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公开(公告)号：CN103966277B
公开(公告)日：2017-01-18
申请号：CN201410218551.5
申请日：2014-05-22
申请人： 南京工业大学
CPC分类号： Y02P20/588
摘要： 本发明公开了一种固定化磷脂酶D催化制备磷脂酰丝氨酸的方法，该方法包括如下步骤：(1)以甲壳素为载体，以戊二醛为交联试剂，固定游离磷脂酶D得到磷脂酶D的固定化酶；(2)以步骤醋酸丁酯为有机相溶剂，以pH5.5、50mM的醋酸钠缓冲液为水相溶剂，在温度20～60℃条件下，L-丝氨酸与大豆磷脂按摩尔比10～100:1反应制备磷脂酰丝氨酸，反应结束后过滤回收磷脂酶D重复使用。本发明方法在双相催化体系中转酯率达到78％，固定化酶可以重复利用。方法简单，易于操作，制备成本低廉。(1)制备得到的磷脂酶D的固定化酶为催化剂，以
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公开(公告)号：CN104152483A
公开(公告)日：2014-11-19
申请号：CN201410406796.0
申请日：2014-08-19
申请人： 南京工业大学
摘要： 本发明公开了argJ基因在发酵生产L-瓜氨酸中的应用，确定了谷氨酸棒杆菌中瓜氨酸代谢途径上argJ基因编码的N-鸟氨酸乙酰转移酶活性受到瓜氨酸的抑制，分别在谷氨酸棒杆菌、钝齿棒杆菌和北京棒杆菌中过表达argJ基因，可以提高N-鸟氨酸乙酰转移酶的活性，改进瓜氨酸的生成能力。发酵实验表明，棒杆菌中过表达argJ基因后，与原始菌相比，瓜氨酸产量明显提高，且发酵产物单一，副产物少。
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公开(公告)号：CN102559528B
公开(公告)日：2013-08-21
申请号：CN201210029158.2
申请日：2012-02-09
申请人： 南京工业大学
摘要： 本发明公开了一种产甜叶菊糖基转移酶UGT76G1的基因工程菌，它是将UGT76G1编码基因插入PYes2载体的EcoRI和XhoI酶切位点之间，构建了重组质粒，再将重组质粒导入表达宿主酿酒酵母Saccharomyces cerevisiaeYPH499中得到的工程菌；其中，所述的UGT76G1编码基因为GenBank，No.GenBank：AY345974.1，该基因序列命名为UGT。本发明还公开了上述基因工程菌的构建方法及在生产莱鲍迪甙A中的应用。本发明在不外加昂贵UDPG的情况下，以廉价碳源葡萄糖为底物，调节酵母体内UDPG的代谢途径，全细胞催化St甙生成rebaudioside A。
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公开(公告)号：CN103160547A
公开(公告)日：2013-06-19
申请号：CN201310132479.X
申请日：2013-04-17
申请人： 南京工业大学
摘要： 本发明公开了一种氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的醇脱氢酶在4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(R)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中的应用。即以氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的醇脱氢酶为催化剂，以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物，以NADH为辅因子，不对称还原制备(R)-4-氯-3羟基丁酸乙酯。本发明首次将氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的醇脱氢酶应用于4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(R)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中，取得很好的效果，其酶活高达5.6U/mg，其对底物的得率高达94%、产物的对映体过量值为100％，且产量高，大大降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN101613672A
公开(公告)日：2009-12-30
申请号：CN200910183017.4
申请日：2009-08-04
申请人： 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
摘要： 本发明公开了一种不对称转化制备(S)－4－氯－3－羟基丁酸乙酯的重组大肠杆菌，它是导入羰酰还原酶基因和葡萄糖脱氢酶基因的大肠杆菌。本发明还公开了上述重组大肠杆菌的构建方法。利用上述重组大肠杆菌制备(S)－4－氯－3－羟基丁酸乙酯的方法：以4－氯乙酰乙酸乙酯为底物，以葡萄糖为辅助底物，以氧化型辅酶II为辅因子，由上述重组大肠杆菌进行转化反应得到(S)－4－氯－3－羟基丁酸乙酯。本发明构建的重组大肠杆菌中PsCR酶活为18U/mg，BmGDH酶活为9U/mg，避免了添加昂贵的纯酶GDH和辅酶NADPH，只需添加辅酶NADP便可以使得辅酶NADPH高效再生，大大降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN107099487B
公开(公告)日：2020-07-24
申请号：CN201710498622.5
申请日：2017-06-27
申请人： 南京工业大学
摘要： 本发明公开了一种高分泌纳豆激酶枯草芽孢杆菌及其应用，所述菌株的分类命名为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)gs‑11061，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号是CGMCC No.13932。本发明还公开了利用上述高产纳豆激酶的枯草芽孢杆菌生产纳豆激酶的方法。本发明方法与其他发酵方法相比，在发酵方面，该菌可以在高温条件下发酵，同时明显地缩短发酵周期；在培养基成分方面，利用木糖母液粗原料降低成本，能耗低，污染小；与原始菌相比，纳豆激酶的分泌量明显提高，且发酵产物易处理，副产物少。
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公开(公告)号：CN105925493B
公开(公告)日：2019-04-30
申请号：CN201610496366.1
申请日：2016-06-30
申请人： 南京工业大学
摘要： 本发明公开了一株竹黄菌及其在发酵生产竹红菌素中的应用，将分别采于安徽黄山地区，浙江衢州地区和四川宜宾地区的竹黄，经分离得到三株竹黄菌，进行基础培养基培养，离子束处理之后，得到一株活力最为旺盛的菌株，其分类命名为竹黄(Shiraia bambusicola)NJTECH‑1，已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏号为CGMCC NO.11617。本发明得到的竹黄菌，具有很高的代谢活力，发酵生产竹红菌素的产量高。可以应用田间废弃的秸秆和禽畜粪便作为发酵基质，可以减少秸秆焚烧的数量，在节约成本的同时，降低环境污染。
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公开(公告)号：CN103525896B
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201310447516.6
申请日：2013-09-27
申请人： 南京工业大学
IPC分类号： C12Q1/06
摘要： 本发明公开了一种基于TTC染色法的高活力酵母细胞定量筛选方法，将待检测酵母细胞菌液涂布于平板，培养待其长出单菌落；然后接种于96孔细胞培养板各孔培养液中，培养至测定得到菌体OD值在1-3之间，离心弃上清；在96孔细胞培养板各孔中加入TTF萃取剂，震荡10-15S后离心；将震荡离心后的上清液吸取到96孔酶标板中，利用酶标仪在486nm波长下测定TTF吸收值，根据TTF标准曲线及测定的细胞OD值，计算每个孔中TTF含量，以此确定细胞活力大小。本方法筛选结果定量可靠地直接反应细胞活力，不仅能明显降低筛选时间，而且能降低操作过程中的视觉判断产生的人为错误。
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公开(公告)号：CN102286556B
公开(公告)日：2013-08-28
申请号：CN201110225388.1
申请日：2011-08-08
申请人： 南京工业大学
摘要： 本发明公开了一种山梨糖还原酶在生物法制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中的应用。即以氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的山梨糖还原酶为催化剂，以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物，以NADPH为辅因子，不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯。本发明首次将氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的山梨糖还原酶应用于4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中，取得很好的效果，其酶活高达5.6U/mg，其对底物的得率高达90%、产物的对映体过量值为100％，且产量高，大大降低了生产成本。
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