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公开(公告)号：CN109136252A
公开(公告)日：2019-01-04
申请号：CN201810968449.5
申请日：2018-08-23
申请人： 中国农业科学院饲料研究所
CPC分类号： C12N15/80 , C12N15/113 , C12N2800/10
摘要： 本发明属于农业生物技术领域，具体涉及用于改变里氏木霉菌丝形态的重组表达载体及其应用。本发明构建含有barA1基因和/或barA2基因的重组表达载体，并用其转化里氏木霉，得到菌性形态改变的重组里氏木霉，进而提高了里氏木霉的蛋白表达量和纤维素酶酶活。
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公开(公告)号：CN106755051A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611194878.9
申请日：2016-12-22
申请人： 中国农业大学烟台研究院 , 青岛农业大学
CPC分类号： C12N15/79 , A01H13/00 , C12N5/04 , C12N2510/00 , C12N2800/10
摘要： 本发明涉及一种抗除草剂海带孢子体及其制备方法和应用，制备步骤为：制备海带雌配子体细胞团；质粒pBA002‑Bar的DNA的提取；海带雌配子体细胞团的轰击；共培养与基因转化；抗除草剂海带孢子体的获得；此外还包括利用抗除草剂海带孢子体培育抗除草剂的海带幼小种苗。通过本发明获得了具有抗除草剂的海带孢子体细胞，进一步培养获得了稳定发育的、具有抗除草剂基因的幼小种苗。本发明可以保持海带孢子体细胞无性繁殖的遗传稳定性。
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公开(公告)号：CN106520824A
公开(公告)日：2017-03-22
申请号：CN201610872349.3
申请日：2016-09-30
申请人： 北京大北农科技集团股份有限公司 , 北京大北农生物技术有限公司
CPC分类号： C12N15/8202 , C12N2800/10 , C12N2800/80
摘要： 本发明涉及一种多靶点编辑系统及其用途，所述多靶点编辑系统，包括a)和b)：a)Csy4蛋白和Cas9蛋白；b)由Csy4切割识别序列间隔串联两个或两个以上sgRNA。本发明首次将Csy4蛋白及其对应识别序列应用于CRISPR/Cas9系统中，利用Csy4蛋白能够切割并识别对应的RNA序列，使得多个sgRNA在同一个表达盒中同时转录后，可以被切割成独立的片段，实现对基因组的多靶点编辑；同时单靶点的切割效率相比现有技术tRNA剪切系统明显提高，且对由多靶点切割引起的片段缺失效率也较tRNA剪切系统高。
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公开(公告)号：CN106244620A
公开(公告)日：2016-12-21
申请号：CN201610813630.X
申请日：2016-09-09
申请人： 福州大学
发明人： 林峻
CPC分类号： C12N15/80 , C12R1/685 , C12N2800/10
摘要： 本发明公开了不依赖介质直接转化外源DNA进入黑曲霉休眠孢子的方法，包括黑曲霉培养和孢子收集、黑曲霉孢子预处理以及使用HDEN法电击黑曲霉孢子三个步骤，得到导入待转化质粒的黑曲霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料，并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入黑曲霉休眠孢子，可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤，省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等，并且转化率高，每个转化反应体系，至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。
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公开(公告)号：CN105838629A
公开(公告)日：2016-08-10
申请号：CN201610322289.8
申请日：2016-05-16
申请人： 江西省农业科学院蔬菜花卉研究所
CPC分类号： C12R1/645 , C12N15/65 , C12N15/80 , C12N2800/10
摘要： 本发明提供PEG介导芦笋茎枯病菌原生质体的遗传转化方法，包括芦笋茎枯病菌原生质体的制备、原生质体的遗传转化以及遗传转化子的筛选等步骤。本发明成功实现了PEG介导芦笋茎枯病菌原生质体的遗传转化，首次构建了一套针对该病原菌的高效遗传转化体系，获得大量能够多代稳定遗传的遗传转化子。该方法操作简单、转化周期短、可重复性强、转化效率高、稳定性好。本发明提供的方法是推动芦笋茎枯病病害分子生物学研究的重要技术创新，为该病害致病机制及抗病研究提供了一种重要手段。
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公开(公告)号：CN103145835B
公开(公告)日：2014-10-29
申请号：CN201310050937.5
申请日：2009-07-17
申请人： 协和发酵麒麟株式会社
IPC分类号： C07K16/18 , C12N15/13 , C12N15/63 , C12N5/20 , C12P21/08 , C12P21/00 , A61K39/395 , A61P35/00 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
