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公开(公告)号：CN102936621A
公开(公告)日：2013-02-20
申请号：CN201210308753.X
申请日：2012-08-27
申请人： 上海交通大学 , 中华人民共和国上海出入境检验检疫局
摘要： 本发明的提供一种新的蜡样芽孢杆菌的检测方法，该检测方法包括：1)提取待检测样品中的DNA；2)将步骤1)获得的DNA作为模板，进行实时荧光定量PCR检测；其中，实时荧光定量PCR检测的靶标为蜡样芽孢杆菌murB基因。本发明还提供一种蜡样芽孢杆菌的检测试剂盒，所述试剂盒包括用于扩增蜡样芽孢杆菌murB基因的引物。
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公开(公告)号：CN102676662A
公开(公告)日：2012-09-19
申请号：CN201210129384.8
申请日：2012-04-27
申请人： 上海交通大学 , 中华人民共和国上海出入境检验检疫局
摘要： 本发明公开了一种带有内标的，以沙门氏菌sigD/sigE基因为靶标的逆转录荧光定量PCR快速检测方法，其中包括经三次PCR扩增得到的RNA内标。另外，本发明还提供了相应试剂盒以及应用。本发明可广泛用于实验室研究、食品安全、医药卫生等众多领域，不但能避免假阴性漏检的现象以有效监控PCR扩增，而且沙门氏菌属的检测特异性强，可有效区分死细菌和活细菌，快速，检测灵敏度高，并可以应用于食品中沙门氏菌的高通量筛检。
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公开(公告)号：CN102936621B
公开(公告)日：2014-06-11
申请号：CN201210308753.X
申请日：2012-08-27
申请人： 上海交通大学 , 中华人民共和国上海出入境检验检疫局
摘要： 本发明的提供一种新的蜡样芽孢杆菌的检测方法，该检测方法包括：1)提取待检测样品中的DNA；2)将步骤1)获得的DNA作为模板，进行实时荧光定量PCR检测；其中，实时荧光定量PCR检测的靶标为蜡样芽孢杆菌murB基因。本发明还提供一种蜡样芽孢杆菌的检测试剂盒，所述试剂盒包括用于扩增蜡样芽孢杆菌murB基因的引物。
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公开(公告)号：CN102676662B
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201210129384.8
申请日：2012-04-27
申请人： 上海交通大学 , 中华人民共和国上海出入境检验检疫局
摘要： 本发明公开了一种带有内标的，以沙门氏菌sigD/sigE基因为靶标的逆转录荧光定量PCR快速检测方法，其中包括经三次PCR扩增得到的RNA内标。另外，本发明还提供了相应试剂盒以及应用。本发明可广泛用于实验室研究、食品安全、医药卫生等众多领域，不但能避免假阴性漏检的现象以有效监控PCR扩增，而且沙门氏菌属的检测特异性强，可有效区分死细菌和活细菌，快速，检测灵敏度高，并可以应用于食品中沙门氏菌的高通量筛检。
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公开(公告)号：CN104032000A
公开(公告)日：2014-09-10
申请号：CN201410253239.X
申请日：2012-08-27
申请人： 上海交通大学 , 中华人民共和国上海出入境检验检疫局
CPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2525/113 , C12Q2563/107
摘要： 本发明的提供一种新的蜡样芽孢杆菌的检测方法，该检测方法包括：1)提取待检测样品中的DNA；2)将步骤1)获得的DNA作为模板，进行实时荧光定量PCR检测；其中，实时荧光定量PCR检测的靶标为蜡样芽孢杆菌murB基因。本发明还提供一种蜡样芽孢杆菌的检测试剂盒，所述试剂盒包括用于扩增蜡样芽孢杆菌murB基因的引物。
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公开(公告)号：CN104032000B
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201410253239.X
申请日：2012-08-27
申请人： 上海交通大学 , 中华人民共和国上海出入境检验检疫局
