公开(公告)号：CN101509036B

公开(公告)日：2012-05-09

申请号：CN200910030132.8

申请日：2009-03-27

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 胡白石 ,  田艳丽 ,  张蕾 ,  刘凤权

IPC: C12Q1/68 ,  C12R1/18

Abstract: 本发明亚洲梨火疫的检测试剂盒属于农作物防病治病及植物检疫范畴。上游引物HrcC-F1：5′-GACGTTTGCACCTGGAAACCG-3′；下游引物HrcC-R1：5′-GCGGTAGGTAATCAAGGCCAC-3′。试剂盒包括：1mL检测溶液，含50mmol.L-1Tris.Cl和125mmol.L-1KCl和2.5mmol.L-1MgCl2和10mMdNTPs和上、下游引物HrcC-F1/HrcC-R10.25mmol/mL和0.1mg.mL-1BSA和Taq DNA聚合酶100单位。以此引物为基础的亚洲梨火疫检测试剂盒具较强的特异性、灵敏性及稳定性，为亚洲梨火疫检测提供了快速、灵敏、特异的技术方法。图为亚洲梨火疫的特异PCR产物。

公开(公告)号：CN101880325A

公开(公告)日：2010-11-10

申请号：CN201010204933.4

申请日：2010-06-22

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘凤权 ,  李刚 ,  钱国良 ,  华修德 ,  秦娜

IPC: C07K16/44 ,  C07K14/765 ,  C12N5/20 ,  G01N33/577 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明涉及抗吡虫啉农药单克隆抗体及其制备方法，属于生物技术领域。用免疫半抗原1-[6-(2-羧乙硫基-3-吡啶)甲基]-N-硝基-2-咪唑啉亚胺与牛血清白蛋白的偶联物免疫BALB/c鼠，将免疫后的小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞Sp2/0通过杂交瘤技术制备杂交瘤细胞，获得了能稳定分泌抗吡虫啉农药单克隆抗体的杂交瘤株2F11/A9。此抗体经过有效性验证证明可用于农业生产环境和农产品中吡虫啉残留的灵敏快速检测。本发明涉及的抗吡虫啉农药单克隆抗体制备技术简便可行，抗体的整个制备过程无需要特别的仪器设备，容易工厂化规模生产。

公开(公告)号：CN101608236A

公开(公告)日：2009-12-23

申请号：CN200910030129.6

申请日：2009-03-27

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 胡白石 ,  田艳丽 ,  刘凤权 ,  王源超 ,  郑小波

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  G01N21/64 ,  C12R1/18

Abstract: 本发明用于检测梨火疫病菌和亚州梨火疫病菌的padlock探针及其多重检测方法属于农作物防病治病及植物检疫范畴。用于检测梨火疫病菌的padlock探针序列：P－e.amy：GACTTCGCAGGCGCCTTGCTCATTACTTPIP2ATCGGCCTGTAATCGGATCGACACGGTGTGTCGC用于检测亚洲梨火疫病菌的padlock探针序列P－e.pyr：TATGGCGTCCCCAAGGGGATTCGAACCCPIP2CCGACTCTAGGATCGTGGATCACTTCGTTACCGG.以此探针为基础结合Macroaary技术能够同时检测梨火疫病菌和亚州梨火疫病菌，这种多重检测方法具较强的特异性、灵敏性及稳定性，为梨火疫病菌和亚州梨火疫病菌的检测提供了快速、灵敏、特异的技术方法。图为padlock探针结合Macroaary技术同时检测梨火疫病菌和亚州梨火疫病菌结果。

公开(公告)号：CN101608235A

公开(公告)日：2009-12-23

申请号：CN200910030127.7

申请日：2009-03-27

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 胡白石 ,  田艳丽 ,  刘凤权 ,  王源超 ,  郑小波

