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公开(公告)号：CN118853963A
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202411121131.5
申请日：2024-08-15
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6816 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了DNA水凝胶介导纸基微流控3D打印的多种呼吸道病原体便携式检测平台及其应用，检测平台包括微流控纸分析装置、丙烯酰胺‑DNA凝胶和靶标解离R‑S互补结构；所述微流控纸分析装置包括纸基水凝胶反应层和检测显色层，所述纸基水凝胶反应层位于检测显色层上方；检测过程中将丙烯酰胺‑DNA凝胶和显色液加入反应区，检测样品制备成短靶RNA后加入样品区，经通道流至反应区；当存在靶标时，靶标序列打开靶标解离R‑S，释放的单链与凝胶交联序列互补从而解离水凝胶，凝胶解离后显色液流动至显色层并产生“颜色信号”；可用于多种目标检测，并且具有操作简单、低成本、快速、即时检测的优点。
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公开(公告)号：CN114934099B
公开(公告)日：2024-09-27
申请号：CN202210636366.2
申请日：2022-06-07
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： C12Q1/6825 , C12N15/11
摘要： 本发明提供了一种基于DNAzyme变构调节的DNA四面体样纳米机器、miRNA检测方法及应用，涉及miRNA检测技术领域技术领域。本发明提供了一种基于DNAzyme变构调节的DNA四面体样纳米机器，所述纳米机器由寡核苷酸链P1‑P5和一条抑制剂链组成。本发明所述的DNA四面体样纳米机器使DNAzyme和底物在空间上更加接近，并在一定程度上包裹DNAzyme，可显著增强DNAzyme的灵敏度、细胞渗透能力和抗酶降解能力。
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公开(公告)号：CN116479091B
公开(公告)日：2024-05-21
申请号：CN202310354767.3
申请日：2023-04-04
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： C12Q1/682
摘要： 本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种基于SplintR连接酶触发的磁珠表面原位滚环扩增的microRNA检测方法。包括以下步骤：S1：寡核苷酸DNA单链P1、P2在SplintR连接酶的作用下与靶标microRNA形成P1‑P2‑miRNA双链复合物，再通过加热变性使得双链复合物释放成P1‑P2单链和microRNA；S2：链霉亲和素修饰的磁珠吸附富集P1‑P2单链；S3：磁珠表面进行原位滚环扩增，原位滚环扩增将P2段作为RCA反应引物序列；S4：荧光检测。本发明方法通过靶标microRNA支架连接两条单链DNA，结合磁珠表面原位RCA实现microRNA的单碱基错配识别，达到高特异、高灵敏、快速检测。
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公开(公告)号：CN117471097A
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202311457027.9
申请日：2023-11-03
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： G01N33/569 , C12N15/115 , C12N15/113 , G01N33/531 , G01N33/533
摘要： 本发明公开了基于金纳米滤膜和功能化DNA水凝胶的“一锅法”预制反应管及其制备方法和应用，反应管含管盖和管底上下两部分功能区，其特征在于，所述管盖固定有比色滤膜，所述比色滤膜由金纳米滤膜和NaCl滤膜组成；所述管底含有功能化DNA水凝胶和Cas12a/crRNA蛋白复合体；本发明实现了对外泌体的可视化检测和定量检测，从得到样本到看到结果无需加入额外试剂、无需开盖、无实验室设备，可直接裸眼观察颜色变化，在疾病标志物快速筛查领域具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN117233384A
公开(公告)日：2023-12-15
申请号：CN202311201226.3
申请日：2023-09-18
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： G01N33/569 , C08J3/075 , C08L33/26 , C08L89/00 , G01N33/574 , G01N33/58
摘要： 本发明公开了检测外泌体的DNA复合水凝胶及其制备方法和应用，DNA复合水凝胶由两条聚丙烯酰胺通过2个DNAⅠ‑适配体‑DNAⅡ交联结构将Cas蛋白封装于聚丙烯酰胺内，作为检测特定靶序列的传感平台，外泌体表面蛋白与靶序列杂交反应后，DNAⅠ‑适配体‑DNAⅡ交联结构崩塌，释放封装的Cas蛋白，利用Cas蛋白切割活性从而实现可视化的凝胶自放大光学信号定量分析，以达到对肿瘤细胞分泌的外泌体的特异性检测及定量分析，本发明的方法灵敏度高、特异性好，为临床肿瘤的早期筛查诊断提供技术支持。