摘要： 本发明的提供一种新的蜡样芽孢杆菌的检测方法，该检测方法包括：1)提取待检测样品中的DNA；2)将步骤1)获得的DNA作为模板，进行实时荧光定量PCR检测；其中，实时荧光定量PCR检测的靶标为蜡样芽孢杆菌murB基因。本发明还提供一种蜡样芽孢杆菌的检测试剂盒，所述试剂盒包括用于扩增蜡样芽孢杆菌murB基因的引物。
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公开(公告)号：CN104726576B
公开(公告)日：2017-12-29
申请号：CN201510111879.1
申请日：2015-03-13
申请人： 上海交通大学
摘要： 本发明公开了一种检测食品中金黄色葡萄球菌及肠毒素A基因的方法，及其检测靶基因、引物和探针。本发明方法为：使用PMA处理待测食品样品，消除死细菌DNA导致的定量过高问题；建立了快速定量检测食品中金黄色葡萄球菌活菌，筛查肠毒素A基因并能够指示PCR反应假阴性的PMA‑qPCR检测方法。该检测方法可以在5‑6h内，对食品中污染量在103‑108cfu/g范围内的金黄色葡萄球菌进行准确定量，以及肠毒素A基因的筛查。本发明建立的检测方法，特异性强，定量准确，检测速度快且能检测活菌。
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公开(公告)号：CN104726576A
公开(公告)日：2015-06-24
申请号：CN201510111879.1
申请日：2015-03-13
申请人： 上海交通大学
CPC分类号： C12Q1/6851 , C12Q2537/143 , C12Q2563/173 , C12Q2545/114
摘要： 本发明公开了一种检测食品中金黄色葡萄球菌及肠毒素A基因的方法，及其检测靶基因、引物和探针。本发明方法为：使用PMA处理待测食品样品，消除死细菌DNA导致的定量过高问题；建立了快速定量检测食品中金黄色葡萄球菌活菌，筛查肠毒素A基因并能够指示PCR反应假阴性的PMA-qPCR检测方法。该检测方法可以在5-6h内，对食品中污染量在103-108cfu/g范围内的金黄色葡萄球菌进行准确定量，以及肠毒素A基因的筛查。本发明建立的检测方法，特异性强，定量准确，检测速度快且能检测活菌。
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公开(公告)号：CN103160577B
公开(公告)日：2014-10-22
申请号：CN201310046266.5
申请日：2013-02-05
申请人： 上海交通大学
摘要： 本发明涉及食品安全领域，一种基于非标记的氨基化纳米磁珠捕获痕量基因组脱氧核糖核酸（DNA）结合聚合酶链式反应（PCR）快速检测食品中致病菌的方法。现有技术的缺点是：国标培养方法需要增菌，检测时间长；免疫检测方法需要高质量的抗体，且一种抗体只对应一种致病菌；单纯的PCR检测技术也需要前增菌，检测时间长。本发明方法为：制备适合于加入PCR体系中的氨基磁珠，捕获经过简单处理的食品样品中的DNA，最终结合物直接进行PCR检测。本发明的优点是：检测快速；价格低廉；灵敏度高；可针对不同致病菌检测，且可同时检测多种致病菌；可做半定量检测或定量检测。
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公开(公告)号：CN101748214B
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN200910311245.5
申请日：2009-12-11
申请人： 上海交通大学
CPC分类号： Y02A50/451
摘要： 一种食品安全检验技术领域的鸡白痢-伤寒沙门氏菌PCR检测方法及其中的核酸和引物对；该方法包括如下步骤：根据序列SEQ ID NO：1设计扩增引物；提取样品DNA，PCR法扩增；凝胶电泳检测扩增产物，判断样品是否含有鸡白痢-伤寒沙门氏菌；所述判断具体为：如果电泳结果出现相应的单一扩增条带，则说明样品中含有鸡白痢-伤寒沙门氏菌；如果没有出现相应的单一扩增条，则样品中不含该菌；本发明还涉及一种核酸，其碱基序列如SEQ ID NO：1所示；本发明还涉及一种引物对，具体为碱基序列如SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3所示的核酸。采用本发明的检测方法检测鸡白痢-伤寒沙门氏菌，检测时间短，成本低，更加具有实用性，检测结果特异，结果判定简单。
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