-
公开(公告)号：CN106706911A
公开(公告)日：2017-05-24
申请号：CN201611055892.0
申请日：2016-11-25
申请人： 云南中烟工业有限责任公司
IPC分类号： G01N33/573
CPC分类号： G01N33/573
摘要： 本发明公开一种检测口含烟制品对细胞过氧化氢酶酶活力影响的方法，包括以下步骤：(1)受试物的前处理；(2)人口腔角质细胞单细胞悬浮液的制备；(3)人口腔角质细胞单细胞悬浮液的细胞浓度的计算；(4)人口腔角质细胞单细胞悬浮液的细胞接种；(5)受试物的分组；(6)受试物检测剂量的设定；(7)受试物培养品的制备；(8)受试物的孵育；(9)受试物孵育品的收集；(10)受试物孵育品的裂解离心；(11)标准曲线的测定；(12)受试物孵育品的测定；(13)蛋白浓度测定；(14)过氧化氢酶酶活力计算。本发明方法能够准确有效的检测口含烟制品对细胞过氧化氢酶酶活力影响的方法。
-
公开(公告)号：CN106591413A
公开(公告)日：2017-04-26
申请号：CN201611056864.0
申请日：2016-11-25
申请人： 云南中烟工业有限责任公司
IPC分类号： C12Q1/02
CPC分类号： G01N33/5026
摘要： 本发明公开一种检测卷烟烟气总粒相物对细胞早期凋亡影响的方法，包括以下步骤：(1)受试物的前处理；(2)人肺成纤维细胞单细胞悬浮液的制备；(3)人肺成纤维细胞单细胞悬浮液的细胞浓度的计算；(4)人肺成纤维细胞单细胞悬浮液的细胞接种；(5)受试物的分组；(6)受试物检测剂量的设定；(7)受试物培养品的制备；(8)受试物的孵育；(9)受试物孵育品的收集；(10)细胞早期凋亡影响率的计算。本发明对样品检测剂量的优化设定以及靶细胞的正确选择，使得本方法能够准确有效的检测卷烟烟气总粒相物对细胞早期凋亡的影响。作为卷烟烟气总粒相物细胞毒性检测的补充方法以区别制品对细胞坏死和凋亡的影响。
-
公开(公告)号：CN106556691A
公开(公告)日：2017-04-05
申请号：CN201611055893.5
申请日：2016-11-25
申请人： 云南中烟工业有限责任公司
CPC分类号： G01N33/5008 , G01N21/31
摘要： 本发明公开一种检测电子烟制品对细胞过氧化氢酶酶活力影响的方法，包括如下步骤：受试物前处理、人肺成纤维细胞单细胞悬液的制备、人肺成纤维细胞细胞浓度计算、人肺成纤维细胞细胞接种、受试物分组、受试物孵育、受试物孵育品收集、受试物孵育品的裂解离心、标准曲线的测定、受试物孵育品的测定、蛋白浓度测定和过氧化氢酶酶活力计算等步骤。本发明对样品的有效处理、检测剂量的优化设定以及靶细胞的正确选择，使得本方法能够准确有效的检测电子烟制品对细胞过氧化氢酶酶活力影响的方法。
-
公开(公告)号：CN106367468A
公开(公告)日：2017-02-01
申请号：CN201610729383.5
申请日：2016-08-26
申请人： 云南中烟工业有限责任公司
IPC分类号： C12Q1/02
摘要： 本发明公开了一种检测胶基型烟草制品对人口腔细胞γH2AX水平影响的方法，包括以下步骤：(1)将待测的所述胶基型烟草制品置于液氮中冷冻；(2)将所述胶基型烟草制品立即用粉碎机将其粉碎；(3)再次将碎末胶基型烟草制品置于液氮中冷冻；(4)将碎末胶基型烟草制品用人工唾液浸泡；(5)将提取液离心分离；(6)用渗透压测定仪测定上层清液，调节其渗透压与细胞培养基一致；(7)测定提取液中的烟碱含量；(8)培养人口腔黏膜上皮细胞作为检测对象；(9)将胶基型烟草制品提取液加入到培养好的人口腔黏膜上皮细胞中；(10)经过4小时的培育后，用高内涵成像仪检测细胞γH2AX变化情况。
-
公开(公告)号：CN104122189B
公开(公告)日：2017-01-25
申请号：CN201410386232.5
申请日：2014-08-07
申请人： 云南中烟工业有限责任公司
摘要： 本发明是一种检测卷烟主流烟气总粒相物的体外细胞微核方法。该方法是将细胞种植在96孔板上进行卷烟烟气染毒后直接固定、染色、上高内涵成像系统进行检测。根据细胞核的荧光值与背景荧光值之差设置细胞主核及微核荧光强度参数，测量细胞主核及微核的大小设置核直径参数，根据细胞核之间的距离设置距离参数。根据以上设定对图片进行分析，在结果导出栏选择具有微核的双核细胞数及双核细胞总数，从而计算出微核率。本方法需要的细胞量少，不需要消化细胞和制作微核片，并且检测速度快，样本量大、准确率高。