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公开(公告)号：CN116479091A
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202310354767.3
申请日：2023-04-04
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： C12Q1/682
摘要： 本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种基于SplintR连接酶触发的磁珠表面原位滚环扩增的microRNA检测方法。包括以下步骤：S1：寡核苷酸DNA单链P1、P2在SplintR连接酶的作用下与靶标microRNA形成P1‑P2‑miRNA双链复合物，再通过加热变性使得双链复合物释放成P1‑P2单链和microRNA；S2：链霉亲和素修饰的磁珠吸附富集P1‑P2单链；S3：磁珠表面进行原位滚环扩增，原位滚环扩增将P2段作为RCA反应引物序列；S4：荧光检测。本发明方法通过靶标microRNA支架连接两条单链DNA，结合磁珠表面原位RCA实现microRNA的单碱基错配识别，达到高特异、高灵敏、快速检测。
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公开(公告)号：CN114934046A
公开(公告)日：2022-08-23
申请号：CN202210636342.7
申请日：2022-06-07
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： C12N15/11 , C12Q1/6806 , C12Q1/682 , C12Q1/6886
摘要： 本发明提供了熵驱动DNA链置换四面体的microRNA检测方法及其应用，涉及microRNA检测技术领域。本发明提供了熵驱动DNA四面体纳米探针，由P1‑P6六条单链DNA通过碱基互补配对得到。本发明利用DNA四面体的一条边作为双链复合体，一个顶点自组装燃料链，以DNA四面体作为穿膜载体，以熵驱动DNA链置换动态回路实现细胞内靶标microRNA的无酶恒温级联放大，可以实现细胞内单个分子在微‑纳尺度的原位在体检测，具有良好的灵敏度和特异性。
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公开(公告)号：CN116008546A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202210891788.4
申请日：2022-07-27
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： G01N33/573 , G01N33/58 , C12Q1/682
摘要： 本发明公开了DNA链置换的四面体纳米探针在制备基于熵驱动检测ATP的试剂中的应用及方法和产品，通过精确编程设计双链复合体和燃料链，使得一条触发序列的存在即可启动双链复合体和燃料连的一系列级联链置换反应，并促使触发序列在杂交‑链置换‑解离‑再杂交过程的循环利用，将熵驱动DNA链置换动态回路与四面体有机结合，实现无酶恒温的情况下，成对ATP的高灵敏高特异检测，在操作的简单性及性价比上具有较大的优势。
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公开(公告)号：CN114934046B
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202210636342.7
申请日：2022-06-07
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： C12N15/11 , C12Q1/6806 , C12Q1/682 , C12Q1/6886
摘要： 本发明提供了熵驱动DNA链置换四面体的microRNA检测方法及其应用，涉及microRNA检测技术领域。本发明提供了熵驱动DNA四面体纳米探针，由P1‑P6六条单链DNA通过碱基互补配对得到。本发明利用DNA四面体的一条边作为双链复合体，一个顶点自组装燃料链，以DNA四面体作为穿膜载体，以熵驱动DNA链置换动态回路实现细胞内靶标microRNA的无酶恒温级联放大，可以实现细胞内单个分子在微‑纳尺度的原位在体检测，具有良好的灵敏度和特异性。
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公开(公告)号：CN114934099A
公开(公告)日：2022-08-23
申请号：CN202210636366.2
申请日：2022-06-07
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： C12Q1/6825 , C12N15/11
摘要： 本发明提供了一种基于DNAzyme变构调节的DNA四面体样纳米机器、miRNA检测方法及应用，涉及miRNA检测技术领域技术领域。本发明提供了一种基于DNAzyme变构调节的DNA四面体样纳米机器，所述纳米机器由寡核苷酸链P1‑P5和一条抑制剂链组成。本发明所述的DNA四面体样纳米机器使DNAzyme和底物在空间上更加接近，并在一定程度上包裹DNAzyme，可显著增强DNAzyme的灵敏度、细胞渗透能力和抗酶降解能力。
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