一种生物絮团的培养方法及水产养殖方法

    公开(公告)号:CN106754495A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201611129889.9

    申请日:2016-12-09

    摘要: 本发明涉及一种生物絮团培养方法及水产养殖方法,其中的生物絮团培养方法包括:向水体中添加有机碳源,有机碳源的添加量满足水体中的C/N比为15~17:1;向水体中加入地衣芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌及干酪乳杆菌,所述地衣芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌及干酪乳杆菌的加入总量满足每ml水体中加入0.8×105~1.2×105cfu;向水体中曝气,维持水体中的溶解氧在6mg/L以上。其通过在水体中加入有益菌,并通过调整水体中有机碳源的添加量,保持水体中一定的C/N比,可有效促进水体内有益菌的大量繁殖、加快生物絮团的形成,从而获得大粒径生物絮团。

    脂质体包裹的真核表达质粒pEGFP-IFNα及用途

    公开(公告)号:CN105200082A

    公开(公告)日:2015-12-30

    申请号:CN201510506343.X

    申请日:2015-08-18

    摘要: 本发明涉及脂质体包裹的真核表达质粒pEGFP-IFNα及用途。脂质体包裹的真核表达质粒pEGFP-IFNα,它是通过以下方法制备的:反转录-PCR扩增-连接到T载体-转化至大肠杆菌-双酶切-回收IFNα片段-插入真核表达载体的多克隆位点-转化大肠杆菌DH5ɑ-抽提质粒-酶切-形成W/O型初乳-得到复乳-除去有机溶剂得到干扰素脂质体混悬液。如图5所示,与对照组相比较,这些基因在4种组织中均被强烈诱导表达,其中大多数ISG基因在24h达到最高水平,在72h内回落到正常水平。这从另一个方面证实脂质体包裹的pEGFP-IFNα抗病毒效果。另外,我们还检测了经脂质体包裹的pEGFP-IFNɑ刺激后草鱼体内EGFP基因的表达,结果显示,在草鱼4种组织中均检测到EGFP,其诱导表达水平显得既快速又显著。

    草鱼呼肠孤病毒基因诊断试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN101906482B

    公开(公告)日:2013-08-14

    申请号:CN200910099037.3

    申请日:2009-06-04

    IPC分类号: C12Q1/70 C12Q1/68 C12R1/93

    摘要: 一种草鱼呼肠孤病毒基因诊断试剂盒,包括:1.内脏组织中病毒RNA提取试剂:DEPC水;蛋白酶K(1mg/mL,pH8.0);SDS(1%);酚/氯仿/异戊醇(25/24/1);氯仿/异戊醇(24/1);异丙醇;70%乙醇;2.细胞感染病毒的RNA提取试剂:Trizol;氯仿;异丙醇;70%乙醇;DEPC水;3.RT反应试剂成分:5×AMV Buffer,dNTP,DEPC水,反向引物R1,RNA酶抑制剂RNAsin(RI),反转录酶AMV;4.PCR反应试剂成分:10×PCR buffer(含mg2+),dNTP Mixture(各2.5mmol/L);特异性寡核苷酸引物F1和引物R1;DEPC水和Taq E(5U/uL),所述正向引物F1:5’-ATCCCGTATATCTATGGCTT-3’;所述反向引物R1:5’TTGGAGACGAACATAGACGC-3。本发明用于草鱼呼肠孤病毒基因诊断。

    一种气单胞菌和嗜水气单胞菌双重PCR快速检测试剂盒和检测方法

    公开(公告)号:CN101736073A

    公开(公告)日:2010-06-16

    申请号:CN200810122380.0

    申请日:2008-11-24

    IPC分类号: C12Q1/68 C12Q1/04

    摘要: 一种气单胞菌和嗜水气单胞菌双重PCR快速检测试剂盒,包括:(1)DNA提取试剂:TE缓冲液,5-15mM?Tris,0.5-1.5mM?EDTA;10-20mg/mL溶菌酶水溶液;10-20mg/mL蛋白酶K水溶液;Tris饱和酚;2-5mo1/L乙酸钠水溶液;95%乙醇;(2)PCR反应试剂管:PCR反应液49μL,包括10×PCR反应缓冲液5μL,dNTPs(10uM/L)0.5μL,Taq?DNA聚合酶(5U/μL)0.5μL,特异性寡核苷酸引物引物1、引物2、引物3、引物4,用灭菌去离子水定容。一种气单胞菌和嗜水气单胞菌双重PCR快速检测方法:(1)DNA抽提,(2)PCR扩增反应,(3)被检测样品目的PCR扩增产物和电泳检验。本发明适用于水产生物致病菌的快速检测。