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公开(公告)号：CN101153060A
公开(公告)日：2008-04-02
申请号：CN200710175298.X
申请日：2007-09-28
摘要： 本发明公开了用于评价HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶活性的融合蛋白及其应用，具体的融合蛋白EGFP－NS4A/4B－SEAP是融合基因EGFP－NS4A/4B－SEAP插入真核表达载体PCIneo形成指示载体EGFP(Δ4AB)SEAP后表达产生。融合蛋白EGFP－NS4A/4B－SEAP依靠EGFP在细胞内定位，在细胞内有NS3/4A丝氨酸蛋白酶共表达的情况下，在NS4A/4B处发生切割作用，使得SEAP游离出来并通过其自身的信号肽分泌到细胞外，通过测定胞外SEAP活性便可反映出HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶的活性。利用本发明可以简单、快速、灵敏而且可以定量指示丝氨酸蛋白酶活性，具有较高的实际应用价值，在医学领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN103374587B
公开(公告)日：2017-07-18
申请号：CN201210109631.8
申请日：2012-04-13
IPC分类号： C12N15/63 , C12N15/79 , A01K67/027
摘要： 本发明公开了一种以眼底静脉丛注射技术和静脉高压注射转染法为基础的小动物肝脏特异性基因转染方法。该方法将眼底静脉丛注射技术和静脉高压注射转染法巧妙地结合在一起，通过该方法可以使外源基因特异性地在动物肝脏中表达，且其对肝脏组织所造成的损伤作用是短暂的、有限的。通过转染可表达不同目的蛋白的外源基因，该技术可以用于多种动物模型的建立和基因治疗的效果评价。用本发明的方法可以评价不同外源基因在实验动物体内表达所引起的生物学反应，也可作为建立动物模型的一种手段，可广泛应用于各个门类的生物医学动物实验当中，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN1670216A
公开(公告)日：2005-09-21
申请号：CN200510059356.3
申请日：2005-03-28
IPC分类号： C12N15/85
摘要： 本发明公开了一种肝脏高效表达调控序列及其应用，其目的是提供一种肝脏高效表达调控序列及其在肝脏中表达外源基因中的应用。该序列是含有肝脏特异性启动子AAT－1202－+45和增强子Aer及ApoE的表达调控序列。所述增强子Aer和ApoE在载体中位于启动子AAT－1202－+45的上游。本发明所提供的肝脏表达调控序列可调控外源基因地高效表达，弥补了低水平转录活性不强的缺点。本发明具有较高的实际应用价值，在医学领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN101985477A
公开(公告)日：2011-03-16
申请号：CN200910244211.9
申请日：2009-12-29
摘要： 本发明公开了一种用于评价HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶抑制剂的融合蛋白及其应用。所述融合蛋白是以萤火虫荧光素酶为报告基因，两个可紧密结合的小分子多肽分别与N端和C端的萤火虫荧光素酶片段结合，中间由NS3/4A丝氨酸蛋白酶作用底物相连，然后将此融合基因插入真核表达载体形成指示载体后表达产生。利用本发明提供的指示载体，不仅可简单、快速、灵敏而且可以定量指示丝氨酸蛋白酶活性，具有较高的实际应用价值，在医学领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN1328583C
公开(公告)日：2007-07-25
申请号：CN200410062222.2
申请日：2004-06-30
IPC分类号： G01N33/531 , G01N33/547 , G01N1/38
摘要： 本发明公开一种血清或血浆样品稀释液，用在夹心ELISA检测人脂肪细胞补体相关蛋白(Acrp30)中稀释血清(血浆)样品，它包括一种还原剂及缓冲组分，具体可以由25mM DTT、100mM pH8.0的Tris缓冲液、2mM pH8.0的EDTA、和200mM NaCl组成。使用本发明稀释液可以使样品处理、稀释、上样一次完成，并且使得待检样品稀释前后无须煮沸处理，操作简便，并通过改变反应条件，缩短了反应时间，实现了对人血清(血浆)Acrp30蛋白快速定量检测。
