一种通过预先PCR改变不同核酸靶标相对扩增速度的方法

    公开(公告)号:CN118127137A

    公开(公告)日:2024-06-04

    申请号:CN202410274764.3

    申请日:2024-03-11

    IPC分类号: C12Q1/686 C12N15/11

    摘要: 本发明公开了一种通过预先PCR改变不同核酸靶标相对扩增速度的方法,包括如下步骤:S1用于准备靶标特异引物对和靶标特异探针的步骤;S2用于对靶标特异引物对的5’端引入通用引物序列,生成含有通用引物序列的靶标特异引物对的步骤;S3用于在PCR反应体系中加入不同痕量的含有通用引物序列的靶标特异引物对进行扩增并生成PCR产物的步骤。S4用于以PCR产物为模板,用通用引物对和靶标特异探针进行RT‑PCR反应的步骤。本发明所公开的一种通过预先PCR改变不同核酸靶标相对扩增速度的方法,以达到改变不同核酸靶标相对扩增速度的目的。

    用于宫颈癌甲基化检测的引物探针、试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN116397025A

    公开(公告)日:2023-07-07

    申请号:CN202211410411.9

    申请日:2022-11-11

    摘要: 本发明涉及一种用于宫颈癌甲基化检测的引物和探针组合、试剂盒及其使用方法。所述引物和探针用于检测DAPK2和CADM2基因组合;所述引物探针组合包括DAPK2正向引物F、DAPK2反向引物R、DAPK2探针P、CADM2正向引物F、CADM2反向引物R、CADM2探针P;它们的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:6所示。本发明采用的引物探针组合具有高敏感性和高特异性的优势,可准确稳定的检测低至浓度1ng/μL样本,6.67%甲基化率;并且所述探针具有单碱基分辨率,可特异区分甲基化和未甲基化的DNA。

    一种CLEC9A+XCR1+树突状细胞的制备方法

    公开(公告)号:CN116376829A

    公开(公告)日:2023-07-04

    申请号:CN202211683395.0

    申请日:2022-12-27

    摘要: 本发明提供了一种CLEC9A+XCR1+树突状细胞的制备方法,该制备方法包括如下步骤:在含有CD40信号激活剂的培养体系中,在体外将PBMC诱导分化为CLEC9A+XCR1+树突状细胞。其中,CD40信号激活剂为重组人CD40配体,优选重组人CD40L三聚体活性单位。培养体系还包括α‑MEM、RPMI‑1640、IMDM中的一种,加入1×β‑巯基乙醇、1×胰岛素‑转铁蛋白‑硒‑乙醇胺添加剂、重组人Flt3配体蛋白、重组人干细胞因子、重组人血小板生成素、重组人粒细胞‑巨噬细胞集落刺激因子、重组人白介素4蛋白以及自体血浆或重组人血白蛋白。本发明提供的CLEC9A+XCR1+树突状细胞的制备方法,能够在体外诱导分化CLEC9A+XCR1+树突状细胞,可获得纯度20%以上的CLEC9A+XCR1+树突状细胞。

    一种用于宫颈癌甲基化检测的引物和探针组合、试剂盒及其使用方法

    公开(公告)号:CN114457156A

    公开(公告)日:2022-05-10

    申请号:CN202210054100.7

    申请日:2022-01-18

    摘要: 本发明一种用于宫颈癌甲基化检测的引物和探针组合、试剂盒及其使用方法,所述引物和探针用于检测PAX1、EPB41L3和FAM19A4的基因组合;所述引物和探针组合包括PAX1正向引物F、PAX1反向引物R、PAX1探针P、EPB41L3正向引物F、EPB41L3反向引物R、EPB41L3探针P、FAM19A4正向引物F、FAM19A4反向引物R和FAM19A4探针P;他们的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:9所示。本发明采用的探针具有高特异性和高敏感性的优势,可准确稳定的检测出低至浓度1ng/μL,5%甲基化率;并且所述探针具有单碱基分辨率,可特异区分甲基化和未甲基化的DNA。

    突变型免疫多肽临床入组的筛选方法

    公开(公告)号:CN110172513A

    公开(公告)日:2019-08-27

    申请号:CN201910460627.8

    申请日:2019-05-30

    IPC分类号: C12Q1/6886 G01N33/68 C12Q1/02

    摘要: 本发明涉及涉及突变型免疫多肽临床入组的筛选方法,对正常组织进行全外显子组测序,对肿瘤组织进行全外显子组测序和全转录组测序,比较肿瘤组织和正常组织的全外显子组测序结果,以及根据肿瘤组织的全转录组测序结筛选突变基因,将野生型和筛选出的突变型的基因序列翻译并进行序列比对合成相应氨基酸序列的免疫多肽,对免疫多肽进行免疫原性体外检测,和对免疫多肽对原代肿瘤细胞的杀伤效果验证,筛选得到具有免疫原性的免疫多肽和具有杀伤效果的免疫多肽。

    一种用于宫颈癌甲基化检测的引物和探针组合、试剂盒及其使用方法

    公开(公告)号:CN114457156B

    公开(公告)日:2024-06-07

    申请号:CN202210054100.7

    申请日:2022-01-18

    摘要: 本发明一种用于宫颈癌甲基化检测的引物和探针组合、试剂盒及其使用方法,所述引物和探针用于检测PAX1、EPB41L3和FAM19A4的基因组合;所述引物和探针组合包括PAX1正向引物F、PAX1反向引物R、PAX1探针P、EPB41L3正向引物F、EPB41L3反向引物R、EPB41L3探针P、FAM19A4正向引物F、FAM19A4反向引物R和FAM19A4探针P;他们的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:9所示。本发明采用的探针具有高特异性和高敏感性的优势,可准确稳定的检测出低至浓度1ng/μL,5%甲基化率;并且所述探针具有单碱基分辨率,可特异区分甲基化和未甲基化的DNA。

    一种用于宫颈癌甲基化检测的引物探针组合、试剂盒及其使用方法

    公开(公告)号:CN115948556A

    公开(公告)日:2023-04-11

    申请号:CN202211735570.6

    申请日:2022-12-30

    摘要: 本发明提供了一种用于宫颈癌甲基化检测的引物探针组合,其包括用于检测基因FAM19A4、EPB41L3和PAX1的引物探针组合,具体包括:基因FAM19A4的正向引物F1、反向引物R1、探针P1,基因EPB41L3的正向引物F3、反向引物R3、探针P3,基因PAX1的正向引物F5、反向引物R5、探针P5;或基因FAM19A4的正向引物F2、反向引物R2、探针P2,基因EPB41L3的正向引物F4、反向引物R4、探针P4,基因PAX1的正向引物F6、反向引物R6、探针P6,共8种引物探针组合。各引物和探针的核苷酸序列分别为SEQ ID NO:1‑SEQ IDNO:18。本发明还提供了一种用于宫颈癌甲基化检测的试剂盒,该试剂盒包括上述引物探针组合。本发明提供的引物探针组合及其试剂盒具有高灵敏度和高特异性,可准确稳定的检测出浓度低至1ng/μL、6.25%甲基化率,并且探针具有单碱基分辨率,可特异区分甲基化和未甲基化的DNA。