公开(公告)号：CN117286140A

公开(公告)日：2023-12-26

申请号：CN202311345616.8

申请日：2023-10-18

申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院

发明人： 阳莎 ,  唱凯 ,  冯柳 ,  陈鸣 ,  邓杰忠 ,  陈志国 ,  赵著洋 ,  罗兴 ,  邓瑞佳 ,  盛静

IPC分类号： C12N15/11 ,  C12Q1/6841 ,  C12Q1/6886

摘要： 本发明属于分子生物学的技术领域，具体涉及一种探针组合及其构建靶向细胞原位成像的方法和应用。本发明提供的探针组合SEQ ID No.1～SEQ IDNo.8，能够基于临近杂交反应触发肿瘤细胞形成树枝状纳米结构，进而在肿瘤细胞的表面形成荧光信号，具有高效、快速、准确的特点。

公开(公告)号：CN116479091A

公开(公告)日：2023-07-25

申请号：CN202310354767.3

申请日：2023-04-04

申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院

发明人： 阳莎 ,  陈鸣 ,  唱凯 ,  董振宇 ,  冯柳 ,  陈志国 ,  赵著洋 ,  罗洁

IPC分类号： C12Q1/682

摘要： 本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种基于SplintR连接酶触发的磁珠表面原位滚环扩增的microRNA检测方法。包括以下步骤：S1：寡核苷酸DNA单链P1、P2在SplintR连接酶的作用下与靶标microRNA形成P1‑P2‑miRNA双链复合物，再通过加热变性使得双链复合物释放成P1‑P2单链和microRNA；S2：链霉亲和素修饰的磁珠吸附富集P1‑P2单链；S3：磁珠表面进行原位滚环扩增，原位滚环扩增将P2段作为RCA反应引物序列；S4：荧光检测。本发明方法通过靶标microRNA支架连接两条单链DNA，结合磁珠表面原位RCA实现microRNA的单碱基错配识别，达到高特异、高灵敏、快速检测。

公开(公告)号：CN118530997A

公开(公告)日：2024-08-23

申请号：CN202410594583.9

申请日：2024-05-14

申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院

发明人： 阳莎 ,  陈鸣 ,  唱凯 ,  罗兴 ,  邓瑞佳 ,  袁梨嘉 ,  盛静 ,  冯柳 ,  王若丁 ,  赵著洋 ,  何远 ,  张利改 ,  肖婷 ,  杨泓钊

IPC分类号： C12N15/115 ,  C12N15/11 ,  G01N21/64 ,  G01N33/483

摘要： 本发明涉及肿瘤细胞检测技术领域，特别是涉及一种单钳状三链螺旋复合体、基因回路及其应用。所述单钳状三链螺旋复合体由序列1、序列2和序列3构建得到，所述核苷酸序列依次如SEQ ID No.1～3所示。本发明的基因回路的检测限可计算为9cells/mL，基因回路抗干扰能力强，具有在复杂的生物样品中进行实际检测的能力。

公开(公告)号：CN118530996A

公开(公告)日：2024-08-23

申请号：CN202410594579.2

申请日：2024-05-14

申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院

发明人： 阳莎 ,  唱凯 ,  陈鸣 ,  罗兴 ,  邓瑞佳 ,  冯柳 ,  袁梨嘉 ,  杨泓钊 ,  赵著洋 ,  何远 ,  张利改 ,  王若丁 ,  肖婷

IPC分类号： C12N15/115 ,  C12N15/11 ,  G01N21/64 ,  G01N33/483

摘要： 本发明涉及肿瘤细胞检测技术领域，特别是涉及一种双钳状三链螺旋复合体、基因回路和制备CTCs‑EMT表型分析试剂中的应用。所述双钳状三链螺旋复合体由序列1、序列2、序列3和序列4构建得到；所述序列1～4的核苷酸序列如SEQ ID No.1～4所示。绿色荧光(MFICSV)增加而红色荧光(MFIEpCAM)减少，表明CTCs‑EMT过程中间质标志物CSV表达增加而上皮标志物EpCAM表达减少。同样通过基于抗原‑抗体相互作用检测的WB和FCM验证标志物CSV和EpCAM的表达情况，结果表明这三种方法具有良好的一致性，证明了双钳状基因回路用于CTCs‑EMT表型分析结果的可靠性。

