一种基因工程恶臭假单胞菌及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN103952429B

    公开(公告)日:2017-05-24

    申请号:CN201410180577.5

    申请日:2014-04-30

    摘要: 本发明公开了一种基因工程恶臭假单胞菌及其构建方法与应用。本发明对恶臭假单胞菌XPSN进行基因改造,构建6‑羟基‑3‑琥珀酰吡啶3‑羟化酶基因失活的基因工程恶臭假单胞菌P‑HSP。其构建方法包括步骤:引物设计、PCR扩增、构建敲除用重组质粒pK18mob‑hspB、将重组质粒转移入大肠杆菌S17‑1、双亲杂交。本发明还将基因工程恶臭假单胞菌P‑HSP作为生物催化剂应用于尼古丁转化反应生产6‑羟基‑3‑琥珀酰吡啶中。本发明中构建的基因工程菌株转化效率高,操作简便,菌株传代稳定,能够重复使用三次,降低了反应成本,具有重要的工业应用价值。

    有机溶剂应答的表达载体及其在生物催化中的应用

    公开(公告)号:CN102154357B

    公开(公告)日:2013-09-11

    申请号:CN201110004015.1

    申请日:2011-01-11

    摘要: 一种生物技术领域的有机溶剂应答的表达载体及其在生物催化中的应用,其中有机溶剂应答的宽宿主组成型表达载体,包括载体pMMS和载体pMMRS,由DNA元件、复制子RSF1010、筛选标记基因bla、多克隆位点、基因间序列和有机溶剂应答启动子Psrp组成,其特征在于,所述载体pMMS的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,所述载体pMMRS的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明在生物催化尤其是双液相生物催化中的优势。表现了较好的经济性和有效性且在高浓度有机溶剂存在条件下,用有机溶剂诱导载体构建的工程菌远好于用普通IPTG诱导载体构建的基因工程菌。

    用于制备L-乳酸的凝结芽孢杆菌及其应用方法

    公开(公告)号:CN102690764B

    公开(公告)日:2013-07-10

    申请号:CN201210115365.X

    申请日:2010-05-20

    IPC分类号: C12N1/20 C12P7/56 C12R1/07

    摘要: 一种乳酸制备技术领域的用于制备L-乳酸的凝结芽孢杆菌及其应用方法,以五碳糖或六碳糖为原料,或以含有五碳糖和六碳糖或其组合的农业和工业废弃物为原料,进行发酵后得到L-乳酸。应用本发明方法产量最高可达195g/L,光学纯度大于99%,糖酸转化率最高可达0.98,发酵生产能力2.7g/L/h。本发明提供的凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)XZL4(DSM No.23183)和XZL9(DSM No.23184)可以直接利用木糖醇生产副产物中的各种还原糖发酵生产高浓度L-乳酸,在节约成本的同时提高生产效率,适合于工业生产中推广应用。

    有机溶剂应答的表达载体及其在生物催化中的应用

    公开(公告)号:CN102154357A

    公开(公告)日:2011-08-17

    申请号:CN201110004015.1

    申请日:2011-01-11

    摘要: 一种生物技术领域的有机溶剂应答的表达载体及其在生物催化中的应用,其中有机溶剂应答的宽宿主组成型表达载体,包括载体pMMS和载体pMMRS,由DNA元件、复制子RSF1010、筛选标记基因bla、多克隆位点、基因间序列和有机溶剂应答启动子Psrp组成,其特征在于,所述载体pMMS的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,所述载体pMMRS的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明在生物催化尤其是双液相生物催化中的优势。表现了较好的经济性和有效性且在高浓度有机溶剂存在条件下,用有机溶剂诱导载体构建的工程菌远好于用普通IPTG诱导载体构建的基因工程菌。

