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公开(公告)号：CN110156883B
公开(公告)日：2022-12-02
申请号：CN201910415305.1
申请日：2019-05-17
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/82
摘要： 本发明涉及烟草SLs信号转导蛋白NtDAD2及其编码基因，重组表达载体、基因编辑载体及应用，属于植物基因工程技术领域。本发明通过设计特异性引物，克隆获得了烟草SLs信号转导蛋白NtDAD2的编码基因NtDAD2基因。通过实时定量PCR分析发现，正常烟草植株中，NtDAD2基因在花、叶、茎和腋芽中的表达量较高。NtDAD2基因敲除的突变株系，其分枝明显增多，腋芽增长活跃；表明NtDAD2蛋白在烟草生长发育、分枝发育中具有十分重要的作用。因此，可以利用NtDAD2基因对于植物品种进行育种。
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公开(公告)号：CN107354204B
公开(公告)日：2020-10-13
申请号：CN201710557616.2
申请日：2017-07-10
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了一种用于鉴定烤烟龙江981的引物组合及试剂盒、应用及鉴定方法，属于生物分子鉴别技术领域。本发明利用烟草420K高密度SNP芯片对近年来我国烟草主栽品种进行全基因组SNP分型，根据品种间多态性SNP位点筛选获得一套适用于鉴定烤烟龙江981的特异性SNP标记共10个，其物理位置基于栽培烟草品种红花大金元的全基因组序列比对确定，包含SNP位点的基因序列如SEQ ID NO:1～10所示。针对烤烟龙江981的SNP位点侧翼序列，根据检测方法的不同设计相应引物，可用于烤烟龙江981的品种鉴定。本发明基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术建立的烤烟龙江981品种鉴定方法，检测周期短、通量高。
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公开(公告)号：CN110760520A
公开(公告)日：2020-02-07
申请号：CN201810851446.3
申请日：2018-07-28
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： C12N15/29 , C12N15/82 , C12N15/66 , C12N5/10 , C07K14/415
摘要： 本发明涉及调控类黄酮合成的基因及其编码蛋白与应用，属于植物基因工程技术领域。调控类黄酮合成的基因，基因序列如SEQ ID NO:1所示，该基因来源于普通烟草，命名为NtMYB59，NtMYB59基因全长9552bp，包含10个内含子和11个外显子，其编码区全长1251bp。本发明通过基因序列的克隆分析、表达载体的构建以及基因表达检测等技术发现NtMYB59转录因子能够抑制叶片中类黄酮物质的合成，而这种抑制作用是通过抑制NtFLS和NtMYB12基因的表达来实现的。本发明通过改变NtMYB59基因的表达水平能够显著地改变植物叶片中类黄酮物质的含量，为改善作物品质提供理论依据和靶标基因。
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公开(公告)号：CN107354203B
公开(公告)日：2019-12-27
申请号：CN201710557206.8
申请日：2017-07-10
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
摘要： 本发明涉及用于鉴定烤烟毕纳1号的引物组合及试剂盒、应用及检测方法，属于烟草品种鉴定技术领域。本发明利用烟草420K高密度SNP芯片对近年来我国烟草主栽品种进行全基因组SNP分型，根据品种间多态性SNP位点筛选获得了一套适用于鉴定烤烟毕纳1号的特异性SNP标记共15个，并对比栽培烟草参考基因组获得的15个SNP位点侧翼序列，其序列如SEQ ID NO:1～15所示，基于该序列设计引物；利用设计的引物，采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对这些位点进行分型检测。根据检测结果获得SNP分型结果，鉴定样品是否为毕纳1号，本发明的检测方法检测时所需检测样品量少，检测通量高，鉴定结果准确。
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公开(公告)号：CN107354201B
公开(公告)日：2019-12-27
申请号：CN201710556639.1
申请日：2017-07-10
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
摘要： 本发明涉及用于鉴定烤烟云烟97的引物组合及试剂盒、应用及检测方法，属于烟草品种鉴定技术领域。本发明利用烟草420K高密度SNP芯片对近年来我国烟草主栽品种进行全基因组SNP分型，根据品种间多态性SNP位点筛选获得了一套适用于鉴定烤烟云烟97的特异性SNP标记共13个，并对比栽培烟草参考基因组获得的13个SNP位点侧翼序列，SNP位点侧翼序列如SEQ ID NO:1～13所示，基于该序列设计引物；利用设计的引物，采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对这些位点进行分型检测。通过检测获得SNP分型结果，鉴定样品是否为云烟97，本发明的检测方法检测时所需检测样品量少，检测通量高，鉴定结果准确。
