一种高效简易的ADP配基层析介质的保护方法

    公开(公告)号:CN108607237A

    公开(公告)日:2018-10-02

    申请号:CN201810439990.7

    申请日:2018-05-03

    IPC分类号: B01D15/08 B01D15/20

    CPC分类号: B01D15/08 B01D15/20

    摘要: 本发明属于亲和层析技术领域,提供一种高效简易的ADP配基层析介质的保护方法。向黄素蛋白TrxR粗酶液中加入螯合剂,螯合粗酶液中的Mg2+,抑制DNase活性,保护ADP配基。用TE缓冲液平衡2’5’ADP Sepharose亲和层析柱,将含有螯合剂的TrxR粗酶液加入柱子中使TrxR与ADP配基结合,采用TE缓冲液清洗非特异性结合在柱子上的杂蛋白,再采用TE+0.5M NaCl洗脱与ADP配基结合的TrxR,用再生缓冲液处理对柱子进行再生后,立即用TE缓冲液平衡再生后的柱子。本发明操作方法简单、螯合剂廉价易得,经济成本低;对ADP配基保护作用显著,实用性强。

    一种提高硒蛋白TrxR表达的方法

    公开(公告)号:CN108546688A

    公开(公告)日:2018-09-18

    申请号:CN201810316669.X

    申请日:2018-04-08

    IPC分类号: C12N9/02

    摘要: 一种提高硒蛋白TrxR表达的方法,属于蛋白原核表达技术领域。在TrxR的原核表达过程中,首先在37℃、220rpm条件下培养表达菌株至对数生长末期。然后向培养基中加入L-半胱氨酸、亚硒酸钠、异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)和Mn2+、Ca2+、Mg2+等二价金属离子,转入24℃、220rpm诱导表达24小时。Mn2+、Ca2+、Mg2+等二价金属离子的添加提高了TrxR的表达。本发明方法简便、原料易得、成本低廉,明显的提高了TrxR的表达,具有较高的利用价值。

    一种模拟脑缺血再灌注病理模型的芯片

    公开(公告)号:CN111621419B

    公开(公告)日:2022-05-17

    申请号:CN202010452500.4

    申请日:2020-05-26

    摘要: 一种模拟脑缺血再灌注病理模型的芯片,属于微流控技术领域。主要包括四层,第一层为培养液以及接种细胞入口,第二层与二三层芯片之间的多孔膜共同模拟的是血脑屏障系统,每层芯片上都设有液体流入或流出的通道,第三层芯片与三四层芯片之间的多孔膜共同模拟脑组织功能单元,芯片上同样有液体流入或者流出的通道,第四层芯片为培养液出口,此外,二三层芯片以及三四层芯片之间设有细微孔道。本发明具备多细胞共培养能力,通过多孔膜和培养孔设计能够实现多细胞间通过培养液流动的细胞间不接触的信息交流,进而模拟人脑缺糖缺氧过程进而模拟人脑缺血过程、脑缺血后的再灌注。

    一种改善黄素蛋白TrxR纯化的方法

    公开(公告)号:CN108611330B

    公开(公告)日:2022-02-01

    申请号:CN201810440050.X

    申请日:2018-05-03

    IPC分类号: C12N9/02

    摘要: 一种改善黄素蛋白纯化的方法属于蛋白纯化技术领域。包括:以含有黄素蛋白TrxR的大肠杆菌为原材料,加入TE buffer使菌体充分混匀,再加入溶菌酶37℃作用0.5‑1h,充分破碎细胞得到混合液A,破碎其中核酸,对混合液A进行离心处理得到含有黄素蛋白TrxR的上清液B。将EDTA加入到上清液B中,再将上清液B加入ADP Sepharose亲和层析柱中,洗脱柱子收集洗脱液C,对洗脱液C离心浓缩得浓缩液D。对浓缩液D进行凝胶过滤,收集过滤组分得到纯黄素蛋白TrxR。本发明简化了黄素蛋白TrxR纯化方法,方法简单,成本低廉,纯化效果较好;EDTA能够保护ADP Sepharose亲和层析配基;具有较高的利用价值。

    一种快速检测微生物CO2呼吸率的凝胶试纸及其使用方法

    公开(公告)号:CN110412239B

    公开(公告)日:2021-08-10

    申请号:CN201810409989.X

    申请日:2018-04-27

    IPC分类号: G01N33/24

    摘要: 一种快速检测微生物CO2呼吸率的凝胶试纸及其使用方法,属于环境化学与微生物学领域。该凝胶试纸的主要成分包含NaOH碱、酸碱指示剂、甘油和琼脂等,采用高量程和低量程两种测试范围,可以针对环境介质中的堆肥土壤样品进行CO2呼吸率检测。凝胶试纸的结果可读性高,通过与黄、橙、红、深红和紫五种颜色指示卡比较,可以迅速鉴定堆肥或土壤的呼吸作用,还可以指示堆肥五个水平的微生物活力或腐熟阶段。本发明试纸的灵敏度好、准确性高,高量程试纸的颜色变化范围匹配1‑50mg的CO2呼吸率,低量程试纸的颜色变化范围匹配0.1‑5mg的CO2呼吸率;使用方法简便快速,可以在30分钟时间内完成样品检测,且无需高价检测仪器。

    一种葡萄多酚的树脂分离纯化方法

    公开(公告)号:CN110520435A

    公开(公告)日:2019-11-29

    申请号:CN201980001691.8

    申请日:2019-07-01

    IPC分类号: C07G99/00

    摘要: 一种葡萄多酚的树脂分离纯化方法,属于食品工业技术领域。该方法首先使用碱溶液浸提酒泥获得多酚碱提液,随后通过利用NKA-9型或HPD600型大孔树脂,吸附碱提液中的多酚成分,最后用乙醇洗脱,回收葡萄多酚。本发明充分利用葡萄酿酒过程中产生的废弃物(葡萄酒泥),有利于酿酒产业废弃物资源的充分利用。提取方法条件温和,提取效率高,通过减少多酚的提取步骤和时间,降低了多酚在空气中暴露的时间和频率,保护了多酚成分的还原活性。树脂材料经再生后可重复利用,降低提取成本。另外,浸提过程中只使用低浓度的NaOH溶液,不使用其他有机溶剂、无机酸或护色剂等,同时多酚吸附纯化过程只使用乙醇,所以本方法是一种安全环保高效的酒泥多酚类成分的提取方法。

    一种ADP配基层析介质的保护方法

    公开(公告)号:CN108607237B

    公开(公告)日:2019-06-21

    申请号:CN201810439990.7

    申请日:2018-05-03

    IPC分类号: B01D15/08 B01D15/20

    摘要: 本发明属于亲和层析技术领域,提供一种ADP配基层析介质的保护方法。向硫氧还蛋白还原酶TrxR粗酶液中加入螯合剂,螯合粗酶液中的Mg2+,抑制DNase活性,保护ADP配基。用TE缓冲液平衡2’5’ADP Sepharose亲和层析柱,将含有螯合剂的TrxR粗酶液加入柱子中使TrxR与ADP配基结合,采用TE缓冲液清洗非特异性结合在柱子上的杂蛋白,再采用TE+0.5M NaCl洗脱与ADP配基结合的TrxR,用再生缓冲液处理对柱子进行再生后,立即用TE缓冲液平衡再生后的柱子。本发明操作方法简单、螯合剂廉价易得,经济成本低;对ADP配基保护作用显著,实用性强。