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公开(公告)号：CN109266677B
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN201811009521.8
申请日：2018-08-31
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种酵母双杂交文库构建方法专利申请事宜。该方法用于烟草基因组全长转录因子文库构建，具体包括：转录因子筛选及开放阅读框全长扩增引物设计、制备cDNA模板、PCR扩增、磷酸化处理、连接重组接头、构建全长转录因子的文库质粒、质粒转化并构建文库等步骤。本申请所提供全长转录因子酵母双杂交文库构建方法，是对现有构建方法的进一步综合性改进，具有转录因子阳性筛选率高、筛选准确性高、所构建文库质量高等优点，同时由于对于相关操作步骤有所优化，因而能够节省构建时间和构建成本，因此具有较好的实用价值和推广应用意义。
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公开(公告)号：CN110760520B
公开(公告)日：2021-07-02
申请号：CN201810851446.3
申请日：2018-07-28
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC: C12N15/29 , C12N15/82 , C12N15/66 , C12N5/10 , C07K14/415
Abstract: 本发明涉及调控类黄酮合成的基因及其编码蛋白与应用，属于植物基因工程技术领域。调控类黄酮合成的基因，基因序列如SEQ ID NO:1所示，该基因来源于普通烟草，命名为NtMYB59，NtMYB59基因全长9552bp，包含10个内含子和11个外显子，其编码区全长1251bp。本发明通过基因序列的克隆分析、表达载体的构建以及基因表达检测等技术发现NtMYB59转录因子能够抑制叶片中类黄酮物质的合成，而这种抑制作用是通过抑制NtFLS和NtMYB12基因的表达来实现的。本发明通过改变NtMYB59基因的表达水平能够显著地改变植物叶片中类黄酮物质的含量，为改善作物品质提供理论依据和靶标基因。
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公开(公告)号：CN107345251B
公开(公告)日：2020-10-13
申请号：CN201710556620.7
申请日：2017-07-10
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于鉴定烤烟龙江911的引物组合及试剂盒、应用及鉴定方法，属于生物分子鉴别技术领域。本发明利用烟草420K高密度SNP芯片对近年来我国烟草主栽品种进行全基因组SNP分型，根据品种间多态性SNP位点筛选获得了一套适用于鉴定烤烟龙江911的特异性SNP标记共16个，其物理位置基于栽培烟草品种红花大金元的全基因组序列比对确定，包含SNP位点的基因序列，如SEQ ID NO:1～16所示。针对烤烟龙江911的SNP位点侧翼序列，根据检测方法的不同设计相应引物，可用于龙江911的品种鉴定。本发明基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术建立的龙江911鉴定方法，检测周期短、通量高。
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公开(公告)号：CN111440806A
公开(公告)日：2020-07-24
申请号：CN202010502878.0
申请日：2020-06-04
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/82
Abstract: 本申请属于烟草基因组解析技术领域，具体涉及烟草NtDREB类转录因子及其应用专利申请事宜。烟草NtDREB类转录因子，包括NtDREB-1BL1、NtDREB-1BL2、NtDREB-1BL3三个，相应CDS碱基序列如SEQ ID No.1~3所示。对于现有其他作物中DREB类转录因子功能研究认为，这类转录因子与植物抗逆性紧密关联。而本申请中，发明人通过对烟草中三个NtDREB转录因子功能研究，发现烟草中NtDREB类基因与烟草中色素类物质含量紧密相关，通过调节NtPSY基因表达来实现烟叶中色素类物质含量的同步调整，基于此结果，可为烟草遗传定向改良和烟叶品质提升奠定良好的理论基础和技术基础。
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公开(公告)号：CN111066437A
公开(公告)日：2020-04-28
申请号：CN201911267736.4
申请日：2019-12-11
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
Abstract: 本发明涉及一种用于降低烟叶中氯离子含量的土壤调节液及其施用方法。该用于降低烟叶中氯离子含量的土壤调节液由A液和B液组成，A液为氯离子通道抑制剂溶液，氯离子通道抑制剂溶液中的氯离子通道抑制剂为氯化锌和尼氟灭酸；B液为螯合剂溶液，螯合剂溶液中的螯合剂为谷氨酸二乙酸四钠液。本发明的土壤调节液不仅可以显著降低高氯、中氯、低氯地区的烟叶中氯离子含量，还可以提高烟叶产量，改善烟叶品质。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110777151A
公开(公告)日：2020-02-11
申请号：CN201810850168.X
申请日：2018-07-28
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/82