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  C12R1/64

Abstract: 本发明用于检测水稻白叶枯病菌和水稻细菌性条斑病菌的padlock探针及其多重检测方法属于农作物防病治病及植物检疫范畴。水稻白叶枯病菌的padlock探针序列：P－x.o.o：GGAGCTATATGCCGTGCTGTGTGGAGTACTCGACCGTTAGCAGCATGACCGAGATGTACCGCTATCGTGAATCGCCTACAATTCTGTCCCCCAAGTTGCCTC。水稻细菌性条斑病菌的padlock探针序列：P－x.o.oc：CCACACAACACGGCATATCGCTCCAAGGCTCGACCGTTAGCAGCATGACCGAGATGTACCGCTATCGTGCGGCATACGTTCGTCAAATGGTGGCTTTGTACC。以此探针为基础结合Macroaary技术能够同时检测水稻白叶枯病菌和细菌性条斑病菌，这种多重检测方法具较强的特异性、灵敏性及稳定性，为水稻白叶枯病菌和细菌性条斑病菌的检测提供了快速、灵敏、特异的技术方法。图为Padlock探针结合Macroaary技术同时检测水稻白叶枯病菌和水稻细菌性条斑病菌结果。

公开(公告)号：CN101177671A

公开(公告)日：2008-05-14

申请号：CN200710190998.6

申请日：2007-12-05

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘凤权 ,  钱国良 ,  姜英华 ,  韩冰 ,  胡白石

IPC: C12N1/20 ,  A01N63/02

Abstract: 本发明提供一株防治植物病害的生防菌株及其菌剂，属于生物防治领域。所用菌株为革兰氏染色阴性细菌，经鉴定为产酶溶杆菌(Lysobacter enzymogenes)，菌株代号为OH11。菌株OH11无鞭毛但有滑移性，能产生包括几丁质酶、β－1，3－葡聚糖酶和蛋白酶等多种胞外水解酶，能有效抑制真菌、细菌的生长。菌株OH11对油菜菌核病菌和辣椒疫霉病菌的抑菌圈直径都大于22.0mm；对马铃薯环腐病菌的拮抗作用较强，抑菌圈直径达到50mm。将OH11菌种接种入种子罐，培养至对数生长期，将种子液接入生产罐培养，生产罐所用培养基与种子罐培养基相同。液体发酵采用通氧深层发酵和分批补料工艺，溶氧量为15％－20％，发酵温度为30℃，发酵时间72h，初始pH值7.5。发酵完成后培养液出罐直接用塑料包装桶或包装瓶分装成液体剂型或采用泥炭吸附用包装袋分装成固体剂型。生防菌株OH11可有效地防治植物病原真菌、细菌、线虫等病害，总体防治效果在50％－70％。温室盆栽试验中，OH11对辣椒疫病和番茄青枯病的防治效果分别达到83.6％和86.4％。菌株OH11具有抗菌谱广、活性高、对环境安全等特性，在农药污染严重的今天，产酶溶杆菌及其菌剂将是一种很好的替代品。

公开(公告)号：CN1616481A

公开(公告)日：2005-05-18

申请号：CN200310106274.0

申请日：2003-11-13

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘凤权 ,  张奇

IPC: C07K1/02 ,  C07K14/00 ,  G01N33/53 ,  G01N33/531

Abstract: 本发明速灭威人工抗原合成技术属于有机化学及免疫学技术范畴。根据有机化学反应的一般原理，合成速灭威半抗原及抗原(包括包被抗原与免疫原)，包括：间－甲基苯甲酰氯的合成，β－(间－甲基苯甲酰)氨基丙酸(H速)的合成，速灭威人工抗原的合成，速灭威人工抗原白色乳状液装于若干1ml离心管中，于－20℃冰箱中存放备用。此抗原具有稳定性好、免疫原性较强等特点。此抗原可制备出高效价、高亲和力的速灭威抗体。抗原制备技术简便可行：抗原的整个制备过程无需要特别的仪器设备，成本低廉，容易工厂化规模生产。