CPC分类号： C07K16/28 , A61K39/39533 , A61K2039/505 , C07H21/04 , C07K16/30 , C07K2317/14 , C07K2317/21 , C07K2317/24 , C07K2317/33 , C07K2317/34 , C07K2317/54 , C07K2317/55 , C07K2317/56 , C07K2317/565 , C07K2317/622 , C07K2317/624 , C07K2317/626 , C07K2317/73 , C07K2317/732 , C07K2317/734 , C12N5/12 , C12N15/09 , C12N15/63 , C12N2800/10 , G01N33/574 , G01N33/6872 , G01N33/6893
摘要： 本发明公开了单克隆抗体或其抗体片段，所述单克隆抗体特异性识别ASC氨基酸转运蛋白2系统(ASCT2)的细胞外区域的天然结构并与该细胞外区域结合；能够产生所述抗体的杂交瘤；编码所述抗体的DNA；携带所述DNA的载体；通过导入所述载体产生的转化体；利用所述杂交瘤或转化体生产抗体或其抗体片段的方法；和包含所述抗体或其抗体片段的治疗药，以及包含所述抗体或其抗体片段的诊断试剂。
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公开(公告)号：CN103172735A
公开(公告)日：2013-06-26
申请号：CN201310050862.0
申请日：2009-07-17
申请人： 协和发酵麒麟株式会社
IPC分类号： C07K16/18 , C12N15/13 , C12N15/63 , C12N5/20 , C12P21/08 , C12P21/00 , A61K39/395 , A61P35/00 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
CPC分类号： C07K16/28 , A61K39/39533 , A61K2039/505 , C07H21/04 , C07K16/30 , C07K2317/14 , C07K2317/21 , C07K2317/24 , C07K2317/33 , C07K2317/34 , C07K2317/54 , C07K2317/55 , C07K2317/56 , C07K2317/565 , C07K2317/622 , C07K2317/624 , C07K2317/626 , C07K2317/73 , C07K2317/732 , C07K2317/734 , C12N5/12 , C12N15/09 , C12N15/63 , C12N2800/10 , G01N33/574 , G01N33/6872 , G01N33/6893
摘要： 本发明公开了单克隆抗体或其抗体片段，所述单克隆抗体特异性识别ASC氨基酸转运蛋白2系统(ASCT2)的细胞外区域的天然结构并与该细胞外区域结合；能够产生所述抗体的杂交瘤；编码所述抗体的DNA；携带所述DNA的载体；通过导入所述载体产生的转化体；利用所述杂交瘤或转化体生产抗体或其抗体片段的方法；和包含所述抗体或其抗体片段的治疗药，以及包含所述抗体或其抗体片段的诊断试剂。
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公开(公告)号：CN106381305A
公开(公告)日：2017-02-08
申请号：CN201610812886.9
申请日：2016-09-09
申请人： 福州大学
发明人： 林峻
CPC分类号： C12N15/80 , C12N2800/10
摘要： 本发明公开了转化外源ssRNA到米根霉休眠孢子中并表达蛋白质的方法，包括米根霉培养和孢子收集、米根霉孢子预处理以及使用HDEN法电击米根霉孢子三个步骤，该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤，采用HDEN电转化技术，将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜，在米根霉休眠孢子内表达蛋白质。本发明方法步骤简便快速，效果极佳，转化率达到90%以上。
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公开(公告)号：CN106381304A
公开(公告)日：2017-02-08
申请号：CN201610812881.6
申请日：2016-09-09
申请人： 福州大学
发明人： 林峻
CPC分类号： C12N15/80 , C12N2800/10
摘要： 本发明公开了一种使用外源单链RNA在米曲霉休眠孢子中表达蛋白质的方法，包括米曲霉培养和孢子收集、米曲霉孢子预处理以及使用HDEN法电击米曲霉孢子三个步骤，该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤，采用HDEN电转化技术，将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜，在米曲霉休眠孢子内表达蛋白质。本发明方法步骤简便快速，效果极佳，转化率达到90%以上。
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公开(公告)号：CN105861485A
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201610248628.2
申请日：2016-04-20
申请人： 上海伊丽萨生物科技有限公司
发明人： 不公告发明人
CPC分类号： C12N15/09 , C12N15/63 , C12N2310/16 , C12N2800/10
摘要： 本发明属于生物医学领域，涉及一种利用Cas9核酸酶的aptamer提高基因置换效率的方法，包括以下步骤：(1)双功能DNA单链的合成：合成具有Cas9特异结合能力的aptamer和DNA供体的序列；所述aptamer序列为：5′?AGTCCATGGTAAACCCACCTTGGGGT?GACT?3′；(2)质粒的制备：构建Cas9?gRNA质粒，使其能表达Cas9蛋白和转录靶位点附近的gRNA；(3)把所得双功能DNA单链与质粒共转染到要进行基因置换的细胞或组织。本发明采用高亲和度的特异DNA aptamer，不干扰Cas9?gRNA复合物的形成与稳定，使同源性重组和基因修复的比例达到最高。
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