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公开(公告)号：CN109280651B
公开(公告)日：2021-11-26
申请号：CN201811069893.X
申请日：2018-09-13
申请人： 四川自豪时代药业有限公司
摘要： 本发明涉及一种乳酸脱氢酶突变体基因LbLDH1及其在大肠杆菌中高效表达的发酵方法。该发明依赖于遗传资源Lactobacillus bulgaricus的乳酸脱氢酶基因，在此基础上进行点突变并对基因序列进行密码子优化后，连接到表达载体上，构建重组质粒并导入大肠杆菌中，重组乳酸脱氢酶突变体在大肠杆菌中获得了可溶性高表达，离心收集的菌体经高压均质机破菌后，粗酶液可在低温下存放5天，活性无明显衰减。通过本方法制备的重组乳酸脱氢酶突变体与未进行突变及序列优化的重组乳酸脱氢酶相比，表达量提高了五倍以上，且在高pH值下的活性损失更小，有更广的pH值适用范围。本发明在乳酸发酵制备及NAD/NADH循环中有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN109503479A
公开(公告)日：2019-03-22
申请号：CN201811468485.1
申请日：2018-12-03
申请人： 四川自豪时代药业有限公司
IPC分类号： C07D215/44 , C07C41/01 , C07C43/178 , G01N30/74
摘要： 本发明公开了一种式(I)所示的未见报道的磷酸萘酚喹工艺杂质的结构，并提供了一种烷基氨甲基苯酚转化为相应的烷基氧甲基苯酚，或者取代的烷基氨甲基苯酚转化为取代的烷基氧甲基苯酚的方法，将烷基氨甲基苯酚或者取代的烷基氨甲基苯酚溶于醇中与二卤代烃和碳酸氢盐反应，利用季铵盐的成环机理和季铵基团良好的离去性制备烷基氧甲基苯酚或取代的烷基氧甲基苯酚。该方法无需使用特殊的反应器，无需对底物中的酚羟基进行保护，操作简单，使用的试剂简单易得，大大缩短了反应步骤，具有较高的应用价值。
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公开(公告)号：CN106520870A
公开(公告)日：2017-03-22
申请号：CN201611256457.4
申请日：2016-12-30
摘要： 本发明公开了一种外源高表达破伤风毒素受体结合区Hc的发酵方法，步骤如下：(1)取含有破伤风毒素受体结合区Hc核苷酸序列的工程菌，培养至OD600值为3.0-5.0，得种子液；(2)取种子液，加入发酵培养基中培养，至溶氧值及pH值快速上升，且pH的上升幅度大于0.2/min、溶氧值大于10％/min时，补料；(3)当OD600值为17时进行诱导表达，加入终浓度为0.2mM的IPTG，降温至28℃，继续补料，培养至OD600值为40-50。本发明方可以高表达获得可溶性的破伤风毒素受体结合区Hc，且发酵工艺简便，成本低廉，可应用于大规模生产制备破伤风Hc亚单位疫苗，应用前景良好。
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公开(公告)号：CN113024655A
公开(公告)日：2021-06-25
申请号：CN202011554998.1
申请日：2020-12-24
申请人： 四川自豪时代药业有限公司
发明人： 魏琪
摘要： 本发明涉及生物制药领域，具体地，本发明涉及一种高效去除rhNGF前体的纯化方法。本发明利用羟基磷灰石介质的复合性分离模式，能够有效的将rhNGF前体物质和目标产物得到分离，产品回收率高，适合大规模工业化生产。
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公开(公告)号：CN109280652A
公开(公告)日：2019-01-29
申请号：CN201811071121.X
申请日：2018-09-13
申请人： 四川自豪时代药业有限公司
摘要： 本发明公开了一种外源高表达乳酸脱氢酶突变体的高密度发酵方法，步骤如下：(1)取含有乳酸脱氢酶突变体核苷酸序列的工程菌，培养至OD600值为2.5～4.0，得种子液；(2)取种子液，加入发酵培养基中培养，至溶氧值及pH值快速上升，且pH的上升幅度大于0.2/min、溶氧值大于10％/min时，补料；(3)当OD600值为20～30时进行诱导表达，加入终浓度为0.5mmol/L的IPTG，降温至30℃，继续补料，培养至OD600值为70～90。本发明可大幅提高含可溶性乳酸脱氢酶突变体宿主菌的收获水平，且发酵工艺简便，成本低廉，可应用于大规模生产制备乳酸脱氢酶突变体，有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN105928771A
