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公开(公告)号：CN103484568B
公开(公告)日：2015-06-24
申请号：CN201310430466.0
申请日：2013-09-18
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
摘要： 本发明公开了一种草鱼呼肠孤病毒Ⅰ型和Ⅱ型的双重荧光定量PCR检测方法，该方法可以实现在一个待测样本中同时检测草鱼呼肠孤病毒Ⅰ型和Ⅱ型的存在，并能对两种病毒的负载水平进行定量。本发明还提供了一种用于草鱼呼肠孤病毒Ⅰ型和Ⅱ型的双重荧光定量PCR检测的试剂盒。本发明的检测方法及试剂盒操作简便，特异性强，检测灵敏度和准确率高、可靠，具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN103539842B
公开(公告)日：2015-05-13
申请号：CN201310513653.5
申请日：2013-10-25
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C07K14/14 , C07K16/10 , C12N15/46 , A61K39/15 , A61K39/42 , A61P31/14 , G01N33/68 , G01N33/569
摘要： 本发明公开了一种草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型S10基因编码的重组蛋白、由其制备的多克隆抗体及应用。草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型S10基因编码蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，编码该蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明获得的重组蛋白具有较好的免疫原性，与GCRV其它结构蛋白相比，其诱导免疫动物产生的特异性抗体效价更高。进一步试验表明，用S10重组蛋白免疫草鱼，可使草鱼诱导产生较高的特异性抗体，并能对草鱼呼肠孤病毒强毒株的攻击起到一定的免疫保护作用。因此，对GCRV Ⅱ型S10基因编码蛋白的研究和应用，对开发草鱼出血病新型疫苗及免疫学检测试剂盒具有极其重要的意义，为草鱼出血病提供新的有效解决途径。
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公开(公告)号：CN104388588A
公开(公告)日：2015-03-04
申请号：CN201410633166.7
申请日：2014-11-11
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
CPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6804 , C12Q2531/143 , C12Q2563/131
摘要： 本发明公开了一种Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒NASBA-ELISA检测引物、探针及试剂盒。所述引物及探针的核苷酸序列如SEQIDNO.1～4所示。所述试剂盒中含有引物、探针、NASBA扩增缓冲液，酶混合液，扩增产物检测试剂，阴性对照和阳性对照。本发明的Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒NASBA-ELISA检测试剂盒检测时间周期短、检测效率高；检测病毒特异性高，准确率高；在进行病毒定性分析的同时还能进行病毒定量分析；检测灵敏度比普通PCR高；操作简单、易于推广；实验结果重复性好。
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公开(公告)号：CN103484568A
公开(公告)日：2014-01-01
申请号：CN201310430466.0
申请日：2013-09-18
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
摘要： 本发明公开了一种草鱼呼肠孤病毒Ⅰ型和Ⅱ型的双重荧光定量PCR检测方法，该方法可以实现在一个待测样本中同时检测草鱼呼肠孤病毒Ⅰ型和Ⅱ型的存在，并能对两种病毒的负载水平进行定量。本发明还提供了一种用于草鱼呼肠孤病毒Ⅰ型和Ⅱ型的双重荧光定量PCR检测的试剂盒。本发明的检测方法及试剂盒操作简便，特异性强，检测灵敏度和准确率高、可靠，具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN118127234A
公开(公告)日：2024-06-04
申请号：CN202410335283.9
申请日：2024-03-22
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，特别是涉及一种基于RAA‑CRISPR/Cas12a检测杂交鳢弹状病毒的引物对、体系、试剂盒和应用。所述引物对包括引物对1、引物对2、引物对3和引物对4中的任一对。本发明利用HSHRV糖蛋白序列，使用PRIMER 5.0软件，设计4对特异性上下游引物，成功对核酸进行扩增。随后根据设计选择，手动设计特异性crRNA探针，使用阳性样品为模板，分别对引物及探针进行筛选，成功构建特异性、灵敏性、准确性均表现良好的检测方法。可检测出10copies/μL的阳性样品，且只在阳性模板有荧光信号，其他常见水生动物常见病毒均无扩增。在临床样品检测实验中，表现出较好的准确性。
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公开(公告)号：CN116731203B
公开(公告)日：2023-12-19
