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公开(公告)号：CN103333912B
公开(公告)日：2015-04-15
申请号：CN201310244829.1
申请日：2013-06-19
申请人： 中国农业科学院饲料研究所
摘要： 本发明提供了一种利用GAP启动子在毕赤酵母中组成型表达菌丝霉素衍生物MP1102的方法。本发明利用GAP启动子替换载体pPICMP1102中的AOX启动子，构建组成型重组表达载体pGAPMP1102并转化毕赤酵母X-33，获得的重组酵母经发酵培养，能够分泌产生MP1102。本发明首次实现菌丝霉素衍生物MP1102在毕赤酵母中组成型表达，经120小时培养后发酵液中总蛋白浓度达到387.6mg/L；发酵液上清经G25脱盐和SP离子交换层析后能够得到目标产物纯品，产量为105.84mg/L；经Genetools分析其纯度为95.13%。抑菌实验表明MP1102对金黄色葡萄球菌ATCC标准菌株有很强抑制作用，MP1102的MIC介于0.0028-0.11μM。本发明所述方法获得的MP1102可应用于抗菌药物、食品添加剂、化妆品、饲料添加剂等领域，具有广阔的应用价值和市场前景。
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公开(公告)号：CN103319586A
公开(公告)日：2013-09-25
申请号：CN201310253154.7
申请日：2013-06-24
申请人： 中国农业科学院饲料研究所
摘要： 本发明提供了一种抗耐药性金黄色葡萄球菌的新型抗菌肽MP1102，其对金黄色葡萄球菌，包括MRSA，具有强烈的杀菌活性。对编码抗菌肽MP1102的基因进行优化，构建pPICZαA-MP1102重组表达载体，经BglII线性化转化毕赤酵母X-33，获得MP1102高水平表达重组酵母菌株M5，实现了MP1102在毕赤酵母X-33中高水平分泌表达，建立M5转化子高密度发酵体系，总蛋白浓度、抗菌肽MP1102浓度及生物量检测结果显示，25℃，120h发酵后总蛋白浓度达到809mg/L，抗菌肽MP1102浓度达到420mg/L，占总蛋白比例为52%，生物量达到353g/L。MP1102具有开发为新一代抗菌药物的潜力。
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公开(公告)号：CN102008006B
公开(公告)日：2013-01-09
申请号：CN200910169501.1
申请日：2009-09-08
申请人： 中国农业科学院饲料研究所
摘要： 本发明涉及生物发酵技术领域，以豆粕、棉粕和麸皮为原料，利用微生物发酵技术有效去除豆粕中的大豆抗营养因子和棉粕中的棉酚，同时得到富含凝结芽孢杆菌的优质发酵植物性饼粕，尤其是一种固态发酵的制备分子量低于15KDa的饲用植物性多肽的工艺。原始出发菌株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans，CGMCC 1.2009)1株经过活化，扩大培养后，OD600nm达到4时的培养液，作为饼粕发酵接种液。以10％的接种量接种到植物性饼粕发酵基料中(豆粕和棉粕粉碎过20目，豆粕∶棉粕∶麸皮＝4∶4∶2，料水比＝1∶0.9)，混合均匀，于30℃发酵48h。于60℃烘干，对发酵前后的豆粕进行营养成分分析。
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公开(公告)号：CN102559854A
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201010595049.8
申请日：2010-12-20
申请人： 中国农业科学院饲料研究所
摘要： 本发明公开了一种转基因作物检测中必要的标准质粒分子及其构建方法。将八基因质粒分子pTLE8(专利申请号201010286884.3)进行改造，增加转基因玉米Bt176品系和Mon810品系的3′端转化事件特异性序列和玉米内参基因Hmg特异性序列的融合片段，改造成十基因的质粒分子pTLH10(Lec1，35S，NOS，PAT，Sad1，Cry1Ab/c，Bt176，Mon810和Hmg)。本发明中构建的标准质粒分子完全可以代替阳性标准品，适用于对转基因大豆GTS40-3-2品系、转基因玉米Bt176和Mon810品系及转Bt基因棉花的筛选、基因特异性和品系特异性的定性和定量PCR分析和检测。
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公开(公告)号：CN102008006A
公开(公告)日：2011-04-13
申请号：CN200910169501.1
申请日：2009-09-08
申请人： 中国农业科学院饲料研究所
摘要： 一种小分子(＜15KD)发酵饲用多肽的制备方法本发明涉及生物发酵技术领域，以豆粕、棉粕和麸皮为原料，利用微生物发酵技术有效去除豆粕中的大豆抗营养因子和棉粕中的棉酚，同时得到富含凝结芽孢杆菌的优质发酵植物性饼粕，尤其是一种固态发酵的制备分子量低于15KDa的饲用植物性多肽的工艺。原始出发菌株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)1株经过活化，扩大培养后，OD600nm达到4时的培养液，作为饼粕发酵接种液。以10％的接种量接种到植物性饼粕发酵基料中(豆粕和棉粕粉碎过20目，豆粕∶棉粕∶麸皮＝4∶4∶2，料水比＝1∶0.9)，混合均匀，于30℃发酵48h。于60℃烘干，对发酵前后的豆粕进行营养成分分析。
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公开(公告)号：CN101319007A
公开(公告)日：2008-12-10
申请号：CN200710110507.2
申请日：2007-06-06
申请人： 中国农业科学院饲料研究所
