一种检测食品中金黄色葡萄球菌及肠毒素A基因的方法

    公开(公告)号:CN104726576B

    公开(公告)日:2017-12-29

    申请号:CN201510111879.1

    申请日:2015-03-13

    IPC分类号: C12Q1/68 C12Q1/10

    摘要: 本发明公开了一种检测食品中金黄色葡萄球菌及肠毒素A基因的方法,及其检测靶基因、引物和探针。本发明方法为:使用PMA处理待测食品样品,消除死细菌DNA导致的定量过高问题;建立了快速定量检测食品中金黄色葡萄球菌活菌,筛查肠毒素A基因并能够指示PCR反应假阴性的PMA‑qPCR检测方法。该检测方法可以在5‑6h内,对食品中污染量在103‑108cfu/g范围内的金黄色葡萄球菌进行准确定量,以及肠毒素A基因的筛查。本发明建立的检测方法,特异性强,定量准确,检测速度快且能检测活菌。

    一种检测食品中金黄色葡萄球菌及肠毒素A基因的方法

    公开(公告)号:CN104726576A

    公开(公告)日:2015-06-24

    申请号:CN201510111879.1

    申请日:2015-03-13

    IPC分类号: C12Q1/68 C12Q1/10

    摘要: 本发明公开了一种检测食品中金黄色葡萄球菌及肠毒素A基因的方法,及其检测靶基因、引物和探针。本发明方法为:使用PMA处理待测食品样品,消除死细菌DNA导致的定量过高问题;建立了快速定量检测食品中金黄色葡萄球菌活菌,筛查肠毒素A基因并能够指示PCR反应假阴性的PMA-qPCR检测方法。该检测方法可以在5-6h内,对食品中污染量在103-108cfu/g范围内的金黄色葡萄球菌进行准确定量,以及肠毒素A基因的筛查。本发明建立的检测方法,特异性强,定量准确,检测速度快且能检测活菌。

    一种快速检测食品中致病菌的方法

    公开(公告)号:CN103160577B

    公开(公告)日:2014-10-22

    申请号:CN201310046266.5

    申请日:2013-02-05

    IPC分类号: C12Q1/68 C12Q1/06 C12Q1/04

    摘要: 本发明涉及食品安全领域,一种基于非标记的氨基化纳米磁珠捕获痕量基因组脱氧核糖核酸(DNA)结合聚合酶链式反应(PCR)快速检测食品中致病菌的方法。现有技术的缺点是:国标培养方法需要增菌,检测时间长;免疫检测方法需要高质量的抗体,且一种抗体只对应一种致病菌;单纯的PCR检测技术也需要前增菌,检测时间长。本发明方法为:制备适合于加入PCR体系中的氨基磁珠,捕获经过简单处理的食品样品中的DNA,最终结合物直接进行PCR检测。本发明的优点是:检测快速;价格低廉;灵敏度高;可针对不同致病菌检测,且可同时检测多种致病菌;可做半定量检测或定量检测。

    鸡白痢-伤寒沙门氏菌PCR检测方法及其中的核酸和引物对

    公开(公告)号:CN101748214B

    公开(公告)日:2012-08-22

    申请号:CN200910311245.5

    申请日:2009-12-11

    IPC分类号: C12Q1/68 C12Q1/10 C12N15/11

    CPC分类号: Y02A50/451

    摘要: 一种食品安全检验技术领域的鸡白痢-伤寒沙门氏菌PCR检测方法及其中的核酸和引物对;该方法包括如下步骤:根据序列SEQ ID NO:1设计扩增引物;提取样品DNA,PCR法扩增;凝胶电泳检测扩增产物,判断样品是否含有鸡白痢-伤寒沙门氏菌;所述判断具体为:如果电泳结果出现相应的单一扩增条带,则说明样品中含有鸡白痢-伤寒沙门氏菌;如果没有出现相应的单一扩增条,则样品中不含该菌;本发明还涉及一种核酸,其碱基序列如SEQ ID NO:1所示;本发明还涉及一种引物对,具体为碱基序列如SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3所示的核酸。采用本发明的检测方法检测鸡白痢-伤寒沙门氏菌,检测时间短,成本低,更加具有实用性,检测结果特异,结果判定简单。

    单核细胞增生李斯特菌荧光定量PCR检测试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN101805799A