公开(公告)号：CN116479091B

公开(公告)日：2024-05-21

申请号：CN202310354767.3

申请日：2023-04-04

申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院

发明人： 阳莎 ,  陈鸣 ,  唱凯 ,  董振宇 ,  冯柳 ,  陈志国 ,  赵著洋 ,  罗洁

IPC分类号： C12Q1/682

摘要： 本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种基于SplintR连接酶触发的磁珠表面原位滚环扩增的microRNA检测方法。包括以下步骤：S1：寡核苷酸DNA单链P1、P2在SplintR连接酶的作用下与靶标microRNA形成P1‑P2‑miRNA双链复合物，再通过加热变性使得双链复合物释放成P1‑P2单链和microRNA；S2：链霉亲和素修饰的磁珠吸附富集P1‑P2单链；S3：磁珠表面进行原位滚环扩增，原位滚环扩增将P2段作为RCA反应引物序列；S4：荧光检测。本发明方法通过靶标microRNA支架连接两条单链DNA，结合磁珠表面原位RCA实现microRNA的单碱基错配识别，达到高特异、高灵敏、快速检测。

公开(公告)号：CN117330748B

公开(公告)日：2024-05-07

申请号：CN202311305928.6

申请日：2023-10-10

申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院

发明人： 阳莎 ,  陈鸣 ,  唱凯 ,  赵著洋 ,  冯柳 ,  董振宇 ,  罗兴 ,  陈志国 ,  邓瑞佳 ,  盛静 ,  袁梨嘉 ,  陈卓

IPC分类号： G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  C12Q1/6844 ,  G01N27/327

摘要： 本发明公开了基于4‑WJ结构触发的双重RCA扩增的电化学外泌体检测体系，属于肿瘤检测领域；电化学外泌体检测体系包括电化学传感器的工作电极，通过金电极表面修饰纳米金颗粒以提高金电极表面积并有助于结合适配体1，在适配体1捕获靶外泌体后，外泌体进一步结合适配体2形成“三明治夹心”结构，该结构通过双重适配体可以显著提高检测特异性。随后，通过DNA四向连接结构(DNA four‑way junction，4‑WJ)触发的双重RCA体系实现目标信号的指数扩增；最后，通过亚甲基蓝/G‑四联体DNA酶技术有助于电化学信号的进一步放大，实现高灵敏度检测。

公开(公告)号：CN117330748A

公开(公告)日：2024-01-02

申请号：CN202311305928.6

申请日：2023-10-10

申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院

发明人： 阳莎 ,  陈鸣 ,  唱凯 ,  赵著洋 ,  冯柳 ,  董振宇 ,  罗兴 ,  陈志国 ,  邓瑞佳 ,  盛静 ,  袁梨嘉 ,  陈卓

IPC分类号： G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  C12Q1/6844 ,  G01N27/327

摘要： 本发明公开了基于4‑WJ结构触发的双重RCA扩增的电化学外泌体检测体系，属于肿瘤检测领域；电化学外泌体检测体系包括电化学传感器的工作电极，通过金电极表面修饰纳米金颗粒以提高金电极表面积并有助于结合适配体1，在适配体1捕获靶外泌体后，外泌体进一步结合适配体2形成“三明治夹心”结构，该结构通过双重适配体可以显著提高检测特异性。随后，通过DNA四向连接结构(DNA four‑way junction，4‑WJ)触发的双重RCA体系实现目标信号的指数扩增；最后，通过亚甲基蓝/G‑四联体DNA酶技术有助于电化学信号的进一步放大，实现高灵敏度检测。