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公开(公告)号：CN1712529A
公开(公告)日：2005-12-28
申请号：CN200410049703.X
申请日：2004-06-24
摘要： 本发明公开了一种嵌合型病毒样颗粒疫苗载体蛋白及其制备方法与应用，目的是提供一种通用、高效的嵌合型病毒样颗粒疫苗载体蛋白以及以该载体蛋白为基础的疫苗。本发明所提供的载体蛋白，按如下方法得到：1)将包含酶切位点的连接子序列编码基因片段插入到HBcAg的e1环区域的DNA序列中，得到嵌合基因；2)将嵌合基因克隆到表达载体中，表达后得到载体蛋白。将靶抗原表位连接到所述载体蛋白的连接子序列区域后融合而成的蛋白质，即为所需的病毒样颗粒疫苗。利用本发明构建的具有通用性的嵌合型病毒样颗粒疫苗载体蛋白，能够大大简化病毒样颗粒疫苗的设计和制备过程，具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN103374587A
公开(公告)日：2013-10-30
申请号：CN201210109631.8
申请日：2012-04-13
IPC分类号： C12N15/63 , C12N15/79 , A01K67/027
摘要： 本发明公开了一种以眼底静脉丛注射技术和静脉高压注射转染法为基础的小动物肝脏特异性基因转染方法。该方法将眼底静脉丛注射技术和静脉高压注射转染法巧妙地结合在一起，通过该方法可以使外源基因特异性地在动物肝脏中表达，且其对肝脏组织所造成的损伤作用是短暂的、有限的。通过转染可表达不同目的蛋白的外源基因，该技术可以用于多种动物模型的建立和基因治疗的效果评价。用本发明的方法可以评价不同外源基因在实验动物体内表达所引起的生物学反应，也可作为建立动物模型的一种手段，可广泛应用于各个门类的生物医学动物实验当中，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN100537762C
公开(公告)日：2009-09-09
申请号：CN200410049703.X
申请日：2004-06-24
摘要： 本发明公开了一种嵌合型病毒样颗粒疫苗载体蛋白及其制备方法与应用，目的是提供一种通用、高效的嵌合型病毒样颗粒疫苗载体蛋白以及以该载体蛋白为基础的疫苗。本发明所提供的载体蛋白，按如下方法得到：1)将包含酶切位点的连接子序列编码基因片段插入到HBcAg的e1环区域的DNA序列中，得到嵌合基因；2)将嵌合基因克隆到表达载体中，表达后得到载体蛋白。将靶抗原表位连接到所述载体蛋白的连接子序列区域后融合而成的蛋白质，即为所需的病毒样颗粒疫苗。利用本发明构建的具有通用性的嵌合型病毒样颗粒疫苗载体蛋白，能够大大简化病毒样颗粒疫苗的设计和制备过程，具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN100338220C
公开(公告)日：2007-09-19
申请号：CN200510059356.3
申请日：2005-03-28
摘要： 本发明公开了一种肝脏高效表达调控序列及其应用，其目的是提供一种肝脏高效表达调控序列及其在肝脏中表达外源基因中的应用。该序列为序列表中SEQ ID №：1或SEQ ID №：2所示核苷酸序列，其中，含有肝脏特异性启动子AAT-1202-+45和增强子Aer及ApoE，所述增强子Aer和ApoE位于启动子AAT-1202-+45的上游。所述增强子Aer和ApoE在载体中位于启动子AAT-1202-+45的上游。本发明所提供的肝脏表达调控序列可调控外源基因地高效表达，弥补了低水平转录活性不强的缺点。本发明具有较高的实际应用价值，在医学领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN1715920A
公开(公告)日：2006-01-04
申请号：CN200410062222.2
申请日：2004-06-30
IPC分类号： G01N33/531 , G01N33/547 , G01N1/38
摘要： 本发明公开一种血清或血浆样品稀释液，用在夹心ELISA检测人脂肪细胞补体相关蛋白(Acrp30)中稀释血清(血浆)样品，它包括一种还原剂及缓冲组分，具体可以由25mM DTT、100mM pH8.0的Tris缓冲液、2mM pH8.0的EDTA、和200mM NaCl组成。使用本发明稀释液可以使样品处理、稀释、上样一次完成，并且使得待检样品稀释前后无须煮沸处理，操作简便，并通过改变反应条件，缩短了反应时间，实现了对人血清(血浆)Acrp30蛋白快速定量检测。
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