-
公开(公告)号：CN106244663A
公开(公告)日：2016-12-21
申请号：CN201610728636.7
申请日：2016-08-26
申请人： 云南中烟工业有限责任公司
IPC分类号： C12Q1/02
摘要： 本发明公开一种检测胶基型烟草制品对人口腔细胞凋亡影响的方法，包括以下步骤：(1)将待测的所述胶基型烟草制品置于液氮中冷冻；粉碎；(3)再次将碎末胶基型烟草制品置于液氮中冷冻；(4)将碎末胶基型烟草制品用人工唾液浸泡；(5)将提取液离心分离；(6)用渗透压测定仪测定上层清液，调节其渗透压与细胞培养基一致；(7)测定提取液中的烟碱含量；(8)培养人口腔黏膜上皮细胞作为检测对象；(9)将胶基型烟草制品提取液加入到培养好的人口腔黏膜上皮细胞中；(10)经过不超过于24小时的培育后，用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。(2)将冷冻的胶基型烟草制品立即用粉碎机将其
-
公开(公告)号：CN106222234A
公开(公告)日：2016-12-14
申请号：CN201610726375.5
申请日：2016-08-26
申请人： 云南中烟工业有限责任公司
IPC分类号： C12Q1/02
摘要： 本发明公开了一种检测胶基型烟草制品对人口腔微生物体外影响的方法，包括以下步骤：将胶基型烟草制品用粉碎机将其粉碎；(3)再次将碎末胶基型烟草制品冷冻；(4)将碎末胶基型烟草制品用人工唾液浸泡；(5)将提取液离心分离；(6)用渗透压测定仪测定；(7)测定提取液中的烟碱含量；(8)体外培养人口腔微生物；(9)将胶基型烟草制品提取液加入到培养好的人口腔微生物中；(10)查看生长情况并进行菌落计数。(1)将待测的胶基型烟草制品于液氮中冷冻；(2)
-
公开(公告)号：CN106191120A
公开(公告)日：2016-12-07
申请号：CN201610629219.7
申请日：2016-08-03
申请人： 云南中烟工业有限责任公司
IPC分类号： C12N15/867 , C12N15/66 , C12N7/01
CPC分类号： C12N15/86 , C12N7/00 , C12N15/66 , C12N2740/15021 , C12N2740/15043
摘要： 本发明涉及一种高效介导T1R3基因过表达的慢病毒载体和慢病毒及其构建方法，属于分子生物学技术领域。本发明通过基因重组技术，以pCDH-CMV-EF1-PURO慢病毒表达载体为基础进行构建，并整合有T1R3基因，得到T1R3基因过表达慢病毒载体pCDH-CMV-EF1-PURO-T1R3。使用慢病毒包装质粒pLP/VSVG、pLP1和pLP2对T1R3基因过表达慢病毒载体pCDH-CMV-EF1-PURO-T1R3进行包装，通过转染HEK293细胞，得到T1R3慢病毒。本发明所构建的T1R3基因过表达慢病毒载体对宿主细胞的转染效率高，能特异、持续、高效地促进T1R3基因在宿主细胞中的稳定表达。
-
公开(公告)号：CN105018346A
公开(公告)日：2015-11-04
申请号：CN201510430876.4
申请日：2015-07-21
申请人： 云南中烟工业有限责任公司
摘要： 本发明涉及一种用于冻存固体培养丝状真菌的空心罩及冻存方法，属菌种保藏技术研究领域。本发明是在现有固体培养丝状真菌的冻存方法基础上的改进。改进点在于：采用直径大小在3mm～6mm之间、罩面布满棘刺的空心罩与待保藏丝状真菌在固体培养基表面共培养，至丝状真菌生长覆盖空心罩的罩面，将覆盖待保藏丝状真菌的空心罩移至冻存液中完成菌种冻存。本发明的罩面布满棘刺的空心罩按常规方法用树脂材料制成。本发明的有益效果在于：有效避免了菌块对固体培养基的携带和制备菌悬液可能带来的污染，具有操作方便，成本低廉，且能够满足特殊培养要求的优点，为丝状真菌的保藏提供技术支持。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
搜索结果
184 条记录 (耗时 0.047 秒)
