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公开(公告)号:CN101788563B
公开(公告)日:2013-03-06
申请号:CN201010104575.X
申请日:2010-02-03
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/535 , G01N21/78 , G01N1/28
Abstract: 本发明属于农业微生物基因工程和动物传染病领域。涉及一种梅花鹿γ-干扰素双夹心ELISA检测方法及试剂盒与应用。获得一株能稳定分泌梅花鹿γ-干扰素单克隆抗体的细胞株CerIFN-γ4C,其保藏号为CCTCC NO:C200966。本发明还建立了梅花鹿γ-干扰素双夹心ELISA检测方法,核心是,构建梅花鹿γ-干扰素的单克隆抗体,制备梅花鹿γ-干扰素多克隆抗体等。本发明的试剂盒包含梅花鹿γ-干扰素的单克隆抗体,梅花鹿γ-干扰素的多克隆抗体,牛结核特异性三基因融合抗原蛋白RCE及其他试剂。本发明还公开了所述检测方法和试剂盒的应用。本发明特异性强、灵敏度高、操作简便和诊断快速。
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公开(公告)号:CN101503688B
公开(公告)日:2012-11-28
申请号:CN200910061152.1
申请日:2009-03-18
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于家畜分子标记制备技术领域,具体涉及一种作为猪标记辅助选择应用的与猪免疫力相关的分子标记的制备与应用。所述的分子标记由猪CD163基因克隆得到,它的mRNA序列如序列表SEQ ID NO:1所示。序列表SEQ ID NO:1的第2439bp处有一个A>G的碱基突变;序列第2454bp处有一个G>C的碱基突变;序列第2537bp处有一个G>A的碱基突变;序列第2685bp处有一个A>C的碱基突变。本发明还公开了扩增CD163基因部分编码区所用的引物以及用于2537bp G>A和2685bp A>C两个分子标记的检测方法。本发明为猪的标记辅助选择提供了2个新的分子标记。
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公开(公告)号:CN101134962B
公开(公告)日:2012-10-10
申请号:CN200710053491.6
申请日:2007-10-08
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物基因工程技术领域,具体涉及山羊生长激素基因(Growth hormone,GH)的克隆及多态性的应用。特征是克隆得到如序列表SEQ ID NO:1和2所示的山羊GH基因的2条DNA序列,检测到两个影响山羊生长性状的碱基突变。本发明公开了山羊GH基因序列和影响山羊生长性状的2个碱基突变位点。本发明还公开了获得上述基因的制备方法及其应用,为山羊生长性状标记辅助选择提供了新的分子标记。
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公开(公告)号:CN102296074A
公开(公告)日:2011-12-28
申请号:CN201110263685.5
申请日:2011-09-07
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪免疫性状相关的CD169基因及制备方法和应用,从猪的血液中提取总DNA,根据GenBank公布的猪CD169序列(GeneBank登录号:NC_010459.2)为模板设计引物(正向引物:5'-GGGCATTCAAAGCCAAACTC-3',反向引物:5'-CCTCGGGTGTAGCCCTCAAA-3'),PCR扩增,PCR产物纯化和克隆测序,获得了序列为SEQIDNO:1所示的核苷酸序列,该序列包括一个突变位点C305-A305,此位点可以被HinfI内切酶识别,因此应用CRS-PCR-RFLP方法检测猪CD169基因的多态性。该基因主要的作用是介导PRRSV的粘附和内吞。PRRSV侵入机体后,首先和细胞膜上的受体蛋白(例如CD169)结合,然后在CD169的协助下通过包吞作用进入细胞内。本发明为猪的标记辅助选择提供了一个新的分子标记。
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公开(公告)号:CN101788563A
公开(公告)日:2010-07-28
申请号:CN201010104575.X
申请日:2010-02-03
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/535 , G01N21/78 , G01N1/28
Abstract: 本发明属于农业微生物基因工程和动物传染病领域。涉及一种梅花鹿γ-干扰素双夹心ELISA检测方法及试剂盒与应用。获得一株能稳定分泌梅花鹿γ-干扰素单克隆抗体的细胞株CerIFN-γ4C,其保藏号为CCTCC NO:C200966。本发明还建立了梅花鹿γ-干扰素双夹心ELISA检测方法,核心是,构建梅花鹿γ-干扰素的单克隆抗体,制备梅花鹿γ-干扰素多克隆抗体等。本发明的试剂盒包含梅花鹿γ-干扰素的单克隆抗体,梅花鹿γ-干扰素的多克隆抗体,牛结核特异性三基因融合抗原蛋白RCE及其他试剂。本发明还公开了所述检测方法和试剂盒的应用。本发明特异性强、灵敏度高、操作简便和诊断快速。