    公开(公告)日:2010-08-18

    申请号:CN201010148950.0

    申请日:2010-04-17

    CPC分类号: Y02A50/451

    摘要: 一种食品安全技术领域的增生李斯特菌荧光定量PCR检测试剂盒及检测方法,其中的试剂盒包括:荧光定量PCR反应液、荧光探针、热启动TaqDNA聚合酶、标准阳性模板和阴性质控标准品;本发明通过采用常规方法提取待测样品DNA,并以所得DNA为模板,利用单核细胞增生李斯特菌荧光定量PCR检测试剂盒进行PCR扩增,得反应产物,之后将反应产物置于定量PCR仪中进行荧光检测,对样品中单核细胞增生李斯特菌进行定性检测或定量检测。本发明的试剂盒可用于单核细胞增生李斯特菌的定性和定量检测;本发明的试剂盒检测特异性高,检测灵敏度高,定量准确,检测速度快。

    异养培养小球藻的补料优化方法

    公开(公告)号:CN101186880A

    公开(公告)日:2008-05-28

    申请号:CN200710171221.5

    申请日:2007-11-29

    IPC分类号: C12N1/12

    摘要: 一种生物工程技术领域的异养培养小球藻的补料优化方法,包括如下步骤:(1)在发酵罐中进行小球藻的异养分批培养,建立小球藻异养生长的非结构动力学模型;(2)在动力学模型的基础上进行分批-补料培养的初步优化;(3)在多批培养的基础上建立混合神经网络模型;(4)在混合神经网络模型的基础上进行分批-补料培养的优化。本发明可使小球藻的最高细胞浓度和生产效率分别达到100g/l(干重)和1.0g/l/h以上。

    添加扩增内标的单核细胞增生李斯特菌PCR检测方法

    公开(公告)号:CN101177714A

    公开(公告)日:2008-05-14

    申请号:CN200710170421.9

    申请日:2007-11-15

    IPC分类号: C12Q1/68 C12Q1/04

    CPC分类号: Y02A50/451

    摘要: 本发明涉及的是一种生物技术领域用于食品安全的添加扩增内标的单核细胞增生李斯特菌PCR检测方法。包括以下步骤:人工合成一段扩增内标序列,设计对应的特异引物;通过对MgCl2浓度和退火温度Tm值进行优化选择;进行PCR检测、对照,选择对检测灵敏度影响最小且能够明确指示假阴性的扩增内标的浓度作为添加浓度;确定引物的特异性及扩增内标在非单核细胞增生李斯特菌样品检测中是否能够正常扩增;通过抗干扰实验判断PCR检测体系的稳定性,通过检测人工污染样品判断扩增内标是否指示假阴性,以此来评价建立的PCR检测体系的检测结果是否准确。本发明提高PCR检测的准确率,为满足检疫执法过程中所急需的对食源性致病菌调查和检测提供有效可靠的技术手段。

    一种抑制葡萄球菌黄素合成的抗菌剂及其应用

    公开(公告)号:CN114431232A

    公开(公告)日:2022-05-06

    申请号:CN202210215409.X

    申请日:2022-03-07

    IPC分类号: A01N31/08 A01N25/02 A01P1/00

    摘要: 本发明公开了一种抑制葡萄球菌黄素合成的抗菌剂及其应用,涉及微生物抗菌剂领域,该抗菌剂的组分包括百里酚和二甲基亚砜,其中,二甲基亚砜为溶剂。以及该抗菌剂在抑制金黄色葡萄球菌黄素合成中的应用。本发明将百里酚的二甲基亚砜溶液作为抑制葡萄球菌黄素合成的抗菌剂,在不影响菌株生长活力条件下抑制其葡萄球菌黄素合成,既防控耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染,又不引起金黄色葡萄球菌耐药性。

    一种基于显微红外光谱技术快速检测副溶血弧菌的方法

    公开(公告)号:CN103149173B

    公开(公告)日:2015-06-17

    申请号:CN201310072019.2

    申请日:2013-03-06

    IPC分类号: G01N21/35

    摘要: 本发明涉及食品安全领域,建立了一种基于显微红外光谱技术快速检测副溶血弧菌的方法。本发明方法为:利用显微红外光谱仪采集细菌的红外谱图,进行数据预处理后提取特征中红外波段(3000-2800cm-1、1800-1500cm-1、1500-1200cm-1、1200-800cm-1)的信息,进行主成分分析(Principle Component Analysis,PCA)以建立鉴别模型,进行类模拟软独立建模分析(Soft Independent Modeling of Class Analogy,SIMCA)以验证模型可靠性。本发明的优点是:结果可靠,特异性强,检测快速,操作简便,灵敏度高,普及性强,应用范围广;可特异鉴定副溶血弧菌;可检测正常和不同程度损伤状态的副溶血弧菌。