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公开(公告)号:CN114958805A
公开(公告)日:2022-08-30
申请号:CN202210584095.0
申请日:2021-03-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种阿魏酸酯酶及其突变体N.9‑98与应用。所述的阿魏酸酯酶具有如SEQ ID No.3所示的氨基酸序列,其性质稳定,反应pH为6‑8,反应温度为37‑54℃。本发明在所述的阿魏酸酯酶的氨基酸序列的基础上分别通过增加阿魏酸酯酶中二硫键的数量、改变其碳水化合物结合模块的侧链基团以及改变催化结构域电荷,得到了阿魏酸酯酶突变体N.9‑98,与原始阿魏酸酯酶相比,此突变体的比酶活均得到明显提高。本发明得到的阿魏酸酯酶以及突变体性质稳定,有助于阿魏酸酯酶的工业化应用。
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公开(公告)号:CN111748538B
公开(公告)日:2022-05-20
申请号:CN202010347625.0
申请日:2020-04-28
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本申请公开了一种阿魏酸酯酶、突变体和应用,属于生物工程领域。本发明首先利用基因组学技术从厌氧真菌Neocallimastix sp.中成功筛选出一种阿魏酸酯酶基因,根据原核系统密码子使用的偏好性及阿魏酸酯酶基因的GC含量和mRNA的二级结构,对该阿魏酸酯酶基因进行密码子优化,得阿魏酸酯酶基因序列。该酶存在酯酶区和糖苷水解酶11区,对这两个区进行定点突变,得到的突变基因也在大肠杆菌中表达,分离纯化结果显示该阿魏酸酯酶及其突变体都成功地在大肠杆菌中表达,并且突变体的酯酶活性远低于未突变体,丰富了阿魏酸酯酶的菌种来源,在提高饲料纤维的消化率、改善动物生产性能方面具有理论上的指导意义。
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公开(公告)号:CN113088457A
公开(公告)日:2021-07-09
申请号:CN202110369713.5
申请日:2021-04-06
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种新美鞭菌LGM‑ZA7及其在用于发酵秸秆类原料生产乙醇中的应用。所述的新美鞭菌LGM‑ZA7分类命名为Neocallimastix sp.,保藏编号为CGMCC No.17591,最适生长温度为39°C。所述新美鞭菌LGM‑ZA7的发酵菌液与运动发酵单胞菌的发酵菌液混合得到双菌共培养物,能够用于发酵秸秆类原料产乙醇,且使用方法简单,只需将秸秆类原料切碎后与发酵缓冲液混合后杀菌,再加入双菌共培养物厌氧发酵即可得到乙醇,该制备方法工艺程序简单、可操作性强,可显著提高秸秆类原料产乙醇的量及其在总代谢产物中的比例,进而增加秸秆的利用途径和利用率,并为工业化生产乙醇途径提供新的方法。
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公开(公告)号:CN112370440A
公开(公告)日:2021-02-19
申请号:CN202011286783.6
申请日:2020-11-17
Applicant: 南京农业大学
IPC: A61K31/05 , A61K31/216 , C07C67/48 , C07C37/70 , C07C39/06 , C07C69/732 , A23K20/111 , A61P1/12 , A61P31/04 , A61P1/00 , A61P39/06 , A61P29/00
Abstract: 本发明公开了一种百里香‑迷迭香抗腹泻制剂及其制备方法及其应用,该制剂包括浓度比为1~2:1的百里香酚制剂和迷迭香酸制剂,该制剂的制备方法包括以下步骤:(1)利用百里香干叶子通过加压萃取法提取、配制百里香酚制剂;(2)利用迷迭香叶片通过溶剂提取法提取、配制迷迭香酸制剂;(3)将两种制剂混合后涡旋30~60s,然后置于摇床中2~3h,制得百里香‑迷迭香抗腹泻制剂;该制剂作为饲料添加剂应用在饲料中。该制剂、无毒、无耐药性,减少畜禽粪便对环境的污染,具有较强的杀菌能力,抑菌能力更强、体外自由基清除能力显著增强、提高体外发酵参数,促进微生物发酵,能够有效改善肠道微生态平衡,提高机体抵抗力,因此能够添加在饲料中。
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公开(公告)号:CN112263586A
公开(公告)日:2021-01-26
申请号:CN202011284614.9
申请日:2020-11-17
Applicant: 南京农业大学
IPC: A61K31/7048 , A61K31/216 , A61P1/12 , A23K20/121 , A23K20/105 , A23K50/30 , A23K50/60
