公开(公告)号：CN117987338A

公开(公告)日：2024-05-07

申请号：CN202410162890.X

申请日：2024-02-05

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 陈小龙 ,  邓艳峰 ,  马志 ,  朱林江 ,  陈翰驰 ,  范永仙

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/77 ,  C12P13/04 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明提供了一种重组谷氨酸棒杆菌，所述重组谷氨酸棒杆菌以谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)ATCC13032(DE3)为底盘菌，将与麦角硫因合成相关的蛋白编码基因egtB、egtD、egtE以基因簇的形式通过载体导入至底盘菌中进行异源表达，使其具备生产麦角硫因的能力，且谷氨酸棒杆菌在生产麦角硫因的过程中不会分泌内毒素，可代替大肠杆菌进行应用，生物安全性高，大大简化了后提取工艺。在此基础上，本发明还通过合成生物学手段对麦角硫因合成所需的三个前体氨基酸合成途径进行了优化，从而进一步提升了麦角硫因的产量，具有较高的麦角硫因生产应用潜力。

公开(公告)号：CN114703158B

公开(公告)日：2024-04-05

申请号：CN202210230270.6

申请日：2022-03-10

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 陈小龙 ,  周瑶瑶 ,  朱林江 ,  陆跃乐 ,  甘恬 ,  范永仙

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/60 ,  C12P19/18 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种提高转糖基活性和提升L‑抗坏血酸葡萄糖苷产物L‑抗坏血酸‑2‑α‑葡萄糖苷（2‑O‑α‑D‑glucopyranosyl‑L‑ascorbic acid,AA‑2G）纯度的蔗糖磷酸化酶突变体及其应用。本发明通过对SEQ ID.1所示氨基酸序列第134位脯氨酸、第341位亮氨酸和第343位亮氨酸中的一种或多种进行单点突变或多点组合突变，使得蔗糖磷酸化酶突变体比酶活提升1~2倍，合成AA‑2G浓度可达205 g/L，合成L‑抗坏血酸糖苷产物中AA‑2G占比达92~99%，这些突变体具有更好的工业应用特性。

公开(公告)号：CN116536300A

公开(公告)日：2023-08-04

申请号：CN202310521234.X

申请日：2023-05-10

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 陈小龙 ,  朱林江 ,  卢昶鑫 ,  陈翰驰

IPC: C12N11/089 ,  C12N11/091 ,  C12N9/02 ,  C12N9/04 ,  C12P17/04

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种固定化双酶树脂及其制备方法与应用。本发明的固定化双酶树脂简单、酶活回收率高达90％以上、蛋白回收效率达65％。多次使用后固定化双酶树脂的活力剩余高、转化率高，蛋白载量可达250mg/g，明显高于已有报道的通过包埋(20mg/g)等固定化方法的蛋白载量。本发明的固定化双酶树脂酶活高、循环稳定性高、有效提高辅酶的循环利用，具有机械强度高、生物相容性好、环境耐受性强、不易失活、稳定性高的优良特性。本发明的固定化双酶树脂用于催化制备(R)‑二氢‑4‑丙基‑2(3H)‑呋喃酮具有产物选择性高、工艺操作简单、固废和产品损失低、产品收率高，有效降低反应成本等优势。

公开(公告)号：CN111635328B

公开(公告)日：2023-03-31

申请号：CN201910158002.6

申请日：2019-03-02

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 范永仙 ,  陆跃乐 ,  陈小龙 ,  蔡晓青 ,  李剑锋 ,  杨珊珊

IPC: C07C219/24 ,  C07C213/06 ,  C07C213/10 ,  A01N37/02 ,  A01N37/06 ,  A01P3/00

Abstract: 本发明公开了一类井冈羟胺A的酯化物及其制备和抑菌应用。所述井冈羟胺A的酯化物的结构如下所示，其中，R1‑R8中，其中R1为RCO‑，R2为RCO‑或H，其中R为C1‑C21的脂烃基或者卤代脂烃基，其他基团为H。本发明提供了所述井冈羟胺A的酯化物的制备方法，该方法可准确控制反应位点，得到高纯度的酯化物。本发明提供了所述井冈羟胺A的酯化物在制备针对水稻纹枯病菌的抑菌剂中的应用，其对于水稻纹枯病菌，具有很好的抑制作用。

公开(公告)号：CN115806956A

公开(公告)日：2023-03-17

申请号：CN202211570927.X

申请日：2022-12-08

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 朱林江 ,  吕磊 ,  胡友明 ,  陈小龙 ,  陆跃乐

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/46 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种l‑薄荷醇‑O‑β‑半乳糖基化酶及编码基因，以及含l‑薄荷醇‑O‑β‑半乳糖基化酶的基因工程菌，及其在微生物催化制备l‑薄荷醇‑O‑β‑半乳糖苷中的应用。所述l‑薄荷醇‑O‑β‑半乳糖基化酶氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示。本发明所述生产l‑薄荷醇‑O‑β‑半乳糖苷的重组大肠杆菌，即重组大肠杆菌(Escherichia coli)E.coli 28a‑sth1275能够在胞内高效合成l‑薄荷醇‑β‑半乳糖基化酶。该重组菌经过发酵，诱导胞内表达l‑薄荷醇‑O‑β‑半乳糖基化酶，将发酵液离心获得细胞，再重悬后可直接用于制备l‑薄荷醇‑O‑β‑半乳糖苷。以l‑薄荷醇和乳糖为底物，催化合成l‑薄荷醇‑O‑β‑半乳糖苷。

