葡萄霜霉病菌对羧酸酰胺类杀菌剂抗药性的Taqman-MGB检测方法

    公开(公告)号:CN109666754B

    公开(公告)日:2021-03-12

    申请号:CN201811413582.0

    申请日:2018-11-26

    摘要: 本发明涉及葡萄霜霉病菌纤维素合酶3基因第1105位核苷酸突变检测方法及其在羧酸酰胺类杀菌剂抗性监测中的应用,具体公开了检测该突变位点的特异引物对和探针序列。通过设计的引物和探针进行荧光PCR反应,一步即可判断出该菌株对羧酸酰胺类杀菌剂的敏感性,并且可以区分敏感菌株的杂合和纯合型。本发明提供的检测霜霉病菌对羧酸酰胺类药剂产生抗药性的分子诊断方法,灵敏度高、稳定性好、检测周期短,可以用于高通量监测田间葡萄霜霉病菌对羧酸酰胺类药剂的抗性发生、发展情况,实现霜霉病菌对羧酸酰胺类药剂抗性的早期预警,对及时有效地控制葡萄霜霉病菌抗药性的发展具有重要意义。

    一种离体扩繁葡萄霜霉病原菌的方法

    公开(公告)号:CN106754415A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201611237666.4

    申请日:2016-12-28

    IPC分类号: C12N1/14 C12N3/00 C12R1/645

    CPC分类号: C12N1/14 C12N3/00

    摘要: 本发明公开了一种离体扩繁葡萄霜霉病菌的方法,包括下述步骤:选取对霜霉病菌敏感的葡萄品种,采集葡萄一年生新梢自上而下的第3‑5片叶片,将消毒处理后的葡萄叶片用直径2cm的打孔器从叶片中部打取叶圆片,将叶圆片背面向上平摆在保湿培养装置中,每个圆叶碟上滴灭菌的蒸馏水;将葡萄霜霉病菌孢子囊制备成葡萄霜霉病菌孢子囊悬浮液,将悬浮液均匀涂布在质量百分浓度为3%的水琼脂平板上,将涂孢子囊的平板切成2mm×2mm的琼脂块,在显微镜下将含单孢子囊的琼脂块倒扣到叶盘上来促使侵染,培养4‑7天,在叶圆片部位形成的菌落即为葡萄霜霉病菌单个孢子囊的纯培养物。

    一种同时检测三类镰刀菌毒素的快速分子检测方法与应用

    公开(公告)号:CN102094080B

    公开(公告)日:2012-11-14

    申请号:CN200910250238.9

    申请日:2009-12-09

    IPC分类号: C12Q1/68 C12N15/11

    摘要: 本发明专用于检测三类最常见的镰刀菌毒素,属于植物检疫技术领域,具体的说涉及一种镰刀菌毒素的分子检测技术领域。该方法根据镰刀菌基因组内与毒素合成密切相关的Tri11基因,自行设计一组复合引物,从中国和国外采集得到的镰刀菌中检测分离得到镰刀菌毒素NIV、15ADON和3ADON的特异片段,该片段全长分别为643bp、424bp和342bp。本发明仅仅采用一组特异性引物,进行一次PCR扩增反应,利用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物,直接根据产物片断的长度,即可检测出禾谷镰刀菌产生的三种B型毒素的类型,本发明可应用于谷物、饲料和食品安全中毒素DON和NIV污染的检测。