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公开(公告)号：CN115948466A
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202310019982.8
申请日：2023-01-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/85 , C12N7/00 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12R1/93 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及Tollip敲除细胞系的构建及作为小RNA病毒科病毒疫苗生产细胞系的应用。本发明首先发现，抑制宿主细胞中Tollip基因表达能促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制；其次，本发明提供了一种特异性靶向Tollip的sgRNA，所述sgRNA能够特异性靶向Tollip基因，结合CRISPR‑Cas9技术实现了Tollip基因的敲除，获得的单克隆细胞系能够显著促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制，提高FMDV疫苗的生产量和抗原表达量，可作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗尤其是FMDV疫苗的生产细胞系，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN116769928A
公开(公告)日：2023-09-19
申请号：CN202310743827.0
申请日：2023-06-23
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/6888 , G01N33/68 , A61K38/46 , A61P31/14 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/867 , C12N5/10
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种LTA4H基因/蛋白为靶点在筛选抑制口蹄疫病毒复制的药物中的应用。具体为：①本发明首先发现抑制或沉默LTA4H基因/蛋白能够抑制口蹄疫病毒的复制，可作为靶点用于筛选抑制口蹄疫病毒复制的药物；②以LTA4H为靶点的涉及了靶向LTA4H的sgRNA，结合CRISPR‑Cas9技术在PK‑15细胞中实现了LTA4H的完全敲除，获得的细胞系对口蹄疫病毒具有抗性表型，对未来预防或抑制FMDV感染提供一些理论依据，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN115948466B
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202310019982.8
申请日：2023-01-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/85 , C12N7/00 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12R1/93 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及Tollip敲除细胞系的构建及作为小RNA病毒科病毒疫苗生产细胞系的应用。本发明首先发现，抑制宿主细胞中Tollip基因表达能促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制；其次，本发明提供了一种特异性靶向Tollip的sgRNA，所述sgRNA能够特异性靶向Tollip基因，结合CRISPR‑Cas9技术实现了Tollip基因的敲除，获得的单克隆细胞系能够显著促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制，提高FMDV疫苗的生产量和抗原表达量，可作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗尤其是FMDV疫苗的生产细胞系，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN116948003A
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202310933866.7
申请日：2023-07-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/47 , C12N15/113 , A61K45/00 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12N5/10 , C12N7/00 , C12N15/85 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及EIF2B4敲除细胞系的构建及作为小RNA病毒科病毒疫苗生产细胞系的应用。首先，本发明发现过表达宿主EIF2B4基因，能够抑制FMDV的复制，可作为靶点用于设计和筛选抑制FMDV复制的药物；其次，抑制或沉默宿主EIF2B4基因获得的宿主细胞能够促进FMDV病毒的复制，可作为FMDV病毒或病毒疫苗的生产细胞系；基于此，本发明设计了一种特异性靶向EIF2B4基因基因的sgRNA，结合CRISPR/Cas9技术实现了EIF2B4基因的敲除，获得的单克隆细胞系能够显著促进FMDV在细胞内的复制，为研究EIF2B4基因的分子机制提供了工具和材料，具有广阔的前景。
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