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公开(公告)号：CN102839145A
公开(公告)日：2012-12-26
申请号：CN201210152991.6
申请日：2012-05-16
申请人： 中国农业大学 , 北京赛升药业股份有限公司
摘要： 本发明提供了一种高效表达重组蛇毒激肽原酶的基因工程菌，其是通过反转录克隆了江浙蝮蛇中的蛇毒激肽原酶基因，构建原核重组表达质粒pET30a/蛇毒激肽原酶基因(pET30a/VK)，转入到大肠杆菌中，从中筛选出高效分泌表达的菌株。该表达系统所表达的外源蛋白的N端具有His蛋白标签，通过Ni柱洗脱的方法进行纯化，极大地简化了重组蛋白的后续纯化工作，获得的重组蛋白纯度高达90％以上，且纯化效率高、成本低，适合目的蛋白的大规模制备。
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公开(公告)号：CN102732548A
公开(公告)日：2012-10-17
申请号：CN201210153576.2
申请日：2012-05-16
申请人： 中国农业大学 , 北京赛升药业股份有限公司
摘要： 本发明建立了一个用来高效表达重组蛇毒激肽原酶的麦胚无细胞蛋白合成系统，其是通过反转录克隆了江浙蝮蛇中的蛇毒激肽原酶基因，构建麦胚无细胞表达质粒pCS2+/VK，制备麦胚抽提物，建立体外转录和翻译体系，对蛇毒激肽原酶进行表达并对系统进行了优化。该表达系统所表达的外源蛋白的N端具有His蛋白标签，通过Ni柱洗脱的方法进行纯化，极大地简化了重组蛋白的后续纯化工作，且纯化效率高、成本低。该外源蛋白还具有生物学活性为下一步临床研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN102719461A
公开(公告)日：2012-10-10
申请号：CN201210152992.0
申请日：2012-05-16
申请人： 中国农业大学 , 北京赛升药业股份有限公司
摘要： 从白眉蝮蛇中分离纯化得到纤溶酶，测得该酶N端10个氨基酸的序列，据此设计上游引物；然后根据与其它蝮属蛇毒纤溶酶3’端非编码区同源性较高区域设计下游引物。从毒腺中抽提总RNA，用PCR扩增出该基因，克隆后经全序列测定表明该成熟蛋白的c DNA编码708个核苷酸，即236个氨基酸。该基因的成功克隆及基因序列测定为开发基因工程产品创造良好条件。
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公开(公告)号：CN116550402A
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202310802135.9
申请日：2023-07-03
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明提供一种用于检测马拉硫磷的3D纸基微流控装置，包括纸层ⅰ（a）、纸层ⅱ（b）和纸层ⅲ（c），纸层ⅱ（b）位于纸层ⅰ（a）和纸层ⅲ（c）之间，并能够折叠而固定纸层ⅰ（a）和纸层ⅲ（c），纸层ⅰ（a）和纸层ⅲ（c）上用油性马克笔绘制疏水通道，形成亲水区，在纸层ⅱ（b）留有亲水区，其中，纸层ⅰ（a）是加样层，亲水区预加载了ALP，纸层ⅱ（b）是酶水解层，亲水区固定有AA2P，纸层ⅲ（c）是化学发光层，亲水区固定着Pt‑Co‑N‑C纳米酶。本发明还提供一种使用上述装置检测马拉硫磷的方法。本发明无需任何仪器，操作简单、轻巧便携；与其他快速检测方法相比，具有更高的灵敏度。
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公开(公告)号：CN116399862B
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202310666768.1
申请日：2023-06-07
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明提供一种便携式富硒食品快速检测装置与方法，提供的检测装置包括：（1）3D打印装置的集成；所述3D打印装置包括底板、样品区、制备区、比色卡、色差仪支架、锁和盖；制备区包含纳米酶生物活性纸，且固定有Pt‑Co‑N‑C纳米酶；本发明通过刻度齿轮及固定腔的转动分别控制液体流量和种类，且结合纳米酶生物活性纸实现对富硒食品现场快速、便携式定性定量检测，且检测结果准确。
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公开(公告)号：CN114324318A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202210245540.0
申请日：2022-03-14
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： G01N21/78