摘要： 本发明是具有高抑菌活性的新抗菌肽设计合成。色氨酸在抑菌活性中有重要作用，本发明采用提高色氨酸含量的方法来改善LfcinB15抗菌活性，设计并合成了新抗菌肽LfcinB15－W4，10，即通过色氨酸分别替代牛乳铁蛋白15肽的第四位氨基酸残基Arg和第十位氨基酸残基Met，其氨基酸序列为：FKCWRWQWRWKKLGA。体外抑菌实验结果表明新抗菌肽对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌都有不同程度的抗菌效果，比较而言，LfcinB15－W4，10对革兰氏阴性菌抑制活性较差，对革兰氏阳性细菌的抑制活性较强。其对金黄色葡萄球菌ATCC 25923、粪链球菌和枯草芽孢杆菌ATCC 6633的最小抑菌浓度分别为4μg/ml、8μg/ml和16μg/ml。青霉素、金霉素、链霉素、多西环素4种抗生素总体上要好于抗菌肽LfcinB 15－W4，10。LfcinB 15－W4，10本身不含稀有氨基酸和外源化学成分，不产生耐药性，是一种极具应用潜力的健康安全的抗菌替代物。
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公开(公告)号：CN117534742A
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202311375336.1
申请日：2023-10-23
申请人： 中国农业科学院饲料研究所
摘要： 本发明涉及抗菌肽提取及检测技术领域，具体为一种饲料中抗菌肽NZ2114的提取、净化及检测方法，将饲料样品加入到Na2EDTA‑Mcllvaine缓冲液和乙腈组成的混合溶液中，超声后离心，取上清液；依次采用甲醇、超纯水和氨化甲醇对WCX净化柱进行活化、平衡和pH值调节；将上清液加入到WCX净化柱中，经甲醇与水的混合溶剂除杂后，使用甲酸甲醇从WCX净化柱上洗脱，得到抗菌肽NZ2114洗脱液。对抗菌肽NZ2114洗脱液浓缩和复溶后可直接进行高效液相色谱检测，得到峰面积与抗菌肽NZ2114浓度的线性关系好。本发明提取和净化方法的提取率和回收率高，重复性好，进而提高HPLC检测的可行性、稳定性和准确性。
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公开(公告)号：CN116196393A
公开(公告)日：2023-06-02
申请号：CN202211668258.X
申请日：2022-12-23
申请人： 中国农业科学院饲料研究所
IPC分类号： A61K38/16 , C07K14/39 , A23L3/3526 , A23L33/18 , A23K20/147 , A61P31/04 , A61K8/64 , A61Q19/00
摘要： 本发明公开了抗菌肽AP138在制备抗菌药物中的应用。本发明利用基因工程技术，通过对编码抗菌肽AP138的基因进行密码子优化，使其在毕赤酵母中重组表达。本发明首次实现抗菌肽AP138在毕赤酵母基因工程菌高产表达，发酵液上清蛋白浓度达3.1g/L，发酵液经离子交换柱纯化获得高纯度样品，对革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌、链球菌、表皮葡萄球菌等具有较好的抗菌活性，MIC在4‑16μg/mL(0.9‑3.6μM)；同时抗菌肽AP138具有低细胞毒性和低溶血性的特点，可应用于抗菌药物、食品保鲜剂、食品添加剂、化妆品、饲料添加剂开发等领域，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN114702554A
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202210483672.7
申请日：2022-05-05
申请人： 中国农业科学院饲料研究所
摘要： 本发明提供抗菌肽NZX在制备无乳链球菌抗菌药物中的应用。本发明首次发现抗菌肽NZX对无乳链球菌具有抑制作用。实验表明，NZX对无乳链球菌具有高效、快速杀菌、低耐药的作用。抗菌肽NZX对无乳链球菌的抗菌活性和杀菌速率明显优于氟苯尼考，溶血率较低，血浆和血清稳定性较高。NZX的作用机制为通过抑制细菌细胞壁合成来杀灭细菌；在64×MIC浓度下，对初期生物膜的抑制率为49.0％；在256×MIC下的溶血率仅为0.71％；在与25％血清和血浆共孵育60min后，NZX分别保留97.8％和98.9％的活性。NZX有望被开发成为治疗由无乳链球菌引起的链球菌病的新型制剂。
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公开(公告)号：CN107827988A
公开(公告)日：2018-03-23
申请号：CN201710831135.6
申请日：2017-09-15
申请人： 中国农业科学院饲料研究所
IPC分类号： C07K19/00 , A23L33/18 , A23K20/147 , A61K38/16 , A61P31/04 , A61P17/02 , A61K8/64 , A61Q19/00
CPC分类号： Y02A50/473 , Y02A50/481 , C07K14/00 , A23K20/147 , A23L33/18 , A61K8/64 , A61K38/00 , A61K2800/10 , A61Q19/00 , C07K2319/10
摘要： 本发明公开了一种新型的嵌合穿膜抗菌肽T11N2，氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，其是在高活性抗菌肽N2的基础上连接具有11个氨基酸的细胞穿膜肽Tat形成的嵌合多肽。抗菌肽T11N2结构简单、低毒安全、成本较低、合成相对容易，是一种可高效穿膜并杀死胞内沙门氏菌的新型嵌合穿膜杀菌肽。本发明的抗菌肽T11N2可应用于抗菌药物、食品添加剂、化妆品、饲料添加剂等领域，具有广阔的应用价值和市场前景。
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