使用外源单链RNA在黑曲霉休眠孢子中表达蛋白质的方法

    公开(公告)号:CN106244630A

    公开(公告)日:2016-12-21

    申请号:CN201610812864.2

    申请日:2016-09-09

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 林峻

    CPC classification number: C12N15/87 C12R1/685

    Abstract: 本发明公开了一种使用外源单链RNA在黑曲霉休眠孢子中表达蛋白质的方法,包括黑曲霉培养和孢子收集、黑曲霉孢子预处理以及使用HDEN法电击黑曲霉孢子三个步骤,该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤,采用HDEN电转化技术,将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜,在黑曲霉休眠孢子内表达蛋白质。本发明方法步骤简便快速,效果极佳,转化率达到90%以上。

    一种递送外源DNA进入总状毛霉未萌发孢子的方法

    公开(公告)号:CN106244617A

    公开(公告)日:2016-12-21

    申请号:CN201610812885.4

    申请日:2016-09-09

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 林峻

    CPC classification number: C12N15/80 C12N2800/10

    Abstract: 本发明公开了一种递送外源DNA进入总状毛霉未萌发孢子的方法,包括总状毛霉培养和孢子收集、总状毛霉孢子预处理以及使用HDEN法电击总状毛霉孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的总状毛霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料,并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入总状毛霉休眠孢子,可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤,省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等,并且转化率高,每个转化反应体系,至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。

    一种对黄曲霉休眠孢子转化外源DNA的方法

    公开(公告)号:CN106148385A

    公开(公告)日:2016-11-23

    申请号:CN201610812871.2

    申请日:2016-09-09

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 林峻

    CPC classification number: C12N15/80 C12N2800/10

    Abstract: 本发明公开了一种对黄曲霉休眠孢子转化外源DNA的方法,包括黄曲霉培养和孢子收集、黄曲霉孢子预处理以及使用HDEN法电击黄曲霉孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的黄曲霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料,并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入黄曲霉休眠孢子,可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤,省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等,并且转化率高,每个转化反应体系,至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。

    不依赖介质直接转化外源DNA进入里氏木霉休眠孢子的方法

    公开(公告)号:CN106148383A

    公开(公告)日:2016-11-23

    申请号:CN201610812825.2

    申请日:2016-09-09

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 林峻

    CPC classification number: C12N15/80

    Abstract: 本发明公开了一种不依赖介质直接转化外源DNA进入里氏木霉休眠孢子的方法,包括里氏木霉培养和孢子收集、里氏木霉孢子预处理以及使用HDEN法电击里氏木霉孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的里氏木霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料,并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入里氏木霉休眠孢子,可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤,省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等,并且转化率高,每个转化反应体系,至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。

    一种梅花鹿过氧化氢酶及其制备方法

    公开(公告)号:CN103060344A

    公开(公告)日:2013-04-24

    申请号:CN201310031803.9

    申请日:2013-01-29

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 林峻

    Abstract: 本发明提供了一种梅花鹿过氧化氢酶及其制备方法,本发明提供的梅花鹿过氧化氢酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,梅花鹿过氧化氢酶基因的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明成功克隆得到此前未见报道的梅花鹿过氧化氢酶基因序列。通过序列比对,可以知道,梅花鹿过氧化氢酶基因在哺乳动物中是高度保守的,通过生物信息学分析,可知该基因长度适中,带有典型的过氧化氢酶结构域,对应的蛋白质序列具有较好的亲水性,适合异源重组蛋白表达,之后采用毕赤酵母表达系统,成功实现了该基因的重组表达。梅花鹿过氧化氢酶的获得无论是在工业化应用领域,还是探究其药理价值,都具有重要意义。

    克氏葡萄球菌在鼻咽癌诊疗中的应用

    公开(公告)号:CN118745480A

    公开(公告)日:2024-10-08

    申请号:CN202411083056.8

    申请日:2024-08-08

    Abstract: 本发明涉及生物医药领域,尤其涉及克氏葡萄球菌(Staphylococcus kloosii)在鼻咽癌诊疗中的应用。通过对健康人和鼻咽癌患者的鼻腔灌洗液样本中微生物丰度的差异比较分析发现,相较于健康人,克氏葡萄球菌(Staphylococcus kloosii)在鼻咽癌患者中显著富集;ROC曲线分析显示,克氏葡萄球菌(Staphylococcus kloosii)鉴别健康人与鼻咽癌患者的效能AUC=0.6609,灵敏度为52.17%,特异度为100%;将从鼻咽癌患者的鼻腔灌洗液样本中分离的克氏葡萄球菌(Staphylococcus cohnii)与鼻咽癌细胞共培养,结果显示,克氏葡萄球菌(Staphylococcus kloosii)能够显著促进鼻咽癌细胞的增殖与迁移。

    一种分子检测冠状病毒的一步法试剂盒

    公开(公告)号:CN111876523A

    公开(公告)日:2020-11-03

    申请号:CN202010041731.6

    申请日:2020-01-15

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 林峻

    Abstract: 本发明公开了一种分子检测冠状病毒的一步法试剂盒,所述试剂盒包括1)2X RT-qPCR mix;2)上游引物detF;3)下游引物detR;4)探针probe;5)阳性质控品;6)阴性质控品。本发明设计的引物、探针、搭配市售的一步法RT-qPCR试剂,做出的冠状病毒检测试剂盒,抗人类核酸的干扰能力强。本发明操作简单,耗时短,检测特异性好,灵敏度高,稳定性好,抗来自病毒宿主核酸干扰的能力强,可广泛应用于冠状病毒的早期筛查,口岸检验检疫,疫情控制和科学研究等多个领域。

    一种递送外源DNA进入烟曲霉未萌发孢子的方法

    公开(公告)号:CN106381306A

    公开(公告)日:2017-02-08

    申请号:CN201610812887.3

    申请日:2016-09-09

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 林峻

    CPC classification number: C12N15/80 C12N2800/10

    Abstract: 本发明公开了一种递送外源DNA进入烟曲霉未萌发孢子的方法,包括烟曲霉培养和孢子收集、烟曲霉孢子预处理以及使用HDEN法电击烟曲霉孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的烟曲霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料,并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入烟曲霉休眠孢子,可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤,省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等,并且转化率高,每个转化反应体系,至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。

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