公开(公告)号：CN102313810A

公开(公告)日：2012-01-11

申请号：CN201110215365.2

申请日：2011-07-29

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 孙建和 ,  王元凯 ,  严亚贤

IPC: G01N33/577 ,  G01N21/76

Abstract: 一种生物检测工程技术领域的检测玉米赤霉烯酮毒素的免疫化学发光方法，包括如下步骤：将ZEN半抗原与OVA偶联，得到偶联物ZEN-OVA；对待测样品进行萃取，得到萃取液；将ZEN-OVA以最佳包被浓度包被在96孔白板上，封闭后分别加入已知的不同浓度的ZEN纯品与抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的混合溶液，待测样品萃取液与抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的混合溶液，孵育；孵育后加入HRP标记的二抗，之后再加入发光底物，进行发光测定，得到结果；制作标准曲线；通过标准曲线得到待测样品萃取液中的ZEN浓度。本发明的方法可以快速检测出待测样品中含有的ZEN的量；同时，本发明的方法检测对象针对性强，准确率高。

公开(公告)号：CN101671662A

公开(公告)日：2010-03-17

申请号：CN200910309089.9

申请日：2009-10-30

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 陆承平 ,  孙建和 ,  王琰

IPC: C12N9/88 ,  C12N15/70 ,  C12R1/92 ,  C12R1/19

Abstract: 一种生物技术领域的能够裂解多种血清型猪链球菌的裂解酶的制备方法，包括如下步骤：步骤一，纯化猪链球菌2型烈性噬菌体，提取噬菌体的DNA；步骤二，以步骤一所得DNA为模板，PCR扩增裂解酶基因；步骤三，原核表达步骤二扩增所得DNA，得到融合蛋白；步骤四，纯化融合蛋白，复性，得到裂解酶。本发明通过原核表达猪链球菌烈性噬菌体SMP的裂解基因，获得纯化的有活性的裂解酶，它可在体外对多种猪链球菌有裂解作用；本发明的方法制得的裂解酶能裂解多种血清型猪链球菌。

公开(公告)号：CN101109753A

公开(公告)日：2008-01-23

申请号：CN200710045452.1

申请日：2007-08-30

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 严亚贤 ,  高成秀 ,  孙建和

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/543 ,  G01N21/78

Abstract: 一种用胶体金免疫层析试验检测大肠杆菌志贺毒素的方法，属于生物技术领域。本发明先将产志贺毒素的大肠杆菌的B亚单位进行基因扩增，获得目的片断，将该片断与载体连接，得到重组表达质粒，导入大肠杆菌表达，获得融合表达的Stx－B融合蛋白，纯化该融合蛋白，将纯化后的融合蛋白用于制备单克隆抗体和多克隆抗体，用胶体金标记多克隆抗体，将其作为示踪标记物，在检测线、质控线与相应的抗原抗体发生特异性结合被截留而显色，根据检测线、质控线显色与否来判定阴阳性结果。本发明能快速、准确地检测样品中的志贺毒素，为及时诊断、防控产志贺毒素的大肠杆菌提供简便、实用的诊断试剂盒。

公开(公告)号：CN1712965A

公开(公告)日：2005-12-28

申请号：CN200510027316.0

申请日：2005-06-30

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 孙建和 ,  王琰 ,  陆承平 ,  严亚贤 ,  陆苹

IPC: G01N33/535 ,  G01N33/569 ,  G01N21/78

Abstract: 一种鉴别诊断禽流感自然感染鸡群酶联免疫吸附试验的方法，通过原核表达H9N2型禽流感病毒NS1蛋白，以此作为抗原包被酶标反应板。即将H9N2型禽流感病毒进行RT－PCR扩增，获得目的片断，再将目的片断与pET－32a(+)载体连接，得到重组表达质粒，导入大肠杆菌BL21表达，获得一个分子量为44.2KD的融合蛋白。该融合蛋白，经过纯化，得到纯度较高的H9N2型禽流感病毒NS1蛋白。将获得的蛋白作为抗原包被酶标反应板，通过间接酶联免疫吸附试验的方法测定待检血清中与抗原反应的抗体IgG水平鉴别诊断禽流感自然感染鸡群与免疫接种鸡群。本发明操作简单，价格低廉，又克服了现有技术的缺点，是一种有效可靠的禽流感诊断方法。