    红平红球菌在清洗重油污垢中的应用

    公开(公告)号:CN101260378B

    公开(公告)日:2011-02-02

    申请号:CN200810094048.8

    申请日:2008-04-28

    IPC分类号: C12N1/20 C11D7/40 C12R1/01

    摘要: 本发明公开了红平红球菌(Rhodococcus erythropolis)在清洗重油污垢中的新用途,是利用红平红球菌(Rhodococcus erythropolis)产生的菌体细胞用水配成菌液,即可制成一种重油生物清洗剂。具体的,该重油生物清洗剂由红平红球菌(Rhodococcus erythropolis)菌株CCTCC M 205068培养的菌体细胞XP和水组成,其中,红平红球菌菌体细胞XP干重浓度为8-20g/L;更优化的浓度为12-15g/L。本发明与现有技术相比具有使用效果好,去油污力强,环境污染小等优点,可以清洗金属、塑料和玻璃等表面的重油污垢,可广泛用于对原油开采与生产场所中的工作平台、机器设备和零部件、容器、管道的清洗。

    一种菌及其获取方法和应用

    公开(公告)号:CN106190901A

    公开(公告)日:2016-12-07

    申请号:CN201610561771.7

    申请日:2016-07-15

    摘要: 本发明公开了一种菌及其获取方法和应用。该菌是具有联产1,3-丙二醇和D-乳酸的特性。进一步地该菌为产酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca),包括产酸克雷伯氏菌PDL-5CCTCC M 2016185。该菌的获取方法可以是通过直接从环境中筛选满足条件的野生菌,或者对野生菌进行基因工程改造。本发明的有益效果是通过发酵该菌可以联产1,3-丙二醇和D-乳酸,且两种产物都具有很高摩尔转化率和高浓度,同时副产物种类少且浓度低,有利于简化产物提取过程,可实现1,3-丙二醇和D-乳酸的高效生物法生产,具有很大的工业应用前景。

    一株基因工程菌及其在生产(2R,3R)-2,3-丁二醇中的应用

    公开(公告)号:CN104046586B

    公开(公告)日:2016-08-17

    申请号:CN201410314730.9

    申请日:2014-07-02

    IPC分类号: C12N1/20 C12P7/18 C12R1/01

    摘要: 本发明公开了一株基因工程菌,该菌命名为阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)SDM09,其已于2014年5月7日保藏于“中国典型培养物保藏中心”,保藏号为:CCTCC NO:M2014186。本发明还公开了所述基因工程菌在利用木质纤维素水解液生产(2R,3R)?2,3?丁二醇中的应用。实验证明本发明菌株具有明显利用秸秆水解液高产(2R,3R)?2,3?丁二醇的能力,为工业上规模化开发利用木质纤维素水解液生产(2R,3R)?2,3?丁二醇提供基础。

    用于制备L-乳酸的凝结芽孢杆菌及其应用方法

    公开(公告)号:CN101914465A

    公开(公告)日:2010-12-15

    申请号:CN201010176868.9

    申请日:2010-05-20

    IPC分类号: C12N1/20 C12P7/56 C12R1/07

    摘要: 一种乳酸制备技术领域的用于制备L-乳酸的凝结芽孢杆菌及其应用方法,以五碳糖或六碳糖为原料,或以含有五碳糖和六碳糖或其组合的农业和工业废弃物为原料,进行发酵后得到L-乳酸。应用本发明方法产量最高可达195g/L,光学纯度大于99%,糖酸转化率最高可达0.98,发酵生产能力2.7g/L/h。本发明提供的凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)XZL4(DSM No.23183)和XZL9(DSM No.23184)可以直接利用木糖醇生产副产物中的各种还原糖发酵生产高浓度L-乳酸,在节约成本的同时提高生产效率,适合于工业生产中推广应用。

    一种基因工程恶臭假单胞菌及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN103952429A

    公开(公告)日:2014-07-30

    申请号:CN201410180577.5

    申请日:2014-04-30

    摘要: 本发明公开了一种基因工程恶臭假单胞菌及其构建方法与应用。本发明对恶臭假单胞菌XPSN进行基因改造,构建6-羟基-3-琥珀酰吡啶3-羟化酶基因失活的基因工程恶臭假单胞菌P-HSP。其构建方法包括步骤:引物设计、PCR扩增、构建敲除用重组质粒pK18mob-hspB、将重组质粒转移入大肠杆菌S17-1、双亲杂交。本发明还将基因工程恶臭假单胞菌P-HSP作为生物催化剂应用于尼古丁转化反应生产6-羟基-3-琥珀酰吡啶中。本发明中构建的基因工程菌株转化效率高,操作简便,菌株传代稳定,能够重复使用三次,降低了反应成本,具有重要的工业应用价值。