Abstract: 本发明公开了一种橙皮苷‑迷迭香抗腹泻制剂及其制备方法与应用,该制剂包括浓度比为10~20:1的橙皮苷制剂和迷迭香酸制剂,该制剂的制备方法包括以下步骤:(1)利用陈皮通过热溶剂法提取、配制橙皮苷制剂;(2)利用迷迭香叶片通过溶剂提取法提取、配制迷迭香酸制剂;(3)将两种制剂混合后涡旋30~60s,然后置于摇床中2~3h,制得橙皮苷‑迷迭香抗腹泻制剂;该制剂作为饲料添加剂应用在饲料中。该制剂、无毒、无耐药性,减少畜禽粪便对环境的污染,具有较强的杀菌能力,抑菌能力更强、体外自由基清除能力显著增强、提高体外发酵参数,促进微生物发酵,能够有效改善肠道微生态平衡,提高机体抵抗力,因此能够添加在饲料中。
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公开(公告)号:CN109609415A
公开(公告)日:2019-04-12
申请号:CN201910072411.4
申请日:2019-01-25
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种甲烷菌,其分类命名为甲烷菌(Methanomassiliicoccus sp.),菌株号为LGM-RCC1,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏时间为2018年10月24日,保藏编号为CGMCC No.16819。还公开了甲烷菌在发酵生产甲烷中的应用及其在制备益生菌剂或饲料添加剂中的应用。LGM-RCC1利用氢气还原甲醇、一甲胺、二甲胺、三甲胺和3-甲硫基丙酸甲脂生成甲烷,可作为提高沼气池中甲烷产量的添加剂;LGM-RCC1可利用消化道内的三甲胺,降低其对人体或动物的毒性,LGM-RCC1是一种潜在的治疗这种疾病和预防由氧化三甲胺导致的心血管疾病的益生菌。
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公开(公告)号:CN106366201A
公开(公告)日:2017-02-01
申请号:CN201610835702.0
申请日:2016-09-20
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C07K14/65 , C07K2319/00
Abstract: 本发明公开一种融合蛋白DAMP4-IGF-1的基因序列。本发明还公开一种融合蛋白DAMP4-IGF-1及其制备方法。本发明还公开融合蛋白DAMP4-IGF-1的基因序列的重组表达载体、转基因细胞系统或转基因重组菌。本发明公开一种转基因重组菌。本发明公开一种宿主细胞。本发明公开上述基因序列、上述的重组表达载体、转基因细胞系统或转基因重组菌在生产融合蛋白DAMP4-IGF-1中的应用。本发明利用新型融合标签DAMP4在枯草芽孢杆菌中与IGF-1进行融合表达,利用DAMP4的特殊性质对融合蛋白进行加热纯化。
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公开(公告)号:CN118126987A
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202410355736.4
申请日:2024-03-27
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种阿魏酸酯酶Fae06084及其编码基因和应用。该阿魏酸酯酶的原始编码基因是从新美鞭菌LGM‑ZA7的基因组中筛选得到。为了使该基因能够在异源表达载体中正常表达,本发明对其进行密码子优化后重新合成基因,合成的基因最终被克隆、转化到毕赤酵母(Pichia pastoris)中进行异源表达。表达出来的阿魏酸酯酶的实际分子量约为80 kDa,纯化后的酶表现出显著的阿魏酸酯酶酶活,其以阿魏酸甲酯(methyl ferulate)为底物时的最大催化速率为3.79±0.12 U/mg,具有显著的技术效果,该阿魏酸酯酶具有较好的温度稳定性和pH稳定性,在工业纤维降解复合酶制剂的制备中有很大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN118120852A
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202410355739.8
申请日:2024-03-27
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种阿魏酸酯酶协同枯草芽孢杆菌的饲料添加剂及其应用。该阿魏酸酯酶的原始编码基因是从新美鞭菌LGM‑ZA7的基因组中筛选得到。为了使该基因能够在异源表达载体中正常表达,对其进行密码子优化后重新合成基因,合成的基因最终被克隆、转化到毕赤酵母(Pichia pastoris)中进行异源表达。表达出来的酶的实际分子量约为80 kDa,纯化后的酶表现出显著的阿魏酸酯酶酶活。表达出的阿魏酸酯酶与枯草芽孢杆菌之间存在协同作用,在底物中添加0.3%的阿魏酸酯酶和20×106 CFU/g枯草芽孢杆菌时,可以显著提高体外发酵的产气量和显著降低甲烷气体的百分比。该新型添加剂在反刍动物养殖中有很大的应用潜力。
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