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公开(公告)号：CN114316036B
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202210011206.9
申请日：2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 杨洋 , 茹毅 , 秦晓东 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种O型口蹄疫病毒广谱中和抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1为免疫原，免疫Balb/c小鼠，经细胞融合，筛选获得一株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系，并获得了一种鼠单克隆抗体9H6‑VP1，所述单克隆抗体9H6‑VP1为IgG1型单克隆抗体。免疫印迹试验表明所述单克隆抗体9H6‑VP1对O型不同谱系病毒(O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93)具有广谱反应性，而不和A型毒株进行反应；而且病毒中和实验表明所述单克隆抗体对O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93均具有中和活性，可阻止病毒入侵，保护机体免受感染。
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公开(公告)号：CN114316036A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202210011206.9
申请日：2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 杨洋 , 茹毅 , 秦晓东 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种O型口蹄疫病毒广谱中和抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1为免疫原，免疫Balb/c小鼠，经细胞融合，筛选获得一株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系，并获得了一种鼠单克隆抗体9H6‑VP1，所述单克隆抗体9H6‑VP1为IgG1型单克隆抗体。免疫印迹试验表明所述单克隆抗体9H6‑VP1对O型不同谱系病毒(O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93)具有广谱反应性，而不和A型毒株进行反应；而且病毒中和实验表明所述单克隆抗体对O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93均具有中和活性，可阻止病毒入侵，保护机体免受感染。
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公开(公告)号：CN114316035A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202210010319.7
申请日：2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 杨洋 , 秦晓东 , 茹毅 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒146s为免疫原，免疫Balb/c小鼠，经细胞融合，筛选获得两株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系，并获得了两种鼠单克隆抗体m33和m77。免疫印迹和间接免疫荧光试验表明所述单克隆抗体m33和m77对O型不同谱系病毒和A型谱系不同病毒均具有广谱反应性。m33和m77抗体特异性结合在FMDV结构蛋白中的型间保守抗原表位，相较于现有抗体，显著提高了检测结果的灵敏度和特异性，适用于O型和A型FMDV感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测，是一种FMD非免疫动物群体感染状况监测的新方法。
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公开(公告)号：CN117417895A
公开(公告)日：2024-01-19
申请号：CN202311352822.1
申请日：2023-10-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/12 , C12N7/00 , C12N15/113
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及ATG16L1或其WD40结构域敲除细胞系作为小RNA病毒科病毒生产细胞系的应用。本发明首先发现，抑制宿主细胞中ATG16L1或其WD40结构域的表达能促进小RNA病毒科病毒的复制；其次，本发明提供了特异性靶向ATG16L1基因WD40结构域的sgRNA，所述sgRNA能够特异性靶向WD40基因，结合CRISPR‑Cas9技术，在细胞系中实现了WD40结构域的敲除，获得的单克隆细胞系能够显著促进小RNA病毒科病毒的复制，提高小RNA病毒科病毒疫苗的生产量和抗原表达量，可作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗的生产细胞系，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN115725724B
公开(公告)日：2023-09-05
申请号：CN202211375093.7
申请日：2022-11-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 郝荣增 , 茹毅 , 卢炳州 , 杨洋 , 赵要风 , 马坤 , 刘恬然 , 李亚军 , 毛玉涵 , 王凌云 , 李丹 , 张克山 , 田宏 , 刘华南 , 张贵财 , 张越 , 陈娇 , 吴秀萍 , 任蕊芳
IPC: C12Q1/6883 , C12Q1/37 , C12N15/113 , A61K45/00 , A61K31/713 , A61K48/00 , A61K38/46 , A61P31/14 , C12N15/867 , C12N5/10 , C12N7/00 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种POP基因或蛋白为靶点在筛选抑制小RNA病毒科病毒复制药物中的应用。具体为：①本发明发现抑制/沉默POP基因/蛋白能够抑制小RNA病毒的复制，可作为靶点用于筛选抑制小RNA病毒复制的药物；②以POP为靶点的小干扰RNA能够干扰小RNA病毒的复制；③靶向POP的sgRNA结合CRISPR‑Cas9技术实现了POP的完全敲除，获得的细胞系对小RNA病毒具有抗性表型，为研究POP在细胞内的分子机制提供研究工具和材料；④过表达POP可以显著促进小RNA病毒的表达和复制，即POP蛋白可作为病毒/病毒疫苗表达增效剂或生产增效剂的应用，构建的POP过表达细胞系可作为病毒/病毒疫苗生产细胞系。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114316037B