公开(公告)号：CN113321591B

公开(公告)日：2022-11-25

申请号：CN202010517412.8

申请日：2020-06-09

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 陈小龙 ,  陆跃乐 ,  叶康 ,  蔡晓青 ,  范永仙 ,  朱林江 ,  陈翰驰

IPC: C07C219/24 ,  C12P13/00 ,  A01N37/02 ,  A01N37/04 ,  A01N37/06 ,  A01N37/10 ,  A01P3/00 ,  A01P7/00 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明公开了井冈类酯化物及其制备和抑菌应用。所述井冈类酯化物的结构如下所示，其中R8为RCO‑，R1‑R7为H；R为含有一个双键的脂链烃基C17H33、含有两个双键的脂链烃基CnH2n‑3、含有三个双键的脂链烃基CmH2m‑5、苯基、卤代苯基或HOOC(CH2)8‑，n＝5‑21，m＝15‑21。本发明提供了一种所述井冈类酯化物的制备方法，具体为：井冈羟胺A在叔丁醇中于90‑110℃回流4‑6h制得井冈羟胺A饱和溶液，然后加入固定化酶Novozym 435和酸RCOOH在反应容器中充分反应，分离纯化得到井冈类酯化物。本发明提供了所述的井冈类酯化物在水稻纹枯病菌抑制剂中的应用，其具有良好的抑菌活性。

公开(公告)号：CN111995667B

公开(公告)日：2022-10-11

申请号：CN201910448251.9

申请日：2019-05-27

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 陈小龙 ,  张辉 ,  徐安杰 ,  杨珊珊 ,  陈翰驰 ,  朱林江 ,  陆跃乐

IPC: C07K14/315 ,  C07K1/24 ,  A23L3/3526

Abstract: 一种乳酸链球菌素山梨酸盐的制备方法和应用，所述制备方法包括：(1)将乳酸链球菌素盐酸盐用盐酸溶液溶解，加入山梨酸钾，充分搅匀后得到溶液；(2)采用两隔室电渗析装置，在淡水室通入步骤(1)获得的溶液，浓水室通入纯水，控制电渗析装置中的料液温度在5‑10℃之间，启动电渗析装置进行处理，处理至淡水室的物料中氯离子含量低于0.01％，结束电渗析；(3)取步骤(2)得到的淡水室中的物料进行喷雾干燥，收集粉末，获得乳酸链球菌素山梨酸盐。本发明提供了制得的乳酸链球菌素山梨酸盐在制备抑菌剂中的应用，具有良好的抑菌活性。本发明的制备方法操作简便，有效去除了Clˉ，适用于大规模的工业化生产。

公开(公告)号：CN115058406A

公开(公告)日：2022-09-16

申请号：CN202210580959.1

申请日：2022-05-25

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 陆跃乐 ,  桑玉敏 ,  陈小龙 ,  朱林江 ,  陈翰驰 ,  马志 ,  周家伟

IPC: C12N9/18 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P41/00 ,  C12P7/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种对硝基苄基酯酶突变体、编码基因，及其在酶催化dl‑薄荷酯手性拆分制备l‑薄荷醇中的应用。本发明的有益效果主要体现在：①本发明酯酶突变体无需添加助溶剂，酶催化活性维持较高水平；②在无助溶剂体系下，突变体酶催化的立体选择性较野生型和F314E突变型显著提高，将该突变体酶通过大肠杆菌过量表达后用于催化反应，并以10～200g/L的dl‑乙酸薄荷酯为底物，进行水解拆分制备l‑薄荷醇，结果表明l‑乙酸薄荷酯底物转化率>93％，产物l‑薄荷醇的eep值>98％，表现出良好的工业应用性能。

公开(公告)号：CN112592839B

公开(公告)日：2022-08-19

申请号：CN202110026138.9

申请日：2021-01-08

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 嘉晓勤 ,  郑王建 ,  孙莉凯 ,  陈小龙

IPC: C12N1/14 ,  C12G3/02 ,  C12G3/022 ,  C12R1/845

Abstract: 本发明提供了一株降解氨基甲酸乙酯的霉菌——米根霉JQA3(Rhizopus oryzae JQA3)及其应用，所述米根霉JQA3保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：M 20191029，保藏日期为2019年12月09日。该米根霉JQA3可应用于降解EC，当EC含量为5g/L时，发酵8d降解效果可达到56％以上；本发明Rhizopus oryzae JQA3菌株具有较好的液化力和糖化力，其液化酶活力达3765U·mL‑1，糖化酶活力达5287.06U·mL‑1。用该菌株制作白曲，可用于红曲黄酒的发酵，不仅能对原料进行液化和糖化，提高原料利用率，还能减少EC残留，提高产品的安全性。

公开(公告)号：CN114752580A

公开(公告)日：2022-07-15

申请号：CN202210579317.X

申请日：2022-05-25

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 朱林江 ,  陈路易 ,  陈小龙 ,  陆跃乐 ,  陈翰驰 ,  周家伟 ,  马志

IPC: C12N9/26 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/44 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种转糖基活性提高的α‑葡萄糖苷酶突变体及其编码基因，以及其在酶法制备香兰素‑α‑葡萄糖苷或乙基香兰素‑α‑葡萄糖苷中的应用，所述突变体由氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的α‑葡萄糖苷酶第145位和/或第272位氨基酸突变而得。本发明的有益效果主要体现在：本发明提供了一种α‑葡萄糖苷酶突变体，显著提高了α‑葡萄糖苷酶的转糖基活性，克服了现有α‑葡萄糖苷酶转糖基活性低以及大量水解转糖基产物的问题，更适合工业应用。