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公开(公告)号：CN105385687B
公开(公告)日：2018-06-15
申请号：CN201510989404.2
申请日：2015-12-24
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院 , 郑州大学
IPC分类号： C12N15/11 , C12N15/10 , C12Q1/6895
摘要： 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及烟草26S RNA（26Sribosomal RNA）内参基因的克隆方法及其应用。本发明所获得的26S RNA基因的部分核苷酸序列可作为研究烟草功能基因或不同组织、不同生长发育阶段以及不同激素处理条件下的基因表达分析的内参基因。利用该内参基因设计的实时荧光定量PCR引物扩增特异性强，能够提高烟草基因表达分析研究的稳定性、可靠性和重复性。
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公开(公告)号：CN104782580A
公开(公告)日：2015-07-22
申请号：CN201510205331.3
申请日：2015-04-28
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： A01K67/033
摘要： 本发明公开了一种并行式蚜虫饲养和转移装置和转移装置进行转移、收集蚜虫的方法，包括前后相邻设置的两个结构相同的矩形箱体，每个矩形箱体的顶板均为透明面板，每个矩形箱体的四个侧板均设置有纱网，两个矩形箱体相邻的两个侧板均为滑动侧板，滑动侧板与箱体滑动连接；两个矩形箱体接触面设置有密封装置且两个矩形箱体通过卡接装置连接；两个矩形箱体除相邻的滑动侧板外的一个侧板纱网上均连接有连通装置的一端，连通装置的另一端与蚜虫收集装置连接；蚜虫收集装置的一侧设置有昆虫诱集灯。本发明能够在饲养过程中简单方便地收集蚜虫，既提高了蚜虫收集效率，避免对蚜虫虫体的伤害，还能够在更换活体植物时有效防止蚜虫逃逸，保障了生态安全。
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公开(公告)号：CN104630209A
公开(公告)日：2015-05-20
申请号：CN201510114907.5
申请日：2015-03-17
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： C12N15/10
摘要： 一种无损伤冷抽提小型昆虫基因组DNA的方法，包括以下几个步骤：1）配制基因组DNA提取缓冲液；2）用95%酒精小心清洗昆虫体表的杂质，再用蒸馏水清洗；3）将昆虫放入离心管内，加入3～6倍虫体体积的提取缓冲液，50±5℃水浴； 4）-20℃放置14～17 h，冷抽提基因组DNA；5）加入蛋白酶K，使其终浓度为0.6 mg/mL，50±5℃水浴；6）95℃水浴灭活蛋白酶K；7）将昆虫从离心管中取出，管内溶液即含有该昆虫的基因组DNA。该提取方法不仅能够保持虫体的完整性，而且经过-20℃冷抽提，使昆虫的基因组DNA在低温条件下从虫体内充分释放，避免了基因组DNA的降解，提高了基因组DNA的质量。
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公开(公告)号：CN111499712B
公开(公告)日：2022-07-08
申请号：CN202010499447.3
申请日：2020-06-04
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H5/12 , A01H6/82
摘要： 本申请属于烟草基因组解析技术领域，具体涉及烟草NtDREB类转录因子及其应用专利申请事宜。烟草NtDREB类转录因子，包括NtDREB‑1BL1、NtDREB‑1BL2、NtDREB‑1BL3三个，相应CDS碱基序列如SEQ ID No.1~3所示。对于现有其他作物中DREB类转录因子功能研究认为，这类转录因子与植物抗逆性紧密关联。而本申请中，发明人通过对烟草中三个NtDREB转录因子功能研究，发现烟草中NtDREB类基因与烟草中色素类物质含量紧密相关，通过调节NtPSY基因表达来实现烟叶中色素类物质含量的同步调整，基于此结果，可为烟草遗传定向改良和烟叶品质提升奠定良好的理论基础和技术基础。
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公开(公告)号：CN114672494A
公开(公告)日：2022-06-28
申请号：CN202210206578.7
申请日：2022-03-04
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一个烟草NtEXB1基因在植株分枝发育调控中应用专利申请事宜。烟草NtEXB1基因与腋芽处分枝发育相关，具有增加或者减少植物分枝的作用，用于植物株型调控；烟草NtEXB1基因序列如SEQ ID No.1所示。本申请中，通过对该基因组织表达特点研究，发明人发现：烟草NtEXB1基因在雌蕊处表达量最高，同时在腋芽中有相对较高的表达量，而在顶芽中表达量最低。进一步对该基因沉默后植株表型研究后发现，通过降低NtEXB1基因表达量后，烟草腋芽发育速度明显变缓。基于这些结果，可为针对性培育合适植株株型新品种奠定一定理论基础和技术基础。
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