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公开(公告)号:CN103698261A
公开(公告)日:2014-04-02
申请号:CN201410006630.X
申请日:2014-01-07
申请人: 中国人民解放军第三军医大学
IPC分类号: G01N15/14
摘要: 本发明公开了利用RORγt为标记物分选LTi细胞的方法,包括如下步骤:制备淋巴细胞悬液或外周血单个核细胞,然后加入同种类荧光标记的CD3、CD19、CD11c、Gr-1和NKp46抗体,孵育,PBS洗涤,得洗涤细胞;将洗涤细胞固定、清洗、离心,然后进行打孔,经染色后加入与上述不同荧光标记的RORγt抗体,避光反应后清洗细胞,离心,最后上流式细胞仪进行分选CD3、CD19、CD11c、Gr-1CD4、NKp46阴性、RORγt阳性的细胞,得LTi细胞,利用此方法分选LTi细胞,其方法简单,分选获得的LTi细胞纯度高,达95.7%。
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公开(公告)号:CN103555667B
公开(公告)日:2015-06-03
申请号:CN201310489260.5
申请日:2013-10-17
申请人: 中国人民解放军第三军医大学
IPC分类号: C12N5/0783
摘要: 本发明公开了利用重组人IL-26分选小鼠Th17细胞的方法,具体为收集小鼠外周血,分离单核细胞,然后用PBS洗涤,离心收集细胞,用PBS液重悬后分离CD4+CD45RO+T细胞;然后将CD4+CD45RO+T细胞用同种荧光标记的IL23R、CD161、CCR6三种抗体染色,用流式细胞仪分选IL23R、CD161和CCR6为阴性的细胞,得IL23R-CD161-CCR6-细胞;所得IL23R-CD161-CCR6-细胞用小鼠CD3抗体和重组人IL-26刺激细胞,得小鼠Th17细胞,获得的小鼠Th17细胞具有活性功能,并且纯度高,其纯度达87%,为体外研究Th17细胞奠定了基础。
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公开(公告)号:CN103555667A
公开(公告)日:2014-02-05
申请号:CN201310489260.5
申请日:2013-10-17
申请人: 中国人民解放军第三军医大学
IPC分类号: C12N5/0783
摘要: 本发明公开了利用重组人IL-26分选小鼠Th17细胞的方法,具体为收集小鼠外周血,分离单核细胞,然后用PBS洗涤,离心收集细胞,用PBS液重悬后分离CD4+CD45RO+T细胞;然后将CD4+CD45RO+T细胞用同种荧光标记的IL23R、CD161、CCR6三种抗体染色,用流式细胞仪分选IL23R、CD161和CCR6为阴性的细胞,得IL23R-CD161-CCR6-细胞;所得IL23R-CD161-CCR6-细胞用小鼠CD3抗体和重组人IL-26刺激细胞,得小鼠Th17细胞,获得的小鼠Th17细胞具有活性功能,并且纯度高,其纯度达87%,为体外研究Th17细胞奠定了基础。
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公开(公告)号:CN102732562A
公开(公告)日:2012-10-17
申请号:CN201210215844.9
申请日:2012-06-27
申请人: 中国人民解放军第三军医大学
摘要: 本发明涉及基因领域,特别涉及抑制CYP2C8基因表达的方法,具体为:将RIP140的siRNA转染入靶细胞中,所述RIP140的干扰片段如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3中任一所示,所述RIP140的核苷酸序列如SEQ IDNO:10所示;本发明证实:RIP140和HSP90蛋白是真正的RORγ相互作用蛋白,进一步通过RNA干扰证实RIP140和HSP90蛋白能上调RORγ介导的CYP2C8基因的表达。这些结果支持了RORγ与其相互作用蛋白结合形成复合体,进而发挥转录下游靶基因的作用。
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公开(公告)号:CN103698261B
公开(公告)日:2016-04-13
申请号:CN201410006630.X
申请日:2014-01-07
申请人: 中国人民解放军第三军医大学
IPC分类号: G01N15/14
摘要: 本发明公开了利用RORγt为标记物分选LTi细胞的方法,包括如下步骤:制备淋巴细胞悬液或外周血单个核细胞,然后加入同种类荧光标记的CD3、CD19、CD11c、Gr-1和NKp46抗体,孵育,PBS洗涤,得洗涤细胞;将洗涤细胞固定、清洗、离心,然后进行打孔,经染色后加入与上述不同荧光标记的RORγt抗体,避光反应后清洗细胞,离心,最后上流式细胞仪进行分选CD3、CD19、CD11c、Gr-1CD4、NKp46阴性、RORγt阳性的细胞,得LTi细胞,利用此方法分选LTi细胞,其方法简单,分选获得的LTi细胞纯度高,达95.7%。
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公开(公告)号:CN102757504A
公开(公告)日:2012-10-31
申请号:CN201210215680.X
申请日:2012-06-27
申请人: 中国人民解放军第三军医大学
摘要: 本发明涉及RORγ-CTAP融合蛋白,所述RORγ-CTAP融合蛋白从氨基末端到羧基末端依次由RORγ和CTAP融合标签组成,所述RORγ指维甲酸相关孤儿核受体γ,所述CTAP融合标从氨基末端到羧基末端依次由SBP、TEV蛋白酶切位点以及protG组成,RORγ相互作用蛋白的捕获方法为:用RORγ抗体、protG抗体和SBP抗体中任一种或多种对核蛋白进行蛋白印迹检测,并通过显影定影技术获得蛋白条带,所述蛋白条带为RORγ相互作用蛋白;本发明中构建的RORγ-CTAP融合基因序列准确且各组成部分表达正确,能够用于细胞内RORγ蛋白复合物的纯化,适用于大多数实验室在进行RORγ蛋白质复合物研究时采用,具有良好的推广应用价值。
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公开(公告)号:CN203044415U
公开(公告)日:2013-07-10
申请号:CN201220705783.X
申请日:2012-12-19
申请人: 中国人民解放军第三军医大学
摘要: 本实用新型一种实验室清洗装置,包括磁力搅拌器和磁力搅拌器上的清洗杯,所述清洗杯包括杯体和杯体内的毛刷。所述毛刷包括顶刷、底刷和侧刷,所述顶刷沿杯口形状设置,所述底刷沿杯底形状设置,所述侧刷沿杯壁均匀间隔设置且与顶刷和底刷连接。利用磁力搅拌器使清洗杯内的清洗液产生旋转,使放入到清洗杯中的塑料实验仪器跟随着清洗液旋转。在旋转过程中,塑料实验仪器不断的受到清洗杯内的毛刷摩擦和水流的冲刷,达到清洁的目的。本实用新型结构简单,清洗过程全程自动进行,无需人工干预,清洗效果佳,帮助实验室工作人员摆脱繁重的手工清洗劳动,提高工作效率。
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