公开(公告)日：2016-09-07
申请号：CN201610260663.6
申请日：2016-04-25
申请人： 四川自豪时代药业有限公司
摘要： 本发明公开了一种检测疫苗抗原含量的样品前处理方法，步骤如下：(1)取待检疫苗，离心，去上清，得沉淀；(2)用超纯水清洗1～5次；(3)加入超纯水重悬，即可。本发明还公开了一种检测疫苗抗原含量的方法。本发明采用超纯水对待检疫苗进行前处理，可以有效減少了辅料成分对疫苗中抗原含量检测的干扰，进而实现准确检测，本发明疫苗抗原含量的检测方法具有耐用性强、准确度高、精密度高的特点，且操作步骤简单，成本低廉，抗原回收率非常接近理论值，实际应用前景良好。
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公开(公告)号：CN114518335A
公开(公告)日：2022-05-20
申请号：CN202111371906.0
申请日：2021-11-18
申请人： 四川自豪时代药业有限公司
IPC分类号： G01N21/33
摘要： 本发明涉及生物制药领域，具体地，本发明涉及一种rhNGF蛋白含量的测定方法。本发明利用紫外分光光度法，能够快速准确的测定rhNGF的蛋白质含量。
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公开(公告)号：CN106520870B
公开(公告)日：2019-12-13
申请号：CN201611256457.4
申请日：2016-12-30
摘要： 本发明公开了一种外源高表达破伤风毒素受体结合区Hc的发酵方法，步骤如下：(1)取含有破伤风毒素受体结合区Hc核苷酸序列的工程菌，培养至OD600值为3.0‑5.0，得种子液；(2)取种子液，加入发酵培养基中培养，至溶氧值及pH值快速上升，且pH的上升幅度大于0.2/min、溶氧值大于10％/min时，补料；(3)当OD600值为17时进行诱导表达，加入终浓度为0.2mM的IPTG，降温至28℃，继续补料，培养至OD600值为40‑50。本发明方可以高表达获得可溶性的破伤风毒素受体结合区Hc，且发酵工艺简便，成本低廉，可应用于大规模生产制备破伤风Hc亚单位疫苗，应用前景良好。
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公开(公告)号：CN109280651A
公开(公告)日：2019-01-29
申请号：CN201811069893.X
申请日：2018-09-13
申请人： 四川自豪时代药业有限公司
摘要： 本发明涉及一种乳酸脱氢酶突变体基因LbLDH1及其在大肠杆菌中高效表达的发酵方法。该发明依赖于遗传资源Lactobacillus bulgaricus的乳酸脱氢酶基因，在此基础上进行点突变并对基因序列进行密码子优化后，连接到表达载体上，构建重组质粒并导入大肠杆菌中，重组乳酸脱氢酶突变体在大肠杆菌中获得了可溶性高表达，离心收集的菌体经高压均质机破菌后，粗酶液可在低温下存放5天，活性无明显衰减。通过本方法制备的重组乳酸脱氢酶突变体与未进行突变及序列优化的重组乳酸脱氢酶相比，表达量提高了五倍以上，且在高pH值下的活性损失更小，有更广的pH值适用范围。本发明在乳酸发酵制备及NAD/NADH循环中有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN305052270S
公开(公告)日：2019-03-01
申请号：CN201830431148.X
申请日：2018-08-07
申请人： 四川自豪时代药业有限公司
摘要： 1．本外观设计产品的名称：包装盒。
2．本外观设计产品的用途：本外观设计产品用于药品包装。
3．本外观设计产品的设计要点：图案。
4．最能表明本外观设计设计要点的图片或照片：主视图。
5．省略视图：主视图与后视图相同，省略后视图；左视图与右视图相同，省略右视图。
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