公开(公告)号：CN1186458C

公开(公告)日：2005-01-26

申请号：CN03137645.2

申请日：2003-06-19

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 胡白石 ,  许志刚 ,  卢玲 ,  刘凤权

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

Abstract: 本发明“一种提高PCR技术检测植物病原细菌灵敏度的方法”，属于生物技术领域。专用于对病原细菌进行检测。以梨火疫病菌为靶标细菌，包括病植物原细菌特异性抗血清的制备；PCR反应管的包被；PCR反应管的洗涤；样品中目标细菌的吸附；PCR扩增程序。该技术可以稳定地从纯菌、混合菌液和发病样品中扩增出病原细菌的目标片段，排除了样品中PCR抑制物质的干扰，使检测灵敏度(直接检测样品)提高了1000倍。为提高PCR技术检测病原细菌的灵敏度提供了简便、廉价和高效的技术方法。

公开(公告)号：CN104792835B

公开(公告)日：2017-11-14

申请号：CN201510220706.3

申请日：2015-04-28

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘凤权 ,  王利民 ,  程琦

IPC: G01N27/26

Abstract: 本发明涉及一种用于检测有机磷农药杀螟硫磷的电化学方法，其主要的操作步骤包括：(1)提供一个半封闭的电化学反应池，其中包括1根玻碳电极、1根Ag/AgCl参比电极和1根铂丝电极。反应池内包含4mL样品液；(2)在电化学反应池内施加开路电压，维持120秒；(3)在电化学反应池内进行方波扫描，扫描范围(‑0.2V，‑1.0V)，步进电压4mV，振幅25mV，频率25Hz；(4)在电化学反应池内施加同一开路电压，维持240秒；(5)在电化学反应池内进行方波扫描，扫描范围(‑0.6V，0.3V)，步进电压4mV，振幅25mV，频率25Hz。其中，用于杀螟硫磷电化学检测的电化学反应池中含有4mLpH＝5.0的醋酸盐缓冲液；最后一步方波扫描后的氧化峰大小作为样品中杀螟硫磷浓度的定量依据。该方法对杀螟硫磷的检测灵敏度可达到0.04ng/mL。

公开(公告)号：CN103439487B

公开(公告)日：2016-03-23

申请号：CN201310424670.1

申请日：2013-09-18

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘凤权 ,  王利民 ,  蔡佳 ,  方庆奎

IPC: G01N33/531 ,  G01N33/544

Abstract: 本发明设计农药多残留快速检测器具，一种肉眼观察式农药三通道半定量检测试纸条传感器。传感器包括了进样口、盖板、底板以及试纸条区域四个部分。其中试纸条区域有四条独立的传统金标试纸条组成，每根独立的金标试纸条的纤维素膜上均匀地分布着三个农药检测通道，每个通道分别均匀喷上了农药吡虫啉、甲基毒死蜱和水胺硫磷的包被原，各种包被原的浓度按照四根试纸条的顺序依次递减；四根金标试纸条的金标结合垫区域均匀喷射了三种农药的金标抗体的混合物。本发明试纸条具有检测灵敏、快速、简便、直观，对仪器的依赖程度低，并且前处理简便，不需要任何仪器设备，无需专业人员操作。适合现场快速检测的需要。

公开(公告)号：CN103601807B

公开(公告)日：2016-01-20

申请号：CN201310134272.6

申请日：2013-04-18

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘凤权 ,  王利民 ,  方庆奎 ,  华修德

IPC: C07K16/44 ,  C12N5/20 ,  C07C319/20 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及氨基甲酸肟脂类农药丁酮威单克隆抗体的制备方法，属于生物技术领域。专用于特异性识别氨基甲酸肟脂类农药丁酮威单克隆抗体的制备，及其在农产品和农业生产环境中丁酮威残留的高灵敏快速检测。丁酮威半抗原与载体蛋白通过活泼酯法偶联形成完全抗原，用该完全抗原免疫Balb/C鼠，脾细胞和Sp2/0骨髓瘤细胞通过杂交瘤技术制备杂交瘤细胞，获得了稳定分泌抗丁酮威的单克隆抗体。本发明抗体的制备技术可行：抗原的整个制备过程不需要特别的仪器设备，易于规模化生产。