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202210011223.2
申请日：2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 杨洋 , 秦晓东 , 茹毅 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种O型口蹄疫病毒结构蛋白的抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒146s作为免疫原，免疫Balb/c小鼠，经细胞融合，获得一株高效分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系，并获得了一种鼠单克隆抗体m19。间接免疫荧光试验表明所述单克隆抗体m19对O型不同谱系毒株均具有很好的反应性，而不和A型不同谱系毒株反应。利用单克隆抗体m19和O型结构蛋白兔抗血清建立了O型口蹄疫病毒结构蛋白固相竞争ELISA检测试剂盒，相较于现有抗体，显著提高了检测结果的灵敏度和特异性，适用于O型口蹄疫感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测，同时，也是一种监测口蹄疫非免疫地区感染情况的新方法。
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公开(公告)号：CN114835782A
公开(公告)日：2022-08-02
申请号：CN202210570210.9
申请日：2022-05-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/18 , C12N15/40 , C12N15/85 , A61K39/187 , A61P31/14 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种猪瘟病毒E0截短蛋白、制备方法及应用。本发明首先提供了一种猪瘟病毒E0截短蛋白，显著促进了E0蛋白的表达，产量可达0.38 mg/ml，而且不影响E0蛋白的免疫原性，可用于猪瘟亚单位疫苗的制备；在上述猪瘟病毒E0截短蛋白的基础上，本发明发现，将E0截短蛋白的第160位、162位、165位和166位氨基酸均突变为甘氨酸G，能够使E0截短蛋白的表达量进一步提升30％以上，且不影响其免疫原性。
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公开(公告)号：CN113637709A
公开(公告)日：2021-11-12
申请号：CN202110933585.2
申请日：2021-08-14
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/90 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12N15/113 , A61K31/7105 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 首先，本发明发现通过抑制或沉默宿主KIF5B基因，能够抑制口蹄疫病毒的复制，可作为靶点用于制备或筛选抑制口蹄疫病毒复制的药物；其次，以KIF5B为靶点，本发明设计了siRNA，所述siRNA能够抑制口蹄疫病毒复制，可用于制备抑制口蹄疫病毒复制的药物；同时，本发明提供了特异性靶向KIF5B的sgRNA，所述sgRNA能够靶向KIF5B基因，并结合CRISPR‑Cas9技术，实现了宿主细胞中KIF5B基因的完全敲除，获得的单克隆细胞系对口蹄疫病毒具有抗性表型，能够显著抑制口蹄疫病毒在细胞内的复制，也为进一步研究KIF5B基因在细胞内调控病原微生物复制的分子机制提供研究工具和材料。
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公开(公告)号：CN116514929B
公开(公告)日：2025-02-14
申请号：CN202310605563.2
申请日：2023-05-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/085 , C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/62 , A61K39/125 , A61P31/14 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及一种分子伴侣TF在促进A型塞内卡病毒结构蛋白VP2可溶性表达中的应用。本发明首先以SVA CH/FJ/2017毒株基因序列为基础，构建SVA VP2蛋白重组表达质粒pET28a‑SVA‑VP2；然后将pET28a‑SVA‑VP2重组质粒与分子伴侣pTf16质粒共同转入BL21(DE3)感受态细胞，成功制备了可溶性的的重组SVA VP2蛋白；所述重组VP2蛋白在体内、外试验中均具有良好的免疫原性，能够引发机体产生较强的体液免疫应答和细胞免疫应答，为SVA亚单位疫苗和诊断制剂的研制提供了试验材料和理论依据。
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公开(公告)号：CN115778946B
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202211375256.1
申请日：2022-11-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 郝荣增 , 茹毅 , 卢炳州 , 杨洋 , 李亚军 , 李丹 , 张克山 , 田宏 , 刘华南 , 毛玉涵 , 王凌云 , 张贵财 , 张越 , 陈娇 , 吴秀萍 , 任蕊芳
IPC: A61K31/4025 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种化合物ZPP在制备抗病毒药物中的应用。本发明意外发现，化合物ZPP能够使口蹄疫病毒和塞内卡病毒的复制水平降低，抑制口蹄疫病毒和塞内卡病毒结构蛋白的表达，具有抑制口蹄疫病毒和塞内卡病毒感染的作用，可用于制备抗口蹄疫病毒和塞内卡病毒感染的药物或佐剂，用于抑制口蹄疫病毒和塞内卡病毒的复制。但本发明并不局限于口蹄疫病毒和塞内卡病毒，在本发明所述的化合物ZPP能够抑制口蹄疫病毒和塞内卡病毒的复制的基础上，同样也能抑制小RNA病毒科其他病毒的复制，也可用于抑制其他病毒的复制，制备抗病毒感染的药物，或佐剂。
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