alkalihalobacillusclausii)PA21，保藏日期为2022年7月29日，保藏编号为CGMCC NO.25432。本发明的克劳氏碱性卤杆菌PA21菌株耐药，不存在质粒，无溶血活性，不产生有害代谢产物，具有良好的环境适应性和较高的龙葵素耐受性。该菌株的最适降解温度为37℃，最适降解pH为7.5，对α‑茄碱和α‑卡茄碱的降解率均在90％以上。
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公开(公告)号：CN114075565B
公开(公告)日：2022-04-19
申请号：CN202210057605.9
申请日：2022-01-19
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12N15/115 , G01N33/68 , G01N33/53
摘要： 本发明公开了一种用于检测β‑乳球蛋白的双功能G‑四链体变构生物传感器，包括：（1）β‑乳球蛋白双功能G‑四链体适配体设计；（2）β‑乳球蛋白生物传感器反应条件优化；（3）β‑乳球蛋白的检测。设计原理是基于β‑乳球蛋白生物传感器序列在引入检测靶标前后发生构象变化，对G‑四链体/氯化血红素（Hemin）DNA仿生酶的过氧化氢酶活产生影响，进而实现β‑乳球蛋白的检测。G‑四链体序列响应靶标浓度，使得其催化3,3',5,5'‑四甲基联苯胺（TMB）显色后溶液呈现出相应的比色梯度，最终实现了β‑乳球蛋白简便、快速、低成本、超灵敏的比色检测。
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公开(公告)号：CN110205394A
公开(公告)日：2019-09-06
申请号：CN201910389304.4
申请日：2019-05-10
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12R1/42
摘要： 本发明涉及分子生物学技术领域，特别涉及一种用于检测沙门氏菌的生物传感器及方法。该生物传感器包括RPA反应试剂、Lambda核酸外切酶切割反应试剂、HCR反应试剂和显色试剂。本发明通过多酶系统对沙门氏菌的双链核酸进行扩增，得到在5’端磷酸化的dsDNA。Lambda外切酶消化dsDNA中的5’-磷酸化链，RPA产物变成单链。通用接头被暴露出来，启动HCR反应，释放出的G-四联体与Hemin结合，形成G4 DNAzyme，可催化H2O2将无色的TMB氧化为肉眼可见的蓝色oxTMB，进而通过颜色变化和吸光值的改变对沙门氏菌进行检测。本发明具有可视化、通用性、快速和高敏感性等特点。
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公开(公告)号：CN115261284A
公开(公告)日：2022-11-01
申请号：CN202211048160.4
申请日：2022-08-30
摘要： 本发明公开了属于生物技术领域的一种克劳氏碱性卤杆菌PA21菌剂，包括保藏编号为CGMCC NO.25432的克劳氏碱性卤杆菌PA21菌株、高岭土及羧甲基纤维素钠。克劳氏碱性卤杆菌PA21菌剂具有高效降解龙葵素的作用，通过载体和稳定剂的筛选和比例优化，高岭土的添加比例为菌体匀浆的3％(m/v)，羧甲基纤维素钠的添加比例为菌体匀浆的0.5％(m/v)制备的克劳氏碱性卤杆菌PA21菌剂活性高，能够广泛应用的降解菌剂，为今后改降解菌的产业化生产和应用提供重要基础。
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