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公开(公告)号：CN117286140A
公开(公告)日：2023-12-26
申请号：CN202311345616.8
申请日：2023-10-18
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： C12N15/11 , C12Q1/6841 , C12Q1/6886
摘要： 本发明属于分子生物学的技术领域，具体涉及一种探针组合及其构建靶向细胞原位成像的方法和应用。本发明提供的探针组合SEQ ID No.1～SEQ IDNo.8，能够基于临近杂交反应触发肿瘤细胞形成树枝状纳米结构，进而在肿瘤细胞的表面形成荧光信号，具有高效、快速、准确的特点。
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公开(公告)号：CN117233384A
公开(公告)日：2023-12-15
申请号：CN202311201226.3
申请日：2023-09-18
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： G01N33/569 , C08J3/075 , C08L33/26 , C08L89/00 , G01N33/574 , G01N33/58
摘要： 本发明公开了检测外泌体的DNA复合水凝胶及其制备方法和应用，DNA复合水凝胶由两条聚丙烯酰胺通过2个DNAⅠ‑适配体‑DNAⅡ交联结构将Cas蛋白封装于聚丙烯酰胺内，作为检测特定靶序列的传感平台，外泌体表面蛋白与靶序列杂交反应后，DNAⅠ‑适配体‑DNAⅡ交联结构崩塌，释放封装的Cas蛋白，利用Cas蛋白切割活性从而实现可视化的凝胶自放大光学信号定量分析，以达到对肿瘤细胞分泌的外泌体的特异性检测及定量分析，本发明的方法灵敏度高、特异性好，为临床肿瘤的早期筛查诊断提供技术支持。
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公开(公告)号：CN116479091A
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202310354767.3
申请日：2023-04-04
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： C12Q1/682
摘要： 本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种基于SplintR连接酶触发的磁珠表面原位滚环扩增的microRNA检测方法。包括以下步骤：S1：寡核苷酸DNA单链P1、P2在SplintR连接酶的作用下与靶标microRNA形成P1‑P2‑miRNA双链复合物，再通过加热变性使得双链复合物释放成P1‑P2单链和microRNA；S2：链霉亲和素修饰的磁珠吸附富集P1‑P2单链；S3：磁珠表面进行原位滚环扩增，原位滚环扩增将P2段作为RCA反应引物序列；S4：荧光检测。本发明方法通过靶标microRNA支架连接两条单链DNA，结合磁珠表面原位RCA实现microRNA的单碱基错配识别，达到高特异、高灵敏、快速检测。
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公开(公告)号：CN114934046A
公开(公告)日：2022-08-23
申请号：CN202210636342.7
申请日：2022-06-07
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： C12N15/11 , C12Q1/6806 , C12Q1/682 , C12Q1/6886
摘要： 本发明提供了熵驱动DNA链置换四面体的microRNA检测方法及其应用，涉及microRNA检测技术领域。本发明提供了熵驱动DNA四面体纳米探针，由P1‑P6六条单链DNA通过碱基互补配对得到。本发明利用DNA四面体的一条边作为双链复合体，一个顶点自组装燃料链，以DNA四面体作为穿膜载体，以熵驱动DNA链置换动态回路实现细胞内靶标microRNA的无酶恒温级联放大，可以实现细胞内单个分子在微‑纳尺度的原位在体检测，具有良好的灵敏度和特异性。
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公开(公告)号：CN116008546B
公开(公告)日：2024-07-09
申请号：CN202210891788.4
申请日：2022-07-27
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： G01N33/573 , G01N33/58 , C12Q1/682
摘要： 本发明公开了DNA链置换的四面体纳米探针在制备基于熵驱动检测ATP的试剂中的应用及方法和产品，通过精确编程设计双链复合体和燃料链，使得一条触发序列的存在即可启动双链复合体和燃料连的一系列级联链置换反应，并促使触发序列在杂交‑链置换‑解离‑再杂交过程的循环利用，将熵驱动DNA链置换动态回路与四面体有机结合，实现无酶恒温的情况下，成对ATP的高灵敏高特异检测，在操作的简单性及性价比上具有较大的优势。