摘要： 本发明涉及一种便携式农药残留检测装置与方法，用以解决现有农药监测装置不易携带的问题。本发明的便携式农药残留检测装置，包括：基座，设有转动台和样品放置部；固定座，安装于所述转动台上，且相对所述转动台能够水平旋转；多个检测组件，所述检测组件可拆卸安装于所述固定座上，且随所述固定座同步转动；所述检测组件设有储液腔，以备存放用于检测农药残留的试剂；所述检测组件设有与所述储液腔连通的出液口，所述检测组件随所述固定座旋转一周，所述出液口至少从所述样品放置部上方经过一次，以备所述试剂能够滴向所述样品放置部放置的样品。
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公开(公告)号：CN109609607B
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN201811594801.X
申请日：2018-12-25
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12Q1/6851
摘要： 本发明提供一种用于锌离子定量检测的方法，本发明检测主要包含两个反应步骤：依赖性切割反应和RT‑qPCR，在第一步中，将5μL Zn2+浓度的溶液、10μL Zn2+依赖性切割核酶溶液(17ES)和85μL切割缓冲液(300mM NaCl，40mM HEPES，pH 7.5)混合；在37℃下反应60min，之后，精准快速稀释105倍后进行RT‑qPCR实验，被切割的底物链无法作为模板进行扩增反应，而未被切割的底物链则可以通过扩增反应实现信号放大，最终结果以切割前后的Cq值变化(ΔCq)来表示切割效果，实现Zn2+的定量检测。本发明采用的Zn2+依赖性切割脱氧核酶17E是已知Zn2+依赖性切割脱氧核酶中切割速率最快的核酶。该酶能够催化切割底物链，并且对Zn2+具有高度亲和力和特异性。
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公开(公告)号：CN109825606B
公开(公告)日：2021-08-20
申请号：CN201910289636.5
申请日：2019-04-11
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12Q1/6804 , C12N15/11
摘要： 本发明提供一种食品中猪源成分快速检测试剂盒，涉及生物物种鉴定技术领域。本发明首先筛选出一个猪源通用内标准基因Actb，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其位于第8染色体上，在猪物种中拷贝数恒定，不存在等位基因变异，可作为鉴定猪源的靶基因。以该基因为靶序列设计了PCR扩增引物，与PCR反应液一起进行扩增，PCR反应产物用于铂钯纳米颗粒免疫层析试纸条检测。PCR反应结合基于铂钯纳米颗粒的免疫层析试纸条检测构成快速检测试剂盒，可快速、灵敏地检测食品中的猪源成分，检测灵敏度可达0.8％(w/w)。本发明试剂盒使用方法简单、成本低廉，反应结果易于观察，特异性好，非常适用于现场实时检测。
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公开(公告)号：CN108844951B
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN201810688361.8
申请日：2018-06-28
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明提供了一种汞离子检测产品、方法及智能手机成像分析系统。本发明提供的基于核酸碱基错配的侧流层析传感器包括序列表中SEQ ID№：1‑3所示至少一种核苷酸序列，其检测的特异性好、灵敏度高。本发明提供的配合所述侧流层析传感器使用的智能手机成像分析系统，可以通过手机将侧流层析传感器上显示的检测结果转换为汞离子的浓度值，简单高效的实现了样品中汞离子的定量检测。本发明提供的汞离子检测产品、方法及智能手机成像分析系统，非常适合于未经培训的人员进行现场测试，对于食品安全、环境安全等现场检测提供了很大的便利。
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公开(公告)号：CN110373425B
公开(公告)日：2021-06-29
申请号：CN201910675956.4
申请日：2019-07-25
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12N15/82 , C07K14/415 , C12N15/29 , A01H5/08 , A01H6/82
摘要： 本发明公开了NOR‑like1基因及其编码的蛋白质在调控番茄果实采后失水中的应用。本发明公开的NOR‑like1基因编码的蛋白质为氨基酸序列是序列3的蛋白质。本发明利用CRISPR/Cas9方法突变了植物中的NOR‑like1基因，得到了NOR‑like1基因突变体，该突变体的果实采后失水率是野生型的约4.6倍，通过甲苯胺蓝染色分析发现，NOR‑like1基因编辑的植物果实角质层存在明显缺陷，所得植物可以用于果实失水模型或角质层发育缺陷模型。以上结果说明NOR‑like1参与调控植物果实失水率及角质层发育。
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