Abstract: 本发明涉及一种调控类黄酮合成的基因及其编码蛋白与应用，属于植物基因工程技术领域。调控类黄酮合成的基因，序列如SEQ ID NO：1所示，该来源于普通烟草，命名为NtMYB27，NtMYB27基因全长1240bp，包含3个内含子和4个外显子，其编码区全长597bp。本发明通过基因序列的克隆分析、表达载体的构建以及基因表达检测等技术发现NtMYB27转录因子能够抑制叶片中黄酮醇类物质的合成，而这种抑制作用是通过抑制NtFLS和NtCHS基因的表达来实现的。因此，本发明证实NtMYB27是植物黄酮醇合成的负调控因子，当该基因表达受到抑制或者功能缺失时，能显著增加植物叶片中黄酮醇类物质的含量，为后续利用基因编辑技术提升植物黄酮醇含量提供明确的靶标基因。
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公开(公告)号：CN107354206B
公开(公告)日：2019-12-27
申请号：CN201710557631.7
申请日：2017-07-10
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及用于鉴定烤烟南江3号的引物组合及试剂盒、应用及检测方法，属于烟草品种鉴定技术领域。本发明利用烟草420K高密度SNP芯片对近年来我国烟草主栽品种进行全基因组SNP分型，根据品种间多态性SNP位点筛选获得了一套适用于鉴定烤烟南江3号的特异性SNP标记共12个；并对比栽培烟草参考基因组获得的12个SNP位点侧翼序列，其序列如SEQ ID NO:1～12所示，基于该序列设计引物；利用设计的引物，采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对这些位点进行分型检测。根据检测结果获得SNP分型结果，鉴定样品是否为南江3号，本发明的检测方法检测时，需用的检测样品量少，检测通量高，鉴定结果准确。
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公开(公告)号：CN107354200A
公开(公告)日：2017-11-17
申请号：CN201710556624.5
申请日：2017-07-10
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
Abstract: 本发明公开了一种用于鉴定烤烟翠碧1号的引物组合及试剂盒、应用及鉴定方法，属于生物分子鉴别技术领域。本发明利用烟草420K高密度SNP芯片对近年来我国烟草主栽品种进行全基因组SNP分型，根据品种间多态性SNP位点筛选获得了一套适用于鉴定烤烟翠碧1号的特异性SNP标记共12个，其物理位置基于栽培烟草品种红花大金元的全基因组序列比对确定，包含SNP位点的序列如SEQ ID NO:1～12所示。针对烤烟翠碧1号的SNP位点侧翼序列，根据检测方法的不同设计相应引物，可用于烤烟翠碧1号的品种鉴定。本发明基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术建立了一套烤烟翠碧1号鉴定方法，检测周期短、通量高，结果准确。
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公开(公告)号：CN116240225B
公开(公告)日：2025-05-02
申请号：CN202310039140.9
申请日：2023-01-12
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
Abstract: 本发明属于烟草基因工程技术领域，具体涉及系列烟草NtHQT基因及其应用。系列烟草NtHQT基因包括烟草羟基肉桂酰辅酶A奎尼羟基肉桂转移酶NtHQT2基因和NtHQT3基因两个。本申请中，在现有针对烟草NtHQT基因研究基础上，挖掘了两个新的NtHQT2、NtHQT3基因。通过利用基因编辑技术对这两个基因进行沉默和通过对这两个基因进行超表达实验，结果表明，这两个基因表达量与烟叶中绿原酸含量呈现正相关关系。基于这些结果，不仅可为烟草中次生代谢产物调节路径研究奠定一定理论基础，也可为相关植物新品种培育奠定一定技术基础。
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公开(公告)号：CN117025631A
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202311006124.6
申请日：2023-08-10
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H6/82 , A01H5/12
Abstract: 本发明公开烟草萜类物质合成相关转录因子NtGATA8及其编码基因、载体和应用。本发明的烟草萜类物质合成相关转录因子编码基因NtGATA8基因，其核苷酸序列为：(1)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；(2)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经取代和/或缺失和/或添加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白的核苷酸序列。经检测发现，NtGATA8基因能够通过调控NtGGPPS4基因的表达，进一步地调控烟草叶片中萜类物质的合成。过表达该基因，可以降低烟草中萜类物质的含量；而通过沉默的方式降低该基因的表达，可以提高烟草中萜类物质的含量，这为烟叶品质改善、烟草品种遗传改良提供遗传材料和理论依据。
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