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公开(公告)号:CN101503689A
公开(公告)日:2009-08-12
申请号:CN200910061153.6
申请日:2009-03-18
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于家畜分子标记制备技术领域。具体公开了一种作为分子标记的与奶牛产奶性状相关的SOCS-2基因,它的核苷酸序列的序列如序列表SEQ ID NO:1所示,在序列表SEQ ID NO:1第5265bp处有一个C5265-A5265的碱基突变,导致BsiYI-RFLP多态性;在序列表SEQ ID NO:1第5306bp处有一个T5306-G5306的碱基突变,导致Hinf I-RFLP多态性。以上述SOCS-2基因对奶牛的一些性状进行了关联分析。
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公开(公告)号:CN101503688A
公开(公告)日:2009-08-12
申请号:CN200910061152.1
申请日:2009-03-18
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于家畜分子标记制备技术领域,具体涉及一种作为猪标记辅助选择应用的与猪免疫力相关的分子标记的制备与应用。所述的分子标记由猪CD163基因克隆得到,它的mRNA序列如序列表SEQ ID NO:1所示。序列表SEQ ID NO:1的第2439bp处有一个A>G的碱基突变;序列第2454bp处有一个G>C的碱基突变;序列第2537bp处有一个G>A的碱基突变;序列第2685bp处有一个A>C的碱基突变。本发明还公开了扩增CD163基因部分编码区所用的引物以及用于2537bp G>A和2685bp A>C两个分子标记的检测方法。本发明为猪的标记辅助选择提供了2个新的分子标记。
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公开(公告)号:CN100493600C
公开(公告)日:2009-06-03
申请号:CN200510019158.4
申请日:2005-07-25
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于兽药制备技术领域。公开了一种预防和治疗奶牛子宫内膜炎及胎衣不下症的组合药物及其制备方法与用途。所述的药物组合物包含适量的聚维酮碘、碘酸钾、丙二醇或丙三醇、缩宫素、雌激素、卡波姆、氢氧化钠和水。配制方法是将卡波姆加少许水搅拌,充分溶涨;加入氢氧化钠制成凝胶基质;加入聚维酮碘搅拌均匀;再将碘酸钾溶于少许水,缩宫素、雌激素与丙二醇或丙三醇混匀后一并加入;加水至全量搅匀即得。动物临床试验表明,本发明的制剂抗菌消炎效果明显,可增强子宫收缩力促进胎衣排出、促进子宫复原,有助于缩短产犊或产仔间隔,提高奶牛繁殖率。
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公开(公告)号:CN101302497A
公开(公告)日:2008-11-12
申请号:CN200810115821.4
申请日:2008-06-27
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/10
Abstract: 本发明属于哺乳动物繁殖技术领域,具体涉及一种利用牛体细胞获得克隆胚胎的方法。公开了一种简单高效生产牛克隆胚胎的方法。根据猪体细胞膜在注入卵胞质内会在30min后自动溶解消失的研究成果,在牛中提出采用不破膜的全细胞为供体进行全细胞胞质内直接注射构建牛克隆胚胎;从而简化了体细胞核移植的操作流程。发明特征是:(1)牛卵丘-卵母细胞复合体的采集与培养;(2)卵母细胞的去核;(3)供体细胞的制备;(4)共培养细胞单层的制备;(5)重构胚的构建;(6)重构胚的激活;(7)重构胚的培养等。本发明最大的特点是易于操作、步骤简单、结果稳定,为牛体细胞核移植技术的推广以及进一步研究提供了一种新的思路和方法。
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公开(公告)号:CN1927226A
公开(公告)日:2007-03-14
申请号:CN200610124495.4
申请日:2006-09-11
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于奶牛繁殖技术领域,具体涉及奶牛性控精子冷冻保存精液稀释液。本发明的要点是将所述的精液稀释液分别制备成A、B、C、D液,然后按照适当的比例混合,在所述的C液(稀释液1)和D液(稀释液2)中分别加入了5%~20%猪精清,既明显提高了奶牛性控精液的精子顶体完整率和精子的活率,又有助于降低精液的密度,从而节约了精液制备成本。经检测,本发明的奶牛性控精子冷冻保存精液稀释液的精子活率分别达到50.88-62.88%,平均数为57.41%,比对照组平均提高了15.13个百分点;精子顶体完整率分别达到50.80-53.20%,平均数为51.90%,比对照组平均提高了7.0个百分点。
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