公开(公告)号：CN117099678A

公开(公告)日：2023-11-24

申请号：CN202311041800.3

申请日：2023-08-18

申请人： 中国农业大学 ,  南京农业大学

发明人： 陈绍江 ,  刘晨旭 ,  钟裕 ,  王冬 ,  刘晋初 ,  和玉兵

IPC分类号： A01H1/02 ,  A01H1/04 ,  C12N15/82 ,  C12N15/29 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20 ,  A01H6/46 ,  A01H6/82

摘要： 本发明公开了一种高效鉴别植物单倍体的方法。本发明方法包括：构建能够在植物中表达甜菜红素的重组载体；将其转化至植物单倍体诱导系，得到阳性转基因植物单倍体诱导系；进行自交，得到携带纯合甜菜红素标记的植物单倍体诱导系；以其为父本与母本杂交，从杂交后代中选择仅胚乳携带甜菜红素标记的种子或者不携带甜菜红素的幼苗即为或候选为单倍体。本发明以甜菜红素为标记，将甜菜红素表达载体导入单倍体诱导系，能够克服R1‑nj等标记的缺点，达到高效鉴别植物单倍体的目的。

公开(公告)号：CN117099678B

公开(公告)日：2024-06-04

申请号：CN202311041800.3

申请日：2023-08-18

申请人： 中国农业大学 ,  南京农业大学

发明人： 陈绍江 ,  刘晨旭 ,  钟裕 ,  王冬 ,  刘晋初 ,  和玉兵

IPC分类号： C12N15/82 ,  A01H1/02 ,  A01H1/04 ,  C12N15/29 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20 ,  A01H6/46 ,  A01H6/82

摘要： 本发明公开了一种高效鉴别植物单倍体的方法。本发明方法包括：构建能够在植物中表达甜菜红素的重组载体；将其转化至植物单倍体诱导系，得到阳性转基因植物单倍体诱导系；进行自交，得到携带纯合甜菜红素标记的植物单倍体诱导系；以其为父本与母本杂交，从杂交后代中选择仅胚乳携带甜菜红素标记的种子或者不携带甜菜红素的幼苗即为或候选为单倍体。本发明以甜菜红素为标记，将甜菜红素表达载体导入单倍体诱导系，能够克服R1‑nj等标记的缺点，达到高效鉴别植物单倍体的目的。

公开(公告)号：CN112899303A

公开(公告)日：2021-06-04

申请号：CN202110171762.8

申请日：2021-02-08

申请人： 南京农业大学

发明人： 和玉兵 ,  占华东

IPC分类号： C12N15/84 ,  C12N15/55 ,  A01H5/10 ,  A01H6/46

摘要： 本发明属于植物基因工程领域，涉及一种利用胚乳特异性自杀获得非转基因的定向基因突变植株的方法及其应用，本发明利用能驱动基因胚乳特异表达的启动子驱动毒蛋白，开发了一种快速高效获得非转基因的定向基因突变植株的方法(简称TEKE系统，转基因植物胚乳自杀的基因编辑)，步骤为：a)构建一个用于对植物进行遗传转化的构建体，其含有第一核酸分子和第二核酸分子，其中第一核酸分子为基因编辑元件；第二核酸分子为胚乳致死或停止发育元件。b)将需要处理的植株通过引入外源核酸分子实施转基因。该系统能够自主消除转基因后代中含有转基因成分的种子，可用于简便快捷获得不含转基因片段的定点突变植株。

公开(公告)号：CN112063649A

公开(公告)日：2020-12-11

申请号：CN202010934705.6

申请日：2020-09-08

申请人： 南京农业大学

发明人： 和玉兵

IPC分类号： C12N15/82 ,  C12N15/65 ,  C12N15/53 ,  C12N15/54 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20 ,  A01H6/46

摘要： 本发明涉及一种植物遗传转化的无损筛选方法及其应用。植物遗传转化依赖高效的筛选系统，常用的筛选系统包括抗生素筛选、报告系统筛选。现有的报告系统筛选需要特殊的设备、昂贵的化学药品或对生物样品进行破坏性处理。本发明构建了一个新的报告基因RUBY，该基因合成的酶能将酪氨酸转化为红色的甜菜红素，本发明利用RUBY指示植物遗传转化的发生，成功实现可见光下裸眼可视的植物遗传转化的无损筛选。

公开(公告)号：CN112063650A

公开(公告)日：2020-12-11

申请号：CN202010934723.4

申请日：2020-09-08

申请人： 南京农业大学

发明人： 和玉兵

IPC分类号： C12N15/82 ,  C12N15/65 ,  C12N15/53 ,  C12N15/54 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20 ,  A01H6/46

摘要： 本发明涉及一种DNA顺式元件在植物中表达模式的无损监测方法及其应用。报告系统被广泛用于监测DNA顺式元件的表达模式，但是常用的报告系统需要特殊的设备、昂贵的化学药品或对生物样品进行破坏性处理。本发明构建了一个新的报告基因RUBY，该基因合成的酶能将酪氨酸转化为红色的甜菜红素，本发明利用RUBY监测DNA顺式元件的表达模式，成功实现了可见光下裸眼可视的DNA顺式元件在植物中表达模式的无损监测。

公开(公告)号：CN112080517A

公开(公告)日：2020-12-15

申请号：CN202010934721.5

申请日：2020-09-08

申请人： 南京农业大学

发明人： 和玉兵 ,  占华东

IPC分类号： C12N15/82 ,  C12N15/64 ,  A01H6/46 ,  A01H5/00

摘要： 本发明涉及一种提高获得基因编辑植株概率的方法及其应用。本发明将一个新的可见光下裸眼可视报告系统的表达盒与基因编辑系统的表达盒连锁到一个载体上，对植物进行遗传转化。因为与基因编辑系统发生连锁的报告系统能在植物体内产生红色的甜菜红素，且基因编辑表达盒在植物细胞中成功表达是植物被编辑的前提，所以可以直接通过甜菜红素的产生来指示基因编辑表达盒正常表达，从而直接通过可见光下裸眼可视植物体的颜色来挑选发生基因编辑的植株。本发明有效避免了通过抗生素筛选获得的植株中存在部分植株未发生靶位点编辑的情况，成功实现通过甜菜红素报告系统高效获得靶位点被编辑的植株。