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公开(公告)号：CN102351952B
公开(公告)日：2015-07-01
申请号：CN201110317558.9
申请日：2011-10-19
申请人： 中国医学科学院基础医学研究所
IPC分类号： C07K14/555 , C12N15/20 , C12N15/81 , C12N1/19 , C07K1/18 , C07K1/16 , A61K38/21 , A61P35/00 , C12R1/84
摘要： 本发明公开了一种低糖化突变体干扰素-λ1(IFN-λ1-Nm)及其表达、纯化方法。该低糖化突变体干扰素-λ1是将IFN-λ1成熟肽序列中N46位的Asn置换为Gln后得到的蛋白质。本发明实现了阻断毕赤酵母对IFN-λ1的N-糖基化位点的高甘露糖修饰过程，使IFN-λ1-Nm基因在嗜甲醇酵母中高效分泌性地正确表达，表达的重组IFN-λ1-Nm蛋白均一性明显提高，表达水平大于65mg/L，表达的重组蛋白经两步柱层析纯化后纯度大于98％，低糖化修饰的重组IFN-λ1-Nm蛋白具有和原嗜甲醇酵母表达的野生型IFN-λ1相同的生物学活性，同时具有较好的安全性。本发明为高效、大量、低成本生产具有生物活性且均一性好的低糖化修饰的IFN-λ1提供了一种有效方法，具有较高的实际应用价值，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN1962873B
公开(公告)日：2010-12-08
申请号：CN200510115720.3
申请日：2005-11-09
申请人： 中国医学科学院基础医学研究所
摘要： 本发明公开了一种IFN-λ1的表达方法及其专用表达载体和工程菌。该专用表达载体，是含有IFN-λ1基因表达盒的嗜甲醇酵母表达载体；所述IFN-λ1基因表达盒包括α因子的前导肽编码序列、编码前体IFN-λ1自氨基端第20至200位氨基酸残基的基因序列以及醇氧化酶(AOX)基因的启动子和终止子；所述α因子前导肽具有序列表中SEQ ID No：3的氨基酸残基序列；所述前体IFN-λ1具有序列表中SEQ ID №：2的氨基酸残基序列。本发明为高效、大量、低成本生产IFN-λ1提供了一种有效方法，具有较高的实际应用价值。
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公开(公告)号：CN1962873A
公开(公告)日：2007-05-16
申请号：CN200510115720.3
申请日：2005-11-09
申请人： 中国医学科学院基础医学研究所
摘要： 本发明公开了一种IFN－λ1的表达方法及其专用表达载体和工程菌。该专用表达载体，是含有IFN－λ1基因表达盒的嗜甲醇酵母表达载体；所述IFN－λ1基因表达盒包括α因子的前导肽编码序列、编码前体IFN－λ1自氨基端第20至200位氨基酸残基的基因序列以及醇氧化酶(AOX)基因的启动子和终止子；所述α因子前导肽具有序列表中SEQ ID №：3的氨基酸残基序列；所述前体IFN－λ1具有序列表中SEQ ID №：2的氨基酸残基序列。本发明为高效、大量、低成本生产IFN－λ1提供了一种有效方法，具有较高的实际应用价值。
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公开(公告)号：CN102351952A
公开(公告)日：2012-02-15
申请号：CN201110317558.9
申请日：2011-10-19
申请人： 中国医学科学院基础医学研究所
IPC分类号： C07K14/555 , C12N15/20 , C12N15/81 , C12N1/19 , C07K1/18 , C07K1/16 , A61K38/21 , A61P35/00 , C12R1/84
摘要： 本发明公开了一种低糖化突变体干扰素-λ1(IFN-λ1-Nm)及其表达、纯化方法。该低糖化突变体干扰素-λ1是将IFN-λ1成熟肽序列中N46位的Asn置换为Gln后得到的蛋白质。本发明实现了阻断毕赤酵母对IFN-λ1的N-糖基化位点的高甘露糖修饰过程，使IFN-λ1-Nm基因在嗜甲醇酵母中高效分泌性地正确表达，表达的重组IFN-λ1-Nm蛋白均一性明显提高，表达水平大于65mg/L，表达的重组蛋白经两步柱层析纯化后纯度大于98％，低糖化修饰的重组IFN-λ1-Nm蛋白具有和原嗜甲醇酵母表达的野生型IFN-λ1相同的生物学活性，同时具有较好的安全性。本发明为高效、大量、低成本生产具有生物活性且均一性好的低糖化修饰的IFN-λ1提供了一种有效方法，具有较高的实际应用价值，应用前景广阔。
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