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公开(公告)号：CN117451816A
公开(公告)日：2024-01-26
申请号：CN202311664171.X
申请日：2023-12-06
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： G01N27/327 , G01N27/48
摘要： 本发明公开了基于滚环放大和G四联体双信号比值电化学适应传感器和检测病原菌的方法，该传感器基于适配体识别诱导的RCA/G‑四联体策略，采用金电极，以检测致病菌超敏的比值双信号电化学生物传感器，使用过程中具有普适性，灵敏度高和特异性好，且该传感器还具有价格低廉，检测速度快，具有较高性价比，因此可以用于临床病原菌检测。
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公开(公告)号：CN111926063B
公开(公告)日：2021-03-23
申请号：CN202010851879.6
申请日：2020-08-21
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
摘要： 本发明具体涉及一种利用3D条形码的DNA分子检测方法，属于基因诊断技术领域，所述检测方法具体为，根据待测DNA序列设计DNA单链环C1和DNA单链L2，DNA单链L2两端序列与DNA单链环C1的一段序列全部杂交，连接DNA单链L2两端序列缺口，形成DNA单链双环C1C2，再与3D条形码上的探针杂交连接，待测DNA与DNA单链双环C1C2杂交，得到的部分双链DNA上具有限制性酶切位点，通过限制性内切酶切割双链DNA释放拓扑结构，在3D条形码表面进行固相RCA反应，最后进行荧光解码。本发明的DNA分子检测方法可以实现DNA单碱基突变的检测，检测灵敏度高、特异性强，最低能检测到0.1％的突变。
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公开(公告)号：CN111926062B
公开(公告)日：2021-03-23
申请号：CN202010850525.X
申请日：2020-08-21
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
摘要： 本发明具体涉及一种基于DNA互锁结构的DNA分子检测方法，属于基因诊断技术领域，所述检测方法为，根据待测DNA序列设计DNA单链环C1和DNA单链L2，DNA单链L2两端序列与DNA单链环C1的一段序列全部杂交，形成DNA单链双环C1C2，再与待测DNA杂交形成部分双链DNA，通过限制性内切酶切割双链DNA释放拓扑结构，以C1为模板进行RCA反应，在RCA反应产物基础上进行支链RCA反应，最后检测反应产物。本发明的DNA分子检测方法操作简单，对待测DNA具有高特异性，通过支链RCA反应放大检测信号，可以应用于背景复杂、含量低的DNA分子溶液的检测。
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公开(公告)号：CN111926063A
公开(公告)日：2020-11-13
申请号：CN202010851879.6
申请日：2020-08-21
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
摘要： 本发明具体涉及一种利用3D条形码的DNA分子检测方法，属于基因诊断技术领域，所述检测方法具体为，根据待测DNA序列设计DNA单链环C1和DNA单链L2，DNA单链L2两端序列与DNA单链环C1的一段序列全部杂交，连接DNA单链L2两端序列缺口，形成DNA单链双环C1C2，再与3D条形码上的探针杂交连接，待测DNA与DNA单链双环C1C2杂交，得到的部分双链DNA上具有限制性酶切位点，通过限制性内切酶切割双链DNA释放拓扑结构，在3D条形码表面进行固相RCA反应，最后进行荧光解码。本发明的DNA分子检测方法可以实现DNA单碱基突变的检测，检测灵敏度高、特异性强，最低能检测到0.1％的突变。
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公开(公告)号：CN111187806A
公开(公告)日：2020-05-22
申请号：CN202010022659.2
申请日：2020-01-09
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： C12Q1/682 , C12Q1/6825
摘要： 本发明涉及一种基于3D DNA纳米网状结构双信号放大技术的microRNA检测方法，本发明基于靶标自循环的催化发卡自组装与3D DNA纳米网结构的整合，构建了一个双信号放大技术的电化学生物传感器。设计的两个发卡序列一旦被靶标启动，即可形成热力学稳定的杂交双链体结构，同时释放靶标进入下一个循环。该过程成功将靶标转换为更加稳定的结构，从而达到第一次信号放大的目的。随后引入了一个3D DNA纳米网结构，该结构由三条DNA序列杂交形成的X型DNA结构通过T4连接酶连接而成。3D DNA纳米网结构可与上述反应形成的双链体结构杂交，从而实现第二次信号放大。具有检测灵敏度高、检测特异性好等优点。
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