申请号：CN202310520431.X
申请日：2023-05-09
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C07K19/00 , A23K10/18 , A23K20/147 , A23K20/153 , A23K50/80 , C12N15/62 , C12N15/74 , C12N1/21 , A61K39/15 , A61K39/385 , A61P31/14 , C12R1/01
摘要： 本发明属于基因工程及分子免疫学技术领域，具体涉及一种融合表达GCRV VP4和LTB的重组乳酸菌及其制备方法与应用。本发明提供了一种融合蛋白，包含GCRV VP4蛋白和大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位蛋白；通过大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位蛋白可以进一步提升VP4蛋白被肠黏膜免疫组织抗原呈递细胞直接识别并呈递抗原，激活先天性免疫Toll样受体信号转导，提高免疫相关基因(IFNα、TLR3、TLR5、MyD88、NF‑κ
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公开(公告)号：CN117106613A
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202310377122.1
申请日：2023-04-10
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
摘要： 本发明公开了一种鱼类维氏气单胞菌弱毒疫苗株及其应用。本发明的维氏气单胞菌弱毒疫苗株，命名为FS12001，2023年3月7日保藏于湖北省武汉市武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2023260。该弱毒疫苗株基因组的大小为4,711,745bp，GC含量为58.45％；具有4,128个编码蛋白质基因，128个转运RNA基因，31个核糖体RNA基因；具有4个CRISPR序列、4个基因岛、4个前噬菌体、4个基因簇、4个启动子和4个旁系同源基因。兔抗血清能与不同来源的维氏气单胞菌菌株产生良好的特异性凝集反应。弱毒活疫苗和灭活疫苗对淡水养殖鱼类安全性高，能有效预防维氏气单胞菌引起的细菌性败血症。对减少细菌性败血症防治中抗生素类药物的使用和保障水产品质量安全具有积极作用。
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公开(公告)号：CN116836912A
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202310765642.X
申请日：2023-06-26
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
摘要： 本发明公开了一种大口黑鲈吻端细胞系及其构建方法和应用；所述细胞系的保藏编号为CCTCC NO：C2023121；该细胞系的染色体为56条，为永久细胞系，可以无限增殖，并可对其进行冷冻保存；而且YL03‑S细胞对大口黑鲈易感的LMBV、ISKNV、MSRV均非常敏感，用此细胞系扩增这三种病毒的增殖量显著高于大口黑鲈心肌细胞系、鳜鱼脑细胞系CPB，可以用于大口黑鲈易感病毒疫苗的研发中；还可用于表达外源基因进行基因功能的研究；该细胞系的建立在丰富大口黑鲈细胞库的同时可为水产动物病毒性疾病的病原分离、培养、检测提供保障，还可为开展大口黑鲈易感病毒的感染途径、感染机理以及研制病毒疫苗等提供了便利。
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公开(公告)号：CN113604438B
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202110751722.0
申请日：2021-07-02
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
摘要： 本发明公开了一种抗罗非鱼湖病毒的单克隆抗体及其细胞株和应用，该杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞TiLV S10E3，于2020年11月5日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2020209。该杂交瘤细胞株由SP2/0骨髓瘤细胞与免疫了罗非鱼湖病毒S10节段编码蛋白的小鼠脾细胞融合得到，能够无限增殖并持续产生抗罗非鱼湖病毒S10节段编码蛋白的单克隆抗体，产生的单克隆抗体效价高，对罗非鱼湖病毒具有较好的特异性，可用于各类体外检测、野毒株病毒筛选分离以及抗病毒药物筛选等多个方面，具有极高的应用及科研价值。
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公开(公告)号：CN109517806B
公开(公告)日：2022-05-20
申请号：CN201811530181.3
申请日：2018-12-14
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C12N7/00 , C12N15/11 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种罗非鱼湖病毒强毒株及其RPA检测引物和方法，本发明设计了针对RPA反应的引物组；本发明首次分离出罗湖病毒，而且检测方法快速简便、特异性强，灵敏度高，适用于养殖场的现场检测等，具有极高的应用价值。
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