一种基于TTC染色法的高活力酵母细胞定量筛选方法

    公开(公告)号:CN103525896A

    公开(公告)日:2014-01-22

    申请号:CN201310447516.6

    申请日:2013-09-27

    IPC分类号: C12Q1/06

    摘要: 本发明公开了一种基于TTC染色法的高活力酵母细胞定量筛选方法,将待检测酵母细胞菌液涂布于平板,培养待其长出单菌落;然后接种于96孔细胞培养板各孔培养液中,培养至测定得到菌体OD值在1-3之间,离心弃上清;在96孔细胞培养板各孔中加入TTF萃取剂,震荡10-15S后离心;将震荡离心后的上清液吸取到96孔酶标板中,利用酶标仪在486nm波长下测定TTF吸收值,根据TTF标准曲线及测定的细胞OD值,计算每个孔中TTF含量,以此确定细胞活力大小。本方法筛选结果定量可靠地直接反应细胞活力,不仅能明显降低筛选时间,而且能降低操作过程中的视觉判断产生的人为错误。

    一种表达β-半乳糖苷酶的重组菌株及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN102115718A

    公开(公告)日:2011-07-06

    申请号:CN201010591434.5

    申请日:2010-12-16

    摘要: 本发明公开了一种表达β-半乳糖苷酶的重组菌株及其构建方法和应用。克隆得到Thermus thermophilus HB27半乳糖苷酶基因bgal,并将其插入到真核表达载体pPIC9K上,转化毕赤酵母菌株GS 115内,可得到β-半乳糖苷酶表达量达到14000U/ml。β-半乳糖苷酶基因bgal表达的分子量为58Dk,最适温度为70℃,其最适温度下很稳定。在pH6.5时该乳糖酶水解活力最高,而且稳定性较好。高效表达的β-半乳糖苷酶可直接用于乳制品的巴氏消毒法,可以做到灭菌的同时降解乳糖,避免了灭菌后添加酶所造成的二次污染。在60度,30分钟,HB27半乳糖苷酶可以降解牛奶90%的乳糖。

    一种高产瓜氨酸的谷氨酸棒杆菌及其在发酵生产瓜氨酸中的应用

    公开(公告)号:CN105483060B

    公开(公告)日:2018-07-13

    申请号:CN201610032245.1

    申请日:2016-01-19

    IPC分类号: C12N1/20 C12P13/10 C12R1/15

    摘要: 本发明公开了一种高产瓜氨酸的谷氨酸棒杆菌及其在发酵生产瓜氨酸中的应用,所述菌株的分类命名为谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)CIT002,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其保藏编号是CGMCC No.11567。本发明还公开了利用上述高产瓜氨酸的谷氨酸棒杆菌生产瓜氨酸的方法。本发明方法与化学法相比,能耗低,污染小,使用非化石资源作为原料,成本低廉,过程易操控,产量高。本发明菌株与原始菌相比,发酵产物单一,副产物少,产量高。

    一株木质素耐受性酿酒酵母菌及其在生物乙醇生产中的应用

    公开(公告)号:CN104263665B

    公开(公告)日:2017-10-10

    申请号:CN201410489663.4

    申请日:2014-09-23

    CPC分类号: Y02E50/16 Y02E50/17

    摘要: 本发明公开了一株能耐受木质素毒性的酿酒酵母LTY‑1(Saccharomyces cerevisiae LTY‑1),已于2014年5月6日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC),其保藏编号为CCTCC NO:M 2014184。当采用葡萄糖242g/L、蛋白胨10g/L、酵母浸粉61g/L、pH5.5的发酵培养基,在30℃、150rpm条件下发酵36h,酿酒酵母LTY‑1的糖转化率为84.4%。当发酵培养基含有紫丁香醇、对羟基苯甲醛和香草醛等木质素成分,且各成分的浓度均为1.44g/L时,酿酒酵母LTY‑1的糖转化率仅仅降低了7.0%。其降低程度远远小于原始酵母的18.5%。为改善木质纤维素水解液乙醇发酵效率提供了核心技术和材料。本发明技术可应用于木质纤维素为原料的生物乙醇生产,对促进生物乙醇生产的产业化发展、以及环境保护、粮食安全保障具有重要意义。

    一株竹黄菌及其在发酵生产竹红菌素中的应用

    公开(公告)号:CN105925493A

    公开(公告)日:2016-09-07

    申请号:CN201610496366.1

    申请日:2016-06-30

    IPC分类号: C12N1/14 C12P7/26 C12R1/645

    CPC分类号: C12R1/645 C12P7/26

    摘要: 本发明公开了一株竹黄菌及其在发酵生产竹红菌素中的应用,将分别采于安徽黄山地区,浙江衢州地区和四川宜宾地区的竹黄,经分离得到三株竹黄菌,进行基础培养基培养,离子束处理之后,得到一株活力最为旺盛的菌株,其分类命名为竹黄 (Shiraia bambusicola) NJTECH‑1,已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏号为CGMCC NO.11617。本发明得到的竹黄菌,具有很高的代谢活力,发酵生产竹红菌素的产量高。可以应用田间废弃的秸秆和禽畜粪便作为发酵基质,可以减少秸秆焚烧的数量,在节约成本的同时,降低环境污染。

    一种高产瓜氨酸的谷氨酸棒杆菌及其在发酵生产瓜氨酸中的应用

    公开(公告)号:CN105483060A

    公开(公告)日:2016-04-13

    申请号:CN201610032245.1

    申请日:2016-01-19

    IPC分类号: C12N1/20 C12P13/10 C12R1/15

    CPC分类号: C12R1/15 C12P13/10

    摘要: 本发明公开了一种高产瓜氨酸的谷氨酸棒杆菌及其在发酵生产瓜氨酸中的应用,所述菌株的分类命名为谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)CIT002,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其保藏编号是CGMCC No.11567。本发明还公开了利用上述高产瓜氨酸的谷氨酸棒杆菌生产瓜氨酸的方法。本发明方法与化学法相比,能耗低,污染小,使用非化石资源作为原料,成本低廉,过程易操控,产量高。本发明菌株与原始菌相比,发酵产物单一,副产物少,产量高。

    一株木质素耐受性酿酒酵母菌及其在生物乙醇生产中的应用

    公开(公告)号:CN104263665A

    公开(公告)日:2015-01-07

    申请号:CN201410489663.4

    申请日:2014-09-23

    摘要: 本发明公开了一株能耐受木质素毒性的酿酒酵母LTY-1(Saccharomyces cerevisiae LTY-1),已于2014年5月6日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC),其保藏编号为CCTCC NO:M2014184。当采用葡萄糖242g/L、蛋白胨10g/L、酵母浸粉61g/L、pH5.5的发酵培养基,在30℃、150rpm条件下发酵36h,酿酒酵母LTY-1的糖转化率为84.4%。当发酵培养基含有紫丁香醇、对羟基苯甲醛和香草醛等木质素成分,且各成分的浓度均为1.44g/L时,酿酒酵母LTY-1的糖转化率仅仅降低了7.0%。其降低程度远远小于原始酵母的18.5%。为改善木质纤维素水解液乙醇发酵效率提供了核心技术和材料。本发明技术可应用于木质纤维素为原料的生物乙醇生产,对促进生物乙醇生产的产业化发展、以及环境保护、粮食安全保障具有重要意义。