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公开(公告)号：CN101434921B
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN200710177452.7
申请日：2007-11-15
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N1/20
Abstract: 本发明提供了一种培养磁细菌生产磁小体的方法，其以空气作为供养方式，通过补料的方式使得磁细菌持续生长，当溶氧达到或低于适合生产磁小体的溶氧时，通过将搅拌转速和/或空气流速与溶氧进行级联来控制溶氧在适宜磁小体生产的溶氧范围。本发明不用配气和纯的惰性气体而以通空气作为供氧方式可以将初始溶氧从100％饱和溶氧降至0％，配合搅拌转速和通气流速的调节可控制溶氧为0～20％饱和溶氧之间的任何值。从而降低了磁小体的生产成本，并对以后研究磁细菌在不同溶氧水平下的生理生化特点提供了技术保障。
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公开(公告)号：CN101195813A
公开(公告)日：2008-06-11
申请号：CN200810055661.9
申请日：2008-01-04
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了一种高效快速的单细胞微生物的破壁方法，该方法首先将细胞制备成10～30％的细胞悬液通入高压均质机中，对于原核单细胞微生物而言，设置压力为60～90MPa，对于真核单细胞微生物，则设置压力为90～150MPa，流速5～80升/小时，循环1～4次，即可对细菌或酵母实现100％的破壁。本发明方法可有效地应用于发酵工程产物提取工艺，节约时间，提高生产效率，并且无需任何化学药物辅助，尤其适用于发酵工业。
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公开(公告)号：CN101705274B
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN200910241354.4
申请日：2009-12-07
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及一种提高法夫酵母虾青素含量的法夫酵母培养方法。该方法包括法夫酵母野生菌株JCM9042菌种固体种子制备、一级种子培养、二级种子培养与发酵培养以及发酵液的虾青素含量测定。本发明的培养方法使用麦角甾醇合成抑制剂，可明显地促进法夫酵母中虾青素的积累，与不使用麦角甾醇合成抑制剂相比，本发明的培养方法能够提高虾青素的含量高达3-8倍以上。本发明的方法简单易行，麦角甾醇合成抑制剂及培养基成本低廉，有效地降低虾青素的生产成本，有利于工业化培养。
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公开(公告)号：CN102517265A
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN201110456336.5
申请日：2011-12-30
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N9/16 , C12N15/55 , C12N15/63 , C12N15/70 , C12N15/66 , C12N1/21 , D21C5/02 , C12P7/62 , C12R1/19
CPC classification number: Y02W30/648
Abstract: 本发明提供了一种酯酶Est_p6-，其氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。本发明从我国海洋底泥宏基因组文库中钓出新型酯酶基因，采用高效的表达方法，使其成功表达，为酯酶家族增添了新成员。该酯酶具有优良的酶学性质，可以应用于酶法催化脂解、酯化和转酯化相关的工业生产中，将有望成为补充和取代部分化学合成产品的新生产工艺的备选者。该酶的生产，将会在酶法水解制备天然香精、废纸浆脱墨再生等工艺中显示其重要的经济和社会价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101875925B
公开(公告)日：2011-10-05
申请号：CN200910238395.8
申请日：2009-12-07
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了一个新的单双酰脂肪酶Mdl(9)以及编码该酶的基因mdl(9)，该酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，编码该酶基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。实验表明，单双酰脂肪酶Mdl(9)具有较高的水解单酰甘油酯和二酰甘油酯的活力。本发明还提供其在巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)中的分泌表达载体和高效表达该酶的方法。采用该方法，表达的单双酰脂肪酶能有效地分泌到胞外，不仅降低了分离纯化成本，而且表达效率提高。在摇瓶培养的条件下，以甲醇为诱导物进行诱导培养时，胞外分泌量可达660mg/L，以单硬脂酸甘油酯为底物，酶活达到2700U/ml。本发明为该酶的工业化应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN101875925A
公开(公告)日：2010-11-03
申请号：CN200910238395.8
申请日：2009-12-07
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了一个新的单双酰脂肪酶Mdl(9)以及编码该酶的基因mdl(9)，该酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，编码该酶基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。实验表明，单双酰脂肪酶Mdl(9)具有较高的水解单酰甘油酯和二酰甘油酯的活力。本发明还提供其在巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)中的分泌表达载体和高效表达该酶的方法。采用该方法，表达的单双酰脂肪酶能有效地分泌到胞外，不仅降低了分离纯化成本，而且表达效率提高。在摇瓶培养的条件下，以甲醇为诱导物进行诱导培养时，胞外分泌量可达660mg/L，以单硬脂酸甘油酯为底物，酶活达到2700U/ml。本发明为该酶的工业化应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN101434922A
公开(公告)日：2009-05-20
申请号：CN200710177453.1
申请日：2007-11-15
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N1/20
Abstract: 本发明提供了一种培养磁细菌生产磁小体的最适溶氧控制方法，该方法在保证细胞生长不受营养限制的前提下，以细胞生长速度变慢作为溶氧达到并低于细胞生长临界溶氧的信号，通过控制转速和/或通气流速使溶氧始终处于细胞生长临界溶氧，即同时适合细胞生长和磁小体合成的最适溶氧水平。实验证明，采用本发明方法培养磁细菌生产磁小体，无论是最终细胞培养水平和磁小体产量还是细胞生长速度和磁小体生产速率都是目前报道的最高水平。
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公开(公告)号：CN101717731B
公开(公告)日：2012-08-01
申请号：CN200910241353.X
申请日：2009-12-07
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及葡萄糖代谢脱阻遏、高产虾青素的法夫酵母突变株MK19及其培养方法。采用60Co诱变筛选方法由法夫酵母野生型试验菌株得到本发明的法夫酵母突变株MK19，该法夫酵母突变株MK19经过固体种子活化、液体种子活化与发酵培养得到所述突变株MK19的发酵液。本发明的法夫酵母突变株MK19细胞密度达OD600＝32，虾青素含量为918.53μg/g，因此，该突变株细胞内虾青素含量是野生型菌株的22倍。此外，该菌株营养成分要求简单，培养基成本低廉，工业上应用可以简化虾青素生产工艺，缩短法夫酵母的生产周期，从而减少成本。
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公开(公告)号：CN101024090B
公开(公告)日：2011-04-20
申请号：CN200710002852.4
申请日：2007-02-08
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了一种由细菌纳米磁小体、聚乙烯亚胺和目的DNA组成的复合物，本发明还提供了该复合物的制备方法和使用方法。本发明所述的由细菌纳米磁小体、聚乙烯亚胺和目的DNA组成的基因传递复合物，制备方法和使用方法操作简单，能显著提高基因传递的效率，并能降低聚乙烯亚胺对细胞的毒性，为聚乙烯亚胺的广泛使用提供了可靠的技术保证。
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