妊娠期肝内胆汁淤积症尿液胆汁酸诊断标志物及其应用

    公开(公告)号:CN118706971A

    公开(公告)日:2024-09-27

    申请号:CN202410707735.1

    申请日:2024-06-03

    摘要: 本发明涉及妊娠期肝内胆汁淤积症尿液胆汁酸诊断标志物及其应用技术领域,具体涉及ICP随机尿液胆汁酸诊断或者病情监测标志物组合及其应用。生物标志物包括用于诊断的诊断标志物以及用于病情监测的病情监测标志物;诊断标志物为葡萄糖醛酸化甘氨鹅脱氧胆酸、葡萄糖醛酸化脱氧胆酸、硫酸化甘氨脱氧胆酸、硫酸化甘氨鹅脱氧胆酸、硫酸化甘氨胆酸、葡萄糖醛酸化牛磺胆酸组成的诊断联合标志物;病情监测标志物为葡萄糖醛酸化脱氧胆酸和牛磺猪胆酸组成的联合标志物。本技术方案解决了现有技术缺少针对ICP的灵敏、特异且无创的诊断标志物的技术问题,对辅助临床诊疗,改善围生儿预后具有重要意义,为实现ICP无创精准诊断和病情监测提供一种新的策略。

    一种荧光增强的核酸纳米探针及其制备与在肿瘤检测中的应用

    公开(公告)号:CN118620901A

    公开(公告)日:2024-09-10

    申请号:CN202410878255.1

    申请日:2024-07-02

    摘要: 本发明属于生物医药诊断检测技术领域,具体公开了一种荧光增强的核酸纳米探针及其制备与在肿瘤检测中的应用。本发明基于多条寡核苷酸链聚合形成支架,然后与两种适配体核酸链聚合制备得到双适配体核酸纳米探针,再进一步与核酸染料SYBR GreenⅠ结合构建得到一种荧光增强的核酸纳米探针。所述荧光增强的核酸纳米探针可通过核酸适配体序列特异性识别肿瘤细胞,使荧光信号选择性聚集在肿瘤细胞表面,用于低丰度肿瘤细胞的快速诊断。本发明的荧光增强的核酸纳米探针制备方法简便,省时高效;对靶标具有更强的结合亲和力和更高特异性;不易被核酸酶降解,具有良好的生物稳定性;采用该探针检测癌细胞时,具有高灵敏度和高成像对比度。

    一种甲基化依赖酶切触发的DNA特异位点甲基化快速检测方法

    公开(公告)号:CN118028438A

    公开(公告)日:2024-05-14

    申请号:CN202310916329.1

    申请日:2023-07-24

    发明人: 杨晓兰 吴巧敏

    IPC分类号: C12Q1/6858

    摘要: 一种甲基化依赖酶切触发的DNA特异位点甲基化快速检测方法,具体指甲基化依赖剪切酶GlaI启动的EXPAR联合Cas12a快速检测DNA甲基化平台,其特征步骤包括:1)GlaI特异性的识别并切割DNA的5’‑GmCGmC‑3’甲基化位点并产生具有游离3’‑OH末端的DNA片段,以启动EXPAR;2)EXPAR在短时间内扩增大量的单链DNA;3)积累的单链DNA激活CRISPR/Cas12a的反式切割活性,产生数千倍效率放大的荧光信号;也包括所述平台的优选试剂及配方和优选条件;改变EXPAR模板3’端序列,该体系可检测不同的甲基化序列片段。由此为甲基化DNA尤其是体液中游离的甲基化DNA片段提供快速、简单、通用检测平台。

    一种用于结核分枝杆菌检测的裸眼可视化方法

    公开(公告)号:CN117210538A

    公开(公告)日:2023-12-12

    申请号:CN202311072367.X

    申请日:2023-08-24

    发明人: 杨晓兰 陈孟祺

    摘要: 本发明涉及一种用于结核分枝杆菌检测的裸眼可视化方法。构建基于靶标核酸识别形成含toehold的三向结(TWJ)并诱导多循环指数扩增,级联CRISPR/Cas14a磁分离增强金纳米比色的核酸检测生物传感器。涉及CRISPR‑Cas14a反式切割生物素化寡核苷酸链(biotin‑S1),及磁珠复合物MB‑S1,用于捕获寡核苷酸链S2修饰的金纳米(AuNP‑S2)实现其磁下拉;特征过程涉及靶核酸诱导TWJ形成及等温指数扩增,其产物经脚趾介导链置换回收靶标实现多循环指数扩增;产物ssDNA激活CRISPR/Cas14a反式切割biotin‑S1,释放金纳米探针,磁分离后上清用于裸眼可视化检测;涉及针对特定靶结核分枝杆菌16S rDNA的特定三向结引物和模板,及含toehold的三向结介导多循环指数扩增和CRISPR/Cas14辅助磁分离增强AuNP比色用于结核分枝杆菌核酸的肉眼可视化检测的配方。

    一种针对BCR-ABL融合基因的高特异性探针的设计与制备方法

    公开(公告)号:CN116287232A

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202211357799.0

    申请日:2022-11-01

    发明人: 黄铮兰 何畏 高淼

    摘要: 在本专利中我们设计并制备了一种针对BCR‑ABL融合基因的高特异性探针,首次创新性的将CRISPR‑Cas12a系统运用到慢性髓细胞白血病特征性融合基因的检测中。由于BCR‑ABL是一种长链双链DNA结构,针对其这一特点我们创新性提出多位点识别这一方法。我们根据其核酸序列,寻找多处识别位点并设计多对探针在双链中进行识别。CRISPR‑Cas12a系统利用其独特的“侧枝效应”,可以在识别到目标序列时切割荧光报告分子释放荧光信号,我们可以通过检测该荧光信号完成对BCR‑ABL融合基因的定量检测,其检测原理见附图。根据我们的试验其最低检测限可以达到nM级别,基于该探针所建立的生物传感器在慢性髓细胞白血病的早期检测以及预后诊断中有广阔的应用前景。

    两亲性磁纳米颗粒及其磁液滴微流控技术中的应用

    公开(公告)号:CN116259460A

    公开(公告)日:2023-06-13

    申请号:CN202310258703.3

    申请日:2023-03-16

    IPC分类号: H01F1/00 B01L3/00 C09K23/00

    摘要: 本发明公开了两亲性磁纳米颗粒及其磁液滴微流控技术中的应用,涉及液滴操控技术领域,本发明采用内核包含磁性颗粒且表面修饰亲氟基团和亲水基团的纳米颗粒替换传统的液滴微流控的油相材料的有机表面活性剂,可避免由聚合物表面活性剂在吸附于油水界面时反胶束的形成,该反胶束被认为是疏水性小分子在液滴间泄漏的主因,本发明制备的磁性液滴具有良好的磁响应性和封闭性,由于该磁性材料可以自组装于液滴外表面,这样的液滴磁化方式极大地提高了磁性液滴操控体系的生物相容性,将拓展液滴操控技术的操控方式,具有制作简单、容易实现、成本低、寿命长等优势,在液滴分选、单细胞分选、单克隆抗体筛选、酶定向进化等领